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杜鹃兰种子共生与非共生萌发研究

花匠小妙招
2024-11-01 17:17

　　本研究以中药山慈菇药源植物杜鹃兰[Cremastra appendiculata(D.Don)Makino]为研究对象,通过显微观察、石蜡切片等方法观察、比较杜鹃兰非共生萌发成苗模式。探究杜鹃兰种子非共生萌发与共生萌发差异。比较培养基种类、添加酸水解酪蛋白、种子低温储藏时间、不同浓度6-BA、NAA等条件对杜鹃兰种子非共生萌发的影响。探究温度、光照强度、培养基、容器等条件对杜鹃兰共生萌发的影响。1杜鹃兰种子非共生萌发观察与比较杜鹃兰的原球茎先形成根状茎,仅进行有限分支,根状茎可形成休眠芽,其顶端分化出叶芽,叶基部长出根发育成苗,与另外两种兰科植物成苗存在显著差异。白及种胚膨大成原球茎后上端形成叶片,随后形成根直接成苗;建兰萌发形成根状茎后持续增殖,具有向地性,需改变培养基激素,才可分化成苗。观察杜鹃兰、建兰根状茎内部结构,存在明显差异。2不同条件对杜鹃兰种子非共生萌发的影响不同MS培养基萌发率无显著性差异。添加酸水解酪蛋白,1/2 MS生长速度显著大于1/4 MS。相同培养时间下,液体培养基中原球茎/根状茎长、宽显著大于固体。低温储藏3个月种子萌发率及生长速度较新鲜种子和储藏9个月的种子更佳。以1/2 MS+2 g/L CH(液体)为基本培养基,组合添加0.1 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA的萌发率最高,生长速度最快。3杜鹃兰的共生萌发研究与比较分离鉴定杜鹃兰种子的共生萌发菌,ITS测序表明:四株菌株中,D1、D2、D5为鬼伞属,D3可能为小鬼伞属。杜鹃兰种子共生萌发与非共生萌发存在差异。温度为20或25℃,黑暗或弱光(0或500-1100 lx),种子萌发率较高,正常光(2500-3000 lx)抑制种子萌发;3种容器培养无显著性差异。3种培养基上接种4株萌发菌,OMA培养基上萌发率均最大。结论:兰科植物种子非共生萌发成苗可区分为三种模式。杜鹃兰非共生萌发培养时,使用1/2 MS+2 g/L CH液体培养基,添加低温储藏3个月种子与0.1 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,培养60天萌发率最大,为71.11%。比较杜鹃兰共生与非共生萌发,发现共生萌发时间较短,原球茎产生绿色较慢,不形成分支,不易分化出根;非共生萌发所需时间较长,产生绿色快,通常形成分支,易分化出根。杜鹃兰种子共生萌发培养时,使用OMA固体培养基于玻璃平皿中培养,在黑暗或弱光,20或25℃条件下萌发率最大。

[关键词]：

杜鹃兰;种子;非共生萌发;共生萌发;萌发率

[文献类型]：硕士论文
[文献出处]：

陕西理工大学2022年

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