噬菌体展示筛选花生主要过敏原Ara h 3的特异性纳抗体和Fag t 6：荞麦种子中的一种新型主要过敏原

• 花匠小妙招
• 2024-11-11 13:25

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目录

第一篇噬菌体展示法筛选花生主要过敏原Ara h 3的特异性纳米抗体

1．1食物过敏

1．2花生过敏原

1．3纳米抗体

1．4定量检测食品中的过敏原

2．1Ara h 3纯化

2．2电镜实验

2．3噬菌体展示实验

2．4基因克隆及质粒构建

2．5重组蛋白的表达及纯化

2．6凝胶过滤层析检测纳米抗体与Ara h 3相互作用

2．7等温滴定微量热实验

2．8酶联免疫吸附实验

2．9斑点印迹实验

2．10晶体的生长及优化

2．11蛋白质印迹检测晶体是复合物

2．12二维液相色谱多级质谱

2．13晶体衍射数据收集及处理

2．14Ficoll分离外周血淋巴细胞

第3章实验结果与讨论

3．1Ara h 3的纯化

3．2电镜观察Ara h 3蛋白形态

3．3单克隆噬菌体酶联免疫吸附实验

3．4纳米抗体的表达和纯化

3．5凝胶过滤层析检测纳米抗体与Ara h 3相互作用

3．6通过等温滴定微量热进行亲和力测量

3．7纳米抗体Nb16的特异性和灵敏度检测

3．8Ara h 3-Nb16复合物的结晶

3．9Ara h3-Nb16复合物的晶体学表征

3．10表达纯化花生过敏原Ara h 2

3．11花生过敏原Ara h 2免疫羊驼和分离羊驼的外周血淋巴细胞

第一篇小结

参考文献

第二篇Fag t 6:荞麦种子中的一种新型主要过敏原

4．1荞麦过敏原

4．2油质蛋白

4．3亲脂性过敏原在食物过敏诊断中的相关性

5．1过敏病人临床数据

5．2蛋白质印迹

5．3天然蛋白纯化

5．4二维液相色谱多级质谱

5．5抽提基因组

5．6基因克隆

5．7斑点印迹

5．8酶联免疫吸附试验

5．9圆二色谱

5．10交叉过敏反应

5．11天然Fag e1的纯化和质谱鉴定

第6章实验结果与讨论

6．1临床资料

6．2在苦荞亲脂蛋白粗提物中发现新的过敏原条带

6．3天然荞麦油质蛋白的纯化和二维液相色谱多级质谱仪鉴定

6．4天然苦荞油质蛋白的DNA序列和科学命名

6．5血清IgE与天然苦荞Fag t 6蛋白反应的斑点印迹分析

6．6酶联免疫吸附实验分析荞麦过敏患者血清与Fag t 6的反应

6．7圆二色谱对Fag t 6蛋白进行热稳定性分析

6．8荞麦与某些过敏原之间的IgE结合交叉反应性评估

6．9纯化Fag e 1和质谱鉴定

6．10血清IgE与天然Fag e 1蛋白反应的斑点印迹分析

6．11荞麦过敏原Fag t 6免疫羊驼和分离羊驼的外周血淋巴细胞

第二篇小结

参考文献

附录

致谢

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