高盐沉淀CTAB法提取温室菊花基因组DNA
高盐沉淀CTAB法提取温室菊花基因组DNA - 生物技术通报
生物技术通报 ·研究报告 · B IO TECHN OLO G Y BULL E T IN 2009年第 7 期 高盐沉淀 CTAB法提取温室菊花基因组 D NA 1 2 马月萍 戴思兰 ( 1 东北大学理学院生物技术研究所 ,沈阳 110004; 2 北京林业大学园林学院 ,北京 100083) 摘 要 : 根据温室菊花植物组织富含多酚 、多糖的具体特性 , 对 CTAB 法加以改进 :在待沉淀液中加入 1 / 2 体积 5 mo l ·L - 1 N aC l。改进后的方法获得的 DNA 质量 良好 , 电泳条带清晰 ,提取过程无明显的 DNA 降解 ,基本上排除了多酚物质的 干扰 。以提取的 DNA 为模板 ,用一对引物扩增菊花中 18 S基因 ,得到条带单一 ,大小与已知一致 ,说明获得的 DNA 可以进 行 PCR 扩增 , E coR I酶切基因组 DNA 图谱表明 ,提取的 DNA 能被限制性 内切酶完全酶切 ,可 以满足相关的分子生物学 研究 。 关键词 : 菊花 基因组 DNA 的提取 高盐沉淀 CTAB 法 Genom ic D NA Extraction from Ch rysan th em um Using H igh Sa lt CTAB M ethod 1 2 M a Yuep ing D ai Silan 1 ( Colleg e of S ciences, N ortheas tern Un iversity, S heny ang 110004; 2 College of L andscap e A rch itectu re, B eij ing F orestry Un iversity, B eij ing 100083) Ab s tra c t: B a sed on CTAB m ethod, som e p rotocal wa s modified according to the p hysio logical characteristic s of h igh contain ing - 1 contents of polyp heno lic s and po lysaccharides in Ch ry san them um A dding 50% volum e of 5 mol ·L N aCl into the solution wh ich p re cip itating H igh quality genom ic DNA can be extracted from Ch ry san them um u sing the imp roved m ethodThe DNA wa s p referab le e nough to be u sed as PCR temp late and digested by restriction enzym e comp letely and other
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