滇牡丹 PdANS 的克隆、表达及与花青素含量的相关性
平怀磊,郭雪,余潇,宋静,杜春,王娟,张怀璧
滇牡丹(Paeonia delavayi)属芍药科(Paeoniaceae)芍药属(Paeonia)牡丹组(Sect. Moutan)植物,其表观形态多样,花色变异类型极为丰富,从黄色带红斑、纯白色、绿色、黄色到纯红色、紫色等均有,同时,又因富含芍药苷、丹皮酚等多种有益于人体健康的化学成分,具有较高的观赏和药用价值。相关研究表明花色的形成与花青素有关, ANS 基因作为花青素生物合成途径中第一个使化合物显色的结构基因,对植物色彩的形成具有重要作用。目前, ANS 基因的研究普遍集中在模式植物和果蔬植物中,对于观赏类花卉植物的研究较少,它们在开花过程中多彩花瓣颜色的变化是否与 ANS 等花青素合成酶基因的表达水平存在联系,需要进一步对这类 ANS 等结构基因进行研究。
近日, 《生物技术通报》在线发表了 《滇牡丹 PdANS 的克隆、表达及与花青素含量的相关性 》文章。本研究为探明滇牡丹的花色调控机理,以滇牡丹花瓣为材料,克隆并鉴定了一个花青素合成酶基因 PdANS,结合生物信息学的基本理化性质,分析表达模式和花青素积累的相关性,为研究芍药科的花色通路,提高其观赏价值奠定理论基础。
本文主要包括以下几部分内容:
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 方法
2 结果
2.1 滇牡丹总RNA提取与 PdANS 的克隆
2.2 PdANS蛋白理化性质分析
2.3 PdANS蛋白信号肽和跨膜结构域分析
2.4 PdANS蛋白结构域分析
2.5 PdANS蛋白多序列比对与系统进化分析
2.6 PdANS 的表达模式分析
2.7 花青素的定性与定量分析
2.8 花青素分布与含量分析
2.9 花青素含量与 PdANS 表达量的相关性分析
3 讨论
4 结论
克隆获得一个滇牡丹基因 PdANS 在花瓣、花药、 萼片、苞片和花梗中均有表达,以花瓣中的表达量最高。同时,各组织中检测到 Cy3G5G、Pn3G5G、Cy3G 和 Pn3G 共 4 种花青素,且花青素含量花瓣 >花药 > 萼片 > 花梗 > 苞片。推测 PdANS 在滇牡丹 花色的形成中扮演着重要角色,参与花青素的生物合成。
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