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园林植物遗传学实验指导书.doc

园林植物遗传学实验指导书

园林植物遗传学实验指导书 北京林业大学园林学院观赏园艺教研室 2002年7月 目录 实验须知 实验一 遗传基本规律的验证 实验二 根尖细胞有丝分裂涂抹制片法 实验三 花粉母细胞减数分裂制片法 实验四 花粉管生殖细胞的有丝分裂 实验五 园林植物遗传力的估计 实验须知 上好实验课是学好园林植物遗传学的重要环节,它不仅使同学们验证课堂上所学的理论知识,加深理解教师讲授的内容,而且使同学们得到基本实验技能、技巧的训练,为将来从事园林植物遗传育种方面的研究工作打下一定基础,因此必须予以足够的重视。为此,必须做到: 一、实验前预习实验指导书并复习有关内容;准备好实验报告纸、铅笔、橡皮、尺子、钢笔(或圆珠笔)等; 二、按实验指导及教师的要求进行观察、记载,写好实验报告。字迹要整洁、清楚。绘图一律用铅笔,解答用兰色或黑色圆珠笔书写。 三、爱护实验仪器、设备,注意节约药品和各种实验材料;按操作规程使用仪器,严禁私自拆卸仪器及调整仪器附件,如有损坏,照价赔偿。 四、注意安全,严格遵守操作规程,如遇特殊情况应及时报告指导教师。 五、保持实验室安静,不得在实验室内喧哗,不得迟到或早退。实验完毕后,将实验用品放回原来位置。各组轮流打扫卫生。 实验一 遗传基本规律的验证 一、实验说明 遗传学有三个基本规律分离规律、自由组合规律和连锁交换规律。这三个规律在生物界的遗传中具有普遍意义。限于目前园林植物中用于进行三个基本规律的分析的典型材料较少,固用遗传分析较为成熟的玉米为材料进行分析。 用玉米进行研究主要有以下优点:(1) 由于“花粉直感”现象,很多性状可在种子上看到;(2) 同一果穗上有数百粒种子,便于计数分析;(3) 雌雄蕊长在不同花序上,去雄容易,杂交也方便;(4) 便于贮藏保管;(5)玉米是一种经济作物,有些实验结果可直接用于实践,且由于经过多年深入研究,人们对其遗传规律已有较清楚的了解,因此目前玉米已被普遍用于遗传学实验研究。 二、实验目的 1通过对玉米果穗标本的观察,验证并加深理解遗传学三个基本规律。 2掌握对植物材料杂种后代分离情况进行分析的基本方法。 三、实验材料及用具 各种分离的玉米果穗标本;手揿计数机。 四、实验原理 玉米籽粒有胚、胚乳和果皮三部分。由于形成种子前双重受精的结果,胚为二倍体(2n),胚乳为淀粉层和糊粉层均为三倍体(3n),它们性状发育的方向是由父母本的遗传基础共同决定的,当代表现亲本显性性状。因此如父本花粉中含有显性基因时,它所决定的性状就能在当代母本籽粒上表现出来,这种现象叫“花粉直感”。果皮是由子房壁及珠被发育而成,属母本体细胞组织。它的性状发育是由母本的遗传型决定,与当代授粉作用无关,不表现“花粉直感”。 玉米胚乳中淀粉层的性状有甜(su)与非甜(Su),糯质(wx)与非糯质(WX),凹陷(Sh)与饱满(sh)等,主要受一对基因的控制;淀粉层有的有色有的无色、红色、紫色三种性状由7对基因控制,表现基因的相互作用。玉米的果皮有红色、花斑、棕色及白以等多种,其表现一般是P与BP两对基因互作的结果。当具有隐性甜胚乳 (su,su)性状的个体授以显性非甜(Su,Su)胚个体的花粉时,由于花粉直感作用,当代就能得到非甜种子(Su,su)。由它长成的F1植株在形成性细胞时,相对基因Su、su发生分离,产生两种类型的配子Su、su,其数目相等。F1植株与隐性亲本(su,su)测交得到的甜与非甜为1∶1的分离比例;自交则产生甜与非甜为3∶1的比例。若植株为两对基因杂种,则形成性细胞时产生四种数目相等的配子,自交则产生四种表型的个体,其比例是9∶3∶3∶1,测交为1∶1∶1∶1。F1配子发生分离的直接证明是杂合糯玉米株在花粉粒上的分离。纯合糯质玉米(wxwx)产生的种子和花粉内含有全部技链淀粉,与碘作用呈红棕色。纯合非糯玉米(WxWx)产生的种子和花粉则含有部分直链淀粉,与磺作用呈兰黑色。根据此颜色反应可验证配子形成时发生的分离,这个分离结果也可在WxWx×wxwx测交中,从籽粒性状的分析上得到反映。当控制两个性状的基因位于同一条染色体上时,则不呈现上述规律。例如,糊粉层的颜色有色(C)对无色(c)是显性,正常胚乳(Sh)对凹陷胚乳(sh)是显性,由于C和Sh,c和sh分别连在同一条杂色体上,因此有连在一起遗传的倾向,即亲组合(C-Sh-,ccshsh)所占百分率远远大于重组合(C-Shsh,ccsh-)的百分率。重组合是交换的结果。 五、实验方法 1. 观察一对基因杂种,如:Susu; Yy; Wxwx等的自交与测交果穗 标本并计数,将统计数字填入下表①,并进行适合度测定,检查其是否符合一对基因的分离比例: 表1果穗号 籽粒类型 项目 观察数(O) 理论数(C 偏差(D) 显性 O1 C1 隐性 O2

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