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LjCYC1基因转化非洲紫罗兰及CFL基因转化仙客来、春兰×大花蕙兰杂种的研究

花匠小妙招
2024-11-08 23:29

【摘要】： 花型和花期是观赏植物的重要品质特征。非洲紫罗兰、仙客来和兰花是比较受人们欢迎的三种花卉。非洲紫罗兰虽然花色丰富但花型比较单一；而仙客来与兰花,特别是兰花,它们的营养生长期较长,若能得到花型和花期改变的新品种,定将具有广阔的市场前景。CYC基因主要参与控制花背腹轴不对称性,而LFY基因在花转变和花期调控以及花序和花发育各阶段都起重要作用。本研究利用基因工程技术将LjCYCl基因(百脉根CYC同源基因)转入非洲紫罗兰,CFL(黄瓜LFY同源基因)转入仙客来和春兰×大花蕙兰杂种,研究它们对花发育的影响,以期获得花型与花期改良的花卉新品种,进而为其它花卉和经济作物花型与花期的调控提供实验依据。本研究获得的主要结果如下：1、建立了非洲紫罗兰的遗传转化体系,并对非洲紫罗兰的转化体系进行了优化。2、PCR检测表明LjCYCl基因转化效率优化后为16.67%,是未优化时的3倍以上。进一步的GFP和RT-PCR检测证明基因已整合到非洲紫罗兰基因组中。3、转基因非洲紫罗兰植株花的表型变化主要有：(1)花的对称性明显改变,由辐射对称变为两侧对称,出现频率为14.3%；(2)部分花萼变成花瓣,出现频率为。7.1%；(3)花萼数目由原来的5或6枚减少为4枚,出现频率为7.1%；(4)花瓣向花冠基部裂开,形状发生变化,且花瓣数目减少,出现频率为57.1%；(5)雄蕊花瓣化或退化,出现频率为17.1%；(6)雌蕊退化或柱头分裂,出现频率为11.4%；(7)在转基因株系中有两个株系部分花的颜色发生了改变,由原来的紫色变为粉红色。4、建立了以仙客来叶片、叶柄和愈伤组织为转化受体的遗传转化体系。抗性植株经PCR检测表明转化效率分别为3.14%、0.35%和1.67%,进一步的RT-PCR和GUS检测证明CFL基因已整合到仙客来基因组中。5、探讨了春兰×大花蕙兰杂种的遗传转化方法。以原球茎为转化材料,通过Hyg筛选培养。抗性原球茎及植株经GUS染色与PCR检测后,初步证明CFL基因已整合到兰花基因组中。将筛选90d的抗性原球茎恢复培养4个月后,转入花芽诱导培养基中,50d后逐渐有花芽形成,至150d时,花芽形成率按瓶数统计可达75%,按苗数统计可达5%,而相同条件下的野生型苗花芽形成率按瓶数统计仅5%,按苗数统计仅0.7%。

【学位授予单位】：杭州师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011

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