第十二章 (2)几种花卉的组织培养陈传红 制作 2007 / 5本章内容与目的要求: 掌握百合生物学特性和快速繁殖方法 掌握兰科植物组培的大致过程 掌握胡蝶兰花梗组培的方法陈传红 制作 2007 / 5第一节 百合的组织培养★ 全世界已发现百合约89余种,主要分布地区是中 国、日本、北美和欧洲等温带地区;★ 北美百合协会将百合园艺品种划分为10个种系;★ 观赏栽培的主要是4个种系,即:亚洲百合杂种 系、茶香百合杂种系、东方百合杂种系、麝香百 合杂种系;★ 以上四品系株形端正,花色清白给人以清纯、高 雅的印象,是切花中的佳品。 陈传红 制作 2007 / 5亚洲百合我国昆明、上海、深圳的百合切花生产发展较快,已形成三大生产基地。陈传红 制作 2007 / 5 目前国内切花栽培的百合大多是亚洲型,主要从荷兰、日本引进,经过几年的栽培试验,已筛选出一批适合我国生产的品种。麝香百合陈传红 制作 2007 / 5一、形态特性和生物学习性★百合是百合科百合属植物的统称,为多年生的草本植物。★鳞茎无皮,广卵形,直径5 ~ 8cm,白色或黄白色,茎高30~90cm,直立,叶多而散生,披针形,光滑。★花单生或数花横向着生茎顶,花朵呈喇叭状、筒状,有清香。花被先端外卷,花被筒深处淡绿色。★百合属于球根花卉,要求肥沃、疏松和排水良好的沙壤土,以有利于鳞茎发育膨大。陈传红 制作 2007 / 5二、传统的繁殖方法1.分球法:百合母球生长过程中,于茎轴上逐渐形成小鳞茎,称“茎生小球”,经一年栽培,可分生1~3个甚至7~9个小球。 2.鳞片扦插法:于8~9月,取成熟健壮的老鳞茎,阴干后剥下鳞片,斜插于湿润木屑或颗粒泥炭中,在适宜温度、湿度下,经2~4个月生根发叶,并在鳞片基部生长出小磷片,1片鳞片可获50~60个子球,陈传红 制作 2007 / 5三、百合的组织培养★本方法自20世纪70年代后期开始,日本人以叶片为外植体诱导出大花卷丹的小植株;★我国于80年代初由兰洲百合的花药、花丝等培育出完整小植株。★ 80年代以后,培养出去病毒的百合种苗和通过胚培养获得远缘杂交的新品种。陈传红 制作 2007 / 5(1)取材和灭菌 花蕾(开花前数日的) 酒精70%擦拭花蕾表面 酒精灯上灼烧3~5s剥开花蕾(无菌培养皿内) 分别切取花丝、子房、花柱等(3~5mm) 接种。1、花器的组织培养陈传红 制作 2007 / 5(2)培养基 花柱(花梗、茎段等):MS + IAA l.0 + BA 0.2 ; 叶片用:MS+NAA 1.0+BA 0.1 ; 植株分化:MS + NAA 2.0 + IBA 0.4 + Kt0.05; 以上均附加:蔗糖3%和琼脂0.7%,pH5.8~6.2。(3)培养条件 光照度2000Lx,每天照用15h,保温 20℃。陈传红 制作 2007 / 5(4)生长情况★ 花器部位:以花丝的部位为好,成活率很高,发芽较多;其次为子房和花柱部分。★ 子球形成途径:一是从切中处形成愈伤组织,以后再发芽;或是从切口直接产生芽。★ 麝香百合花器培养得到的植株,生长约6个月即可开花,未发现不正常现象,只是母株的花较大,且全株无病毒症状。陈传红 制作 2007 / 52、鳞片组织培养 对于扩大培养材料来源,加快繁殖速度和培养得到无病毒苗等皆有重要意义。(1)取材与消毒:以鳞片外植体,受土壤微生物的影响,所以污染率相当高。为此外植体消毒要严加注意,可应用几种消毒剂并用的方法,切取0.5cm2鳞片接种。(2)初代培养基:MS + 2,4–D 1.0 + IAA 1.0 + Kt 0.5 继代培养:MS + NAA 2 + IBA 0.4 + Kt 0.05 (3)培养条件:25土 2℃,照光 9-10 h/d,光强1200 Lx。陈传红 制作 2007 / 5(4)生长情况★ 接种2周后,即有98%左右的鳞片切块在近轴面或边缘上有淡黄色的不定芽原基呈环状突起(2~4个/块),4周后,可形成中间抽出绿色的白色小鳞茎,其基部发生一些粗壮的根。★ 将幼苗切成1.5~2cm长的片断,接种到诱导愈伤组织的培养基上,3周后叶子的基部、叶脉、叶缘上均可诱导出一团团淡黄色的愈伤组织。★愈伤组织转移到分化培养基10周后,逐渐膨大,分化出许多大小不等的鳞茎,并在基部长出许多粗壮的根。陈传红 制作 2007 / 5(5)试管苗移栽 ★ 首先应把根部的培养基清洗干净。 ★ 移栽前,放在4~10℃低温条件下锻炼2~3周,这样移栽后的幼苗生长更加健壮。 ★ 移栽幼苗最好用消毒的腐殖土或泥炭土加蛭石的混合基质,育苗盘必须清洗消毒。 ★ 移栽后注意湿度管理,相对湿度控制在80~90%
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