水稻细菌性条斑病菌和水稻白叶枯病菌对过氧化氢敏感性差异的分子机制研究

• 花匠小妙招
• 2024-11-14 07:10

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摘要

英文摘要

第一章文献综述

1水稻细菌性条斑病(BLB)和水稻白叶枯病(BLS)的研究现状

1．1水稻白叶枯病菌和水稻细菌性条斑病菌的发现、分类以及生理生化特征

1．2BLB和BLS的病害循环以及发病症状

2细菌的氧化应激以及防御机制

2．1活性氧的种类和产生途径

2．2活性氧对细胞的危害

2．3原核生物抵御活性氧伤害的机制

3本论文研究目的及意义

第二章调控Xoo和Xoc抗氧化能力差异的OxyR蛋白重要氨基酸位点筛选

1材料与方法

1．1供试菌株和质粒

1．2主要试剂

1．3培养基

1．4Xoo和Xoc基因组DNA的提取

1．5Xoo和Xoc感受态细胞的制备

1．6质粒DNA的提取

1．7Xoo和Xoc的OxyR点突变载体的构建

1．8Xoo和Xoc的OxyR点突变体的构建

1．9H2O2敏感性的测定

2结果与分析

2．1Xoo和Xoc的OxyR氨基酸序列的比对

2．2Xoo和Xoc的OxyR氨基酸点突变体的构建

2．3OxyR氨基酸点突变后对Xoc和Xoc的H2O2敏感性的影响

3讨论

第三章OxyR氨基酸点突变对菌体抗氧化能力的影响

1材料与方法

1．1实验试剂

1．2供试菌株

1．3过氧化氢酶活力测定

1．4菌体内源H2O2含量的测定

1．5RNA的提取

1．6RNA的反转录

1．7实时荧光定量PCR(qRT-PCR)

1．8突变体以及野生型菌株生长曲线的测定

1．9不同菌株在水稻上的致病力实验

2结果与分析

2．1OxyR氨基酸点突变对Xoc和Xoo过氧化氢酶活力的影响

2．2OxyR氨基酸点突变对Xoc和Xoo菌体内H2O2积累量的影响

2．3OxyR氨基酸点突变对Xoc和Xoo过氧化氢酶基因(catB和katE)和oxyR相对表达量的影响

2．4OxyR点突变对Xoc和Xoo生长速率的影响

2．5OxyR点突变对Xoc和Xoo致病力的影响

3讨论

第四章OxyR氨基酸点突变对OxyR蛋白与catB启动子结合能力的影响

1材料与方法

1．1主要试剂

1．2供试菌株和质粒

1．3OxyR蛋白表达载体的构建

1．4蛋白表达与纯化

1．5凝胶迁移电泳实验(EMSA：electrophoretic mobility shift assay)

2结果与分析

2．1不同菌种的OxyR蛋白氨基酸序列比对

2．2野生型和突变体OxyR蛋白的表达与纯化

2．3不同OxyR氨基酸点突变体与DNA结合的能力

3讨论

全文总结

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的学术论文

致谢

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