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植物组织培养室的构建及培养基植物材料消毒液.ppt

花匠小妙招
2024-11-23 19:57

＊当某些营养元素的供应不足时，愈伤组织所表现出来的症状如下：氮：某些组织表现出一种花色素苷的颜色；不能形成导管；氮，钾或磷：细胞过度生长，形成层组织减退；硫：非常明显的褪绿；铁：细胞分裂停止；硼：细胞分裂停滞，细胞伸长；锰或钼：影响细胞伸长。不同营养条件对植物组织培养的影响 -MS Salts Growth medium is optimised for regeneration of plantlets The explant is completely covered with green shoots, and roots are developing on the lower surface No MS salts No sign of regeneration from explant at all. MS salts reduced to 0.47 g. l -1 Some root growth but reduced development of shoots （ 1/10 ） MS MS salts increased to 9.52 g. l -1 Shoots developed on upper surface of explant. No roots or callus. (2MS) 碳源：最常用的是蔗糖，提供碳源；维持培养基渗透压。葡萄糖和果糖也是较好的碳源，可支持许多组织很好的生长。麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在组织培养中也有应用。蔗糖使用浓度在 2% — 3% ，常用 3% ，即配制一升培养基称取 30g 蔗糖，有时可用 2.5% ，但在胚培养时采用 4%-15% 的高浓度，因蔗糖对胚状体的发育起重要作用。 2 、有机营养成分维生素：维生素 (vitamin) 这类化合物在植物细胞里主要是以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长、分化等有很好的促进作用。虽然大多数的植物细胞在培养中都能合成所必需的维生素，但在数量上，还明显不足，通常需加入一至数种维生素，以便获得最良好的生长。主要有 VBl ( 盐酸硫胺素 ) 、 VB6 ( 盐酸吡哆醇 ) 、 Vpp( 烟酸 ) 、 Vc （抗坏血酸）、有时还使用 VH( 生物素 ) 、 VB11( 叶酸 ) 、 VB12 （钴胺素 ) 等。一般用量为 0.1 — 1.0mg ／ L 。有时用量较高。 VB1 对愈伤组织的产生和生活力有重要作用， VB6 能促进根的生长， Vpp 与植物代谢和胚的发育有一定关系。 Vc 有防止组织变褐的作用。氨基酸 (AA) ：是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。最常用的是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等。有时应用水解乳蛋白或水解酪蛋白，它们含有约 20 种氨基酸的混合物，用量在 10- 000mg/L 之间。由于它们营养丰富，极易引起污染。如在培养中无特别需要，以不用为宜。天然复合物：其成分比较复杂，大多含氨基酸、激素、酶等一些复杂化合物。它对细胞和组织的增殖与分化有明显的促进作用，但对器官的分化作用不明显。它的成分大多不清楚，所以一般应尽量避免使用。 ? 1) 椰乳是椰子的液体胚乳。 ? 2) 香蕉主要在兰花的组织培养中应用，对发育有促进作用。 ? 3) 马铃薯 (potato) 去 ? 4) 水解酪蛋白 ? 5) 其他酵母提取液 (YE)(0.01%-0.05%) 肌醇 (myo — inosltol) 又叫环己六醇，在糖类的相互转化中起重要作用。通常可由磷酸葡萄糖转化而成，还可进一步生成果胶物质，用于构建细胞壁。肌醇与 6 分子磷酸残基相结合形成植酸，植酸与钙、镁等阳离子结合成植酸钙镁，植酸可进一步形成磷脂，参与细胞膜的构建。使用浓度一般为 100 mg/L ，适当使用肌醇，能促进愈伤组织的生长以及胚状体和芽的形成。对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。 Growth medium is optimised for regeneration of plantlets No sucrose (0% ) Sucrose reduced to 1% Sucrose increased to 5% The explant is completely covered with green shoots, and roots are developing on the lower surface Very few shoots have developed on the explant. No roots and n