一种蝴蝶兰组织培养方法与流程
本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰组织培养方法。
背景技术：
蝴蝶兰(phalaenopsisaphroditerchb.f.)为兰科蝴蝶兰属，原产于亚热带雨林地区，为附生性兰花。蝴蝶兰白色粗大的气根露在叶片周围，除了具有吸收空气中养分的作用外，还有生长和光合作用。新春时节，蝴蝶兰植株从叶腋中抽出长长的花梗，并且开出形如蝴蝶飞舞般的花朵，深受花迷们的青睐，素有“洋兰王后”之称。
为了满足花卉市行业的需求，传统的蝴蝶兰种植方式已经难以满足市场需求，因此目前蝴蝶兰最常用的种植方法是利用其组织进行无性繁殖，这样既能够大量繁殖植株、有能够是子代蝴蝶兰符合母本的表型性状，应用前景良好。
目前，蝴蝶兰属植物的离体快繁研究多集中在牡丹上，有关蝴蝶兰组织培养的国内外研究较少，已有的关于蝴蝶兰组织培养技术，仅讨论了无菌体系的建立，还没有形成一整套利用蝴蝶兰地下芽快速繁殖的方法，也没有涉及到蝴蝶兰组培苗的生根和移栽，不能为生产提供依据。
技术实现要素：
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养方法，在岭南两广地区，针对蝴蝶兰不同生长阶段的需求设计不同的培养基，通过该方法能够使整个蝴蝶兰生长周期缩短。
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养方法，包括蝴蝶兰茎尖获取、蝴蝶兰茎尖灭菌消毒以及对灭菌消毒后的蝴蝶兰茎尖进行初代培养、继代培养和生根培养的步骤：
(1)蝴蝶兰茎尖获取：秋季剪取蝴蝶兰新萌发的小芽，经纯净水流动冲洗35min后放于超净工作台上；
(2)蝴蝶兰茎尖灭菌消毒：用75％的酒精浸泡20～29秒，然后用2％的升汞浸泡30～60秒，并吸干表面水分；
(3)蝴蝶兰茎尖的初代培养：培养20-25天，温度为23-27℃、光照12h、光照强度1500-2000lux；
所述的初代培养的培养基为ms+0.2mg/l～0.5mg/lga3+2～3mg/l6-ba；
(4)蝴蝶兰的继代培养：
取小芽基部，切成lcm长的小段，接种于ph值为6.3-6.8的ms培养基上；
增殖培养4周,增殖培养的培养温度为23-27℃，光照12h、光照强度1500-2000lux；
所述的继代培养的培养基为ms+1.5mg/l～2mg/l6-ba+1mg/l～2mg/ltdz、蔗糖35g/l、琼脂5g/l，
(5)蝴蝶兰的生根培养：
生根培养基为加入活性炭的ms培养基，当根长为2-4cm时，进行驯化移栽，将培养瓶移至大棚内炼苗15-20天，洗去培养基，移栽入穴盘中，覆盖薄膜，同时遮荫75％，2周后除去薄膜，给予全光照，进行肥水管理。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
(1)通过本发明的蝴蝶兰组培苗植株，生根率最高达到20％。
(2)采用茎尖进行离体培养产生的组培苗能够保持原品种的优良性状，为良种繁育和产业化生产奠定了基础。
(3)本发明的蝴蝶兰组织培养方法，操作简单、成本低廉，适于多数观赏蝴蝶兰的快速繁殖。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。下面实施例中未注明具体条件的实验方法，均按照本领域的常规方法和条件进行。
实施例1
(1)蝴蝶兰茎尖获取：秋季剪取蝴蝶兰新萌发的小芽，经纯净水流动冲洗35min后放于超净工作台上；
(2)蝴蝶兰茎尖灭菌消毒：用75％的酒精浸泡20～29秒，然后用2％的升汞浸泡30～60秒，并吸干表面水分；
(3)蝴蝶兰茎尖的初代培养：培养20-25天，温度为23-27℃、光照12h、光照强度1500-2000lux；
所述的初代培养的培养基为ms+0.2mg/l～0.5mg/lga3+2～3mg/l6-ba；
(4)蝴蝶兰的继代培养：
取小芽基部，切成lcm长的小段，接种于ph值为6.3-6.8的ms培养基上；
增殖培养4周,增殖培养的培养温度为23-27℃，光照12h、光照强度1500-2000lux；
所述的继代培养的培养基为ms+1.5mg/l～2mg/l6-ba+1mg/l～2mg/ltdz、蔗糖35g/l、琼脂5g/l，
(5)蝴蝶兰的生根培养：
生根培养基为加入活性炭的ms培养基，当根长为2-4cm时，进行驯化移栽，将培养瓶移至大棚内炼苗15-20天，洗去培养基，移栽入穴盘中，覆盖薄膜，同时遮荫75％，2周后除去薄膜，给予全光照，进行肥水管理。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内限制本发明之权利范围。
技术特征：
技术总结
本发明涉及一种蝴蝶兰组织培养方法，包括蝴蝶兰茎尖获取、蝴蝶兰茎尖灭菌消毒以及对灭菌消毒后的蝴蝶兰茎尖进行初代培养、继代培养和生根培养。本发明的有益效果：(1)通过本发明的蝴蝶兰组培苗植株，生根率最高达到20％。(2)采用茎尖进行离体培养产生的组培苗能够保持原品种的优良性状，为良种繁育和产业化生产奠定了基础。(3)本发明的蝴蝶兰组织培养方法，操作简单、成本低廉，适于多数观赏蝴蝶兰的快速繁殖。
技术研发人员：李洁;陈丽妍
受保护的技术使用者：佛山市恒爱网络科技有限公司
技术研发日：2017.11.10
技术公布日：2018.02.16
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