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一种白及组培苗的快速培育方法.pdf

花匠小妙招
2024-11-12 11:06

说明书一种白及组培苗的快速培育方法
技术领域
本发明属于中药材种植技术领域，具体涉及一种白及组培苗的快速培育方法。
背景技术
白及是多年生草本。假鳞茎块根状，白色，肥厚，有指状分歧。花大而美丽，紫红色，可供栽培观赏。假鳞茎含白及胶、淀粉、挥发油等成分，有收敛、补肺止血、消肿等作用，可内服外敷，应用于咳血吐血、外伤出血、疮疡肿毒、皮肤皲裂、肺结核咳血、溃疡病出血等症。白及是一种日渐濒危的野生植物，种子萌发的条件苛刻，需与真菌共生，加上幼苗期较长，对环境敏感，因此在自然环境状况下很难通过种子进行有效的繁殖。随着野生资源的枯竭，白及药材市场价格一路攀升，已突破400元/kg大关。在如此高价的刺激下，最后残存的野生白及资源预计将在不久的将来耗尽。在利益的驱使下，种植户开始寻求白及人工栽培，但由于种苗极为匮乏，很难规模发展，甚至不能起步。因此，必须解决种苗繁育的技术问题，才能打破白及种苗瓶颈的限制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种白及组培苗的快速培育方法。该方法操作简单，种子萌发时间短，节约成本和时间。
本发明具体通过以下技术方案实现：
一种白及组培苗的快速培育方法，包括以下步骤：
1)选择完好的白及蒴果用75％的酒精浸泡消毒30s；
2)用0.2％的升汞将蒴果浸泡消毒10min，无菌水冲洗6次，充分冲洗干净；
3)将已消毒好并晾干的蒴果切开，将种子均匀地撒播在培养基上，按照培养条件培养；
4)将种子萌发已长至2厘米后的小苗按3～4棵一丛转接至壮苗培养基中培养。
进一步，步骤3)中所述的培养基通过以下方法制备：采用C培养基，依次加入各母液，NAA 1.0mg/L，马铃薯200g/L(切块煮汁0.5h，仅取汁)，香蕉40g/L打浆，蔗糖30g/L，琼脂4g/L，定容，测pH值至6.0。
进一步，步骤3)中所述的培养条件为：25±2℃、光照度为1500lux，12h光照、12h黑暗的培养室中培养三个月。
进一步，步骤4)中所述的壮苗培养基通过以下方法制备：采用1/2MS培养基，依次加入各母液，NAA 0.5mg/L，6-BA 0.2mg/L，马铃薯块茎打浆直接加入10g/L，香蕉打浆75g/L，蔗糖20g/L，琼脂4g/L，活性炭0.4g/L，定容，测pH值至6.0。
进一步，步骤4)中培养条件为：在25±2℃、光照度为1500lux，12h光照、12h黑暗的培养室中培养，待长出假鳞茎和根即可进行炼苗。
本发明的有益效果为：采用种子组培，所得到的幼苗污染率低，分化率高，遗传性状稳定，有效物质含量高，同时该方法与传统的白及种子无菌萌发得到组培苗相比，只需继代一次，用时短，节约了至少三个月的时间。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
实施例1
一、白及种子无菌萌发
1、培养基的配制
采用C培养基，依次加入各母液，NAA 1.0mg/L，马铃薯200g/L(切块煮汁0.5h，仅取汁)，香蕉40g/L打浆，蔗糖30g/L，琼脂4g/L。定容，测pH值至6.0左右。
2、白及蒴果/种子消毒
此项操作在超净工作台上进行。如果白及蒴果是完好未裂的，用75％的酒精彻底擦拭白及蒴果，或浸泡30s，倒出酒精；如果蒴果已开裂，用高密度的丝袜制成的小袋子包裹种子，消毒方法同前。
再用0.2％的升汞将上述的蒴果/种子消毒10min，无菌水充分冲洗6遍。将蒴果/种子在超净工作台上晾至完全干透。
3、白及种子接种
将已消毒好并晾干的蒴果切开，或直接将消毒好的种子均匀地撒播在培养基上，疏密适度。
4、培养
将接种好的种子放在25±2℃、光照度为1500lux(12小时光照、12小时黑暗)的培养室中培养三个月。
二、白及组培苗的生根壮苗
1、生根壮苗培养基的配制
采用1/2MS培养基，依次加入各母液，NAA 0.5mg/L，6-BA 0.2mg/L，马铃薯块茎打浆直接加入10g/L，香蕉打浆75g/L，蔗糖20g/L，琼脂4g/L，活性炭0.4g/L。定容，测pH值至6.0左右。
2、接种
将种子萌发已长至2厘米左右的小苗按3～4棵一丛转接至壮苗培养基中。
3、培养
将接种好的小苗放在25±2℃、光照度为1500lux(12小时光照、12小时黑暗)的培养室中培养。三个月后已长出假鳞茎和根的白及即可进行炼苗。
实施例2
2013年12月18日，白及种子无菌萌发的实验在云南中医学院医鉴己楼6301～6303实验室进行。选用10个蒴果，共播种400瓶。因白及种子细小，且蒴果间的成熟度不一致，具体的出苗率只能粗略估计为大于80％。
培养三个多月后，于2014年3月25日，将已长至2～3厘米高的白及小苗按3～4棵一丛转至壮苗培养基中继代培养。
培养三个多月后，于2014年7月15日将已长出假鳞茎和根的白及小苗送至昆明小哨种植基地。经十天的炼苗后，种于地里，覆盖松针并搭遮阴网。两个月后，绝大多数苗长势良好，统计成活率达到92.36％。2015年1月，倒苗后挖出白及假鳞茎统计大小，平均大小为1.78厘米。
实践证明，本方法的实施，可以缩短白及的培养周期，并能达到较好的结果。