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引起猕猴桃枝枯和叶斑的间座壳菌种类鉴定及致病性研究

花匠小妙招
2024-11-20 12:20

引起猕猴桃枝枯和叶斑的间座壳菌种类鉴定及致病性研究

【摘要】： 植物病原间座壳属真菌的寄主范围和地理分布十分广泛,可引起多种作物的枯萎病、溃疡病、叶斑病、腐烂病及果腐病。近年来,我国猕猴桃主产区枝枯和叶斑病的发生较为普遍,对猕猴桃产量、品质构成较大威胁,生产上对解决此问题的需求日益迫切。本研究对我国猕猴桃主产区枝枯和叶斑病的发生危害状况进行调查,采集病样进行病原菌分离,采用形态学及分子生物学相结合的方法对病原菌进行鉴定并利用柯赫氏法则(Koch’s postulates)验证,以明确引起猕猴桃主产区枝枯和叶斑病的病原菌种类,为该病的有效防控提供了理论依据。1)引起猕猴桃枝枯和叶斑的病原间座壳属真菌种类鉴定2017-2019年对安徽、重庆、福建、湖北、河南、陕西、山东、四川和浙江等9个猕猴桃主产区种植的中华猕猴桃(Actinidia chinensis)和美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)进行枝枯和叶斑病发生危害状况调查和田间症状描述,并采集10个栽培品种(红阳、金艳、翠玉、黄金、龙藏红、东红、金魁、徐香、海沃德、翠香)的枝枯和叶斑病样共106份。通过组织分离和纯化,从所采集的病样中共获得350个菌株,根据菌落形态和分生孢子特征判断,其中283个为间座壳属(Diaporthe)菌株(201个来源于枝枯病样,82个来源于叶斑病样)。对这些菌株的形态学特征观测结果显示,不同菌株的菌落颜色及气生菌丝形态存在较大差异,且这些差异又易受培养环境影响而发生变化,因而单纯依据形态学特征很难进行种的鉴定。根据对283个间座壳菌初步的形态学观察及EF1-α基因的序列分析,选取44个代表菌株进行多基因(ITS,EF1-α和TUB)系统发育学和形态学分析。结果显示,所获得的283个菌株分别归属于间座壳属(Diaporthe)的7个种,其中蜜柑间座壳菌(D.unshiuensis)100个菌株、榆树间座壳菌(D.eres)94个菌株、大豆间座壳菌(D.sojae)57个菌株、香港间座壳菌(D.hongkongensis)19个菌株、女贞间座壳菌(D.compactum)5个菌株、八角枫间座壳菌(D.alangii)5个菌株、柚木间座壳菌(D.tectonae)3个菌株。结果还看出分离组织之间的病菌种类有异,从猕猴桃叶斑病样分离的间座壳菌有D.unshiuensis、D.eres、D.sojae、D.compactum、D.hongkongensis和D.alangii6种,从猕猴桃枝枯病样分离的间座壳菌有D.unshiuensis、D.eres、D.sojae、D.hongkongensis、D.compactum、D.alangii和D.tectonae 7种,而从猕猴桃枝枯和叶斑病样分离到的D.unshiuensis、D.eres、D.sojae三个种的分离比例均为最高,其分离比例分别为42.79%、31.34%、14.93%(枝枯)和37.80%、32.93%、17.07%(叶斑)。本研究是我国猕猴桃枝枯和叶斑的病原间座壳属真菌种类的首次报道。2)来源于猕猴桃枝枯和叶斑病样的间座壳菌的致病性在室内将7种来源于猕猴桃枝枯和叶斑病样的14个间座壳菌代表菌株有伤接种到中华猕猴桃(Actinidia chinensis)翠玉品种的叶片、美味猕猴桃(Actinidia deliciosa)海沃德品种的果实和中华猕猴桃翠玉、红阳、黄金和金艳品种的枝条的结果显示,这7种间座壳菌均可侵染猕猴桃的枝条、叶片和果实,但其致病力强弱存在显著差异,其中D.alangii和D.tectonae的致病力显著强于D.unshiuensis、D.eres、D.sojae、D.hongkongensis和D.compactum。在室内采用5种蔷薇科植物包括梨(Pyrus Linn.)、桃(Prunus persica Sieb.et Zucc)、杏(Prunus armeniaca L.)、李(Prunus salicina L.)、苹果(Malus pumila Mill)的离体枝条有伤接种7种来源于猕猴桃枝枯和叶斑病样的14个间座壳菌代表菌株的结果显示,7种间座壳菌均可侵染这5种蔷薇科植物,但其致病表现因接种植物的不同存在明显差异。

【学位授予单位】：华中农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2020

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