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十字花科作物病毒研究：主要病毒的季节变化与基因组变异.pdf全文

花匠小妙招
2024-11-05 02:46

植物病理学研究进展(第五卷) 181 十字花科作物病毒研究：主要病毒的季节变化和基因组变异陈集双冯明光柴立红陈洁云刘文洪 (浙江大学生命科学学院，杭州310029) 十字花科作物上的病毒在国际上没有像茄科、禾本科等作物上的病毒那样引起普遍重视。但是，国内研究者对我国十字花科作物病毒研究却有相对多的积累。尤其是20世纪80 年代以来，我国从病原和病害防治的角度，开展了大量的探索性研究和应用研究(刘栩平等，气候变化，尤其是冬季气候变暖和作物栽培制度的变化，作物病毒的发生因受到年度不同、地区差异、作物种类及其栽培技术体系改变等因素的影响而表现出新的特点。城市周围冬季大棚蔬菜、花卉的大规模种植、反季节栽培等新情况和新环境条件，势必导致我国十字花科作物病毒发生和流行规律的变化。本研究在前人研究积累的基础上，通过十字花科作物病毒的系统鉴定和分子检测，重新确定了浙江省及其周边地区侵染萝卜、小青菜、油菜、榨菜、白菜等十字花科作物的主要病毒种类及其病毒分子生态学特征，为新世纪作物病毒病控制和相关研究提供了新的理论基础。通过病毒分离接种、双链R．NA分析、病毒提纯、形态学观察和血清学反应测定，对基本接近，5年间TuMV的侵染率略高于CMV。以上结果得到了基于病毒基因组克隆和探针制备的RNA点杂交检测的验证。十字花科作物上CMV和TuMV的发生具有明显的季节变化规律。其中，春季(3。5月) 毒分离物较少，CMV和TuMV的比例接近。在系统检测的1998～2001年间，十字花科作物上病毒种类呈现明显的年度变化特征，于其随季节变化的差异。 ’ 个具有典型的卫星RNA条带，占检测样品的55％。其中，有1个CMV分离物同时携带1种个碱基以上，与我国其他地区发现的CMV卫星RNA的情况相似，而与欧洲等地在番茄上报植物病理学研究进展(第五卷) 植物。克隆，获得了2个来自杭州十字花科作物上的CMV卫星的全序列。经过序列分析，来自青 CMV 以分为3个大小类型。“小卫星RNA组”(8mallsatellite)：340nt，这些CMV分离物主要 CMV satellite)：368 来自于欧洲；“中长卫星RNA组”(middle—length nt；“长CMV卫星组”(10ng CMV satellite)：380nt，后两类主要来自亚洲地区。来自十字花科作物的2个CMY卫星RNA Yns和Rs分别属于“长CMV卫星组”和“中长卫星RNA组”。采用RT—PCR产物直接测序结合PCR产物克隆和重组质粒测序的方法，获得侵染十字花科作物的CMV分离物YNRNA3的全序列。该病毒分离物RNA3的全长序列由2220nt组酸组成，CP由217个氨基酸组成。在3a读框上游有121个碱基组成的前导区(非编码区)，框的3’端，有301个碱基组成的非编码区。这是国内外第一次确定十字花科植物CMV基的核苷酸序列在参与比较的序列中为最长，其余11个已报导的CMV分离物RNA3的大小为2193。2217nt。对12个CMVRNA3的同源性进行比较，将其归为2大类、3小类。CMV I(血清学亚组I)的分离物之间的同源 SubgroupIt(血清学亚组Ⅱ)的分离物与CMVSubgroup 性较低，均在80％以下；亚组内RNA3的全序列同源性则较高，均在95％以上。来自十字花 I。该分离物与来自我国台湾科作物的CMV—YN根据其RNA3全序列特征，属于S1-咖up 地区的分离物NT9和来自我国福建花生上的分离物PE具有最紧密的序列同源性关系。 CMV 结果相似，根据CP氨基酸序列的同源性获得的分组情况与血清学亚组也完全吻合。但是， CMV—YN与来自日本的分离物SO具有最紧密的氨基酸同源性，同时与来自我国台湾的分较高，形成C