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具抗真菌功能的兰花萃取物及其组合物的制作方法

花匠小妙招
2024-11-26 11:29

本发明关于一种具抗真菌(anti-fungus)功能的兰花萃取物及其组合物；特别是关于一种具抗真菌功能的兰花种子(orchidseed)或拟原球体(protocorm)萃取物及其组合物；更特别是关于一种具抗真菌功能的含vicilin蛋白的兰花萃取物及其组合物。

背景技术：

现有兰花萃取物，如中国台湾专利申请公开第201318647号的“兰花萃取物之萃取方法及其应用”发明专利申请案，其揭示一种兰花萃取物及其萃取方法。该萃取方法包含：步骤1，利用水或甲醇进行萃取一兰花而获得一兰花水萃取物或一兰花甲醇萃取物；步骤2，将步骤1所获得的该兰花甲醇萃取物加入乙酸乙酯及水进行萃取而获得一兰花乙酸乙酯萃取物及一兰花水层萃取物；及步骤3，将步骤2所得的该兰花水层萃取物加入正丁醇及水进行萃取而获得一兰花正丁醇萃取物。

承上，第201318647号的该兰花水萃取物、兰花甲醇萃取物、兰花乙酸乙酯萃取物或兰花正丁醇萃取物具有抑制酪胺酸酶的活性。另外，该兰花水萃取物、兰花甲醇萃取物、兰花乙酸乙酯萃取物或兰花正丁醇萃取物具有抑制以lps(lipopolysaccharide)诱导而引发的发炎反应功效。

事实上，前述公开第201318647号仅揭示兰花水萃取物、兰花甲醇萃取物、兰花乙酸乙酯萃取物或兰花正丁醇萃取物具有抑制酪胺酸酶的活性及发炎反应而已。因此，现有相关兰花萃取技术仍存在有必要进一步提供利用兰花萃取物达成其它相关功效，以便进行萃取具抗真菌、护肤及抗氧化效果的萃取物的需求。

另一现有种子萃取物，如中国台湾专利申请公开第201427674号的“花豆种子萃取物及其制备方法与用途”发明专利申请案，其揭示一种花豆(phaseolusvulgarisl.)种子萃取物及其制备方法。该萃取物制备方法包含：步骤a、研磨该花豆种子以获得一花豆粉末；步骤b、使用一第一溶剂溶解该花豆粉末以获得一均质花豆萃取液；及步骤c、离心该均质花豆萃取液并收集一上清花豆萃取液。该步骤b采用约以该花豆粉末1公克溶解于该第一溶剂10毫升的比例进行。

承上，该第一溶剂选自水、c1-c4醇类及其任一组合。或，该第一溶剂为50％乙醇水溶液(v/v)，且该乙醇水溶液为约40体积％至约60体积％。或，该第一溶剂为80％甲醇水溶液(v/v)，且该甲醇水溶液为约70体积％至约90体积％。事实上，前述公开第201427674号仅揭示花豆种子萃取物及其制备方法与用途的相关技术而已。事实上，现有相关种子萃取技术仍存在有必要进一步寻找其它适合物质的种子，以便进行萃取具抗真菌、护肤及抗氧化效果的萃取物的需求。

另一现有特定兰花部位的萃取物，如中国台湾专利申请公开第201420107号的“白花蝴蝶兰花瓣的萃取物及其制备方法与用途”发明专利申请案，其揭示一种白花蝴蝶兰(phalaenopsisamabilis或phalaenopsisaphrodite)花瓣(petal)的萃取物及其制备方法。该白花蝴蝶兰花瓣的萃取物可被用于促进皮肤美白、提升皮肤的保湿能力以及预防和/或延缓皮肤老化。事实上，前述公开第201420107号也仅揭示白花蝴蝶兰花瓣的萃取物及其制备方法的相关技术而已。因此，现有相关兰花萃取技术仍存在有必要进一步提供利用其它兰花相关部位，以便进行萃取具抗真菌、护肤及抗氧化效果的萃取物的需求。

另一现有含兰花萃取物化妆品，如美国专利申请公开第20110002968号的“cosmeticordermatologicalcompositioncontaininganorchidextract,andcosmeticcaremethodusingsaidcomposition”发明专利申请案，其揭示一种添加兰花萃取物的化妆品组成物及使用该化妆品组成物处理护肤方法。

另一现有含兰花萃取物化妆品，如美国专利申请公开第20090258093号的“useofabrassocattleyamarcellakossorchidextractasanactiveagenttopreventordelaytheappearanceofsignsofcutaneousaging”发明专利申请案，其揭示一种以兰花萃取物作为预防或延缓皮肤老化的活化剂。

另一现有含兰花萃取物化妆品，如美国专利申请公开第20090238848号的“useofanextractoftheorchidvandacoeruleaasaskinhydratingagent”发明专利申请案，其揭示一种以大花万代兰(vandacoerulea)萃取物作为皮肤保湿剂。

另一现有含兰花萃取物化妆品，如美国专利申请公开第20090232758号的“brassocattleyamarcellakossorchidextractandusethereofasskindepigmentation”发明专利申请案，其揭示一种以兰花萃取物作为皮肤除斑的相关用途。

事实上，前述美国专利申请公开第20110002968号、第20090258093号、第20090238848号及第20090232758号皆仅揭示以兰花萃取物作为各种护肤处理，其并未揭示如何能利用兰花种子的萃取物达成抗真菌、护肤及抗氧化的目的。因此，现有兰花萃取技术仍存在有必要进一步提供利用其它兰花相关部位，以便进行萃取具护肤及抗氧化效果的萃取物的需求。

另一现有含兰花萃取物化妆品，如中国台湾专利公告第i423826号的“含兰花胚胎素的化妆品”发明专利，其揭示一种含兰花胚胎素的化妆品。该化妆品包含至少一化妆品原料及至少一兰花胚胎素。将该兰花胚胎素添加于该化妆品原料内，以制成一化妆品组成物。另外，该兰花胚胎素具有高表现的基因群，其可产生对人体皮肤有益成分。

事实上，前述中国台湾专利申请公开公告第i423826号也仅揭示含兰花胚胎素的化妆品的相关技术而已。因此，现有兰花胚胎萃取技术仍存在有必要进一步提供利用其它兰花相关部位，以便进行萃取具抗真菌、护肤及抗氧化效果的萃取物的需求。前述诸专利申请案及专利仅为本发明技术背景的参考及说明目前技术发展状态而已，其并非用以限制本发明。

有鉴于此，本发明为了满足上述需求，其提供一种具抗真菌功能的兰花萃取物及其组合物，其中利用一兰花萃取物添加于一原材料内，以形成一抗真菌组合物，而该兰花萃取物提供一抗真菌功能，且该兰花萃取物为一兰花粗萃取物，以扩大现有兰花萃取物的应用范围。

技术实现要素：

本发明较佳实施例的主要目的为提供一种具抗真菌功能的兰花萃取物及其组合物，其中利用一兰花萃取物添加于一原材料内，以形成一抗真菌组合物，而该兰花萃取物提供一抗真菌功能，且该兰花萃取物为一兰花粗萃取物，以达成兰花萃取物提供抗真菌的功能，且达成提供天然(对人体不具毒性)抗真菌产品的功效。

为了达成上述目的，本发明较佳实施例的兰花萃取物，其包含一萃取物，而该萃取物萃取自一兰花部位，且该兰花萃取物包含至少一抗真菌成分，且该抗真菌成分具有抗真菌的活性。

本发明较佳实施例的该萃取物为一粗萃取物或一纯化萃取物。

本发明较佳实施例的该萃取物包含vicilin蛋白及其它有效成分。

本发明较佳实施例的该萃取物具有一预定浓度，且该预定浓度为50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml、200ug/ml或400ug/ml。

本发明较佳实施例的该兰花部位为一兰花种子、一兰花叶子、一兰花拟原球体、一兰花花部、一兰花花部蕊柱或其它花部器官。

本发明较佳实施例的兰花萃取物添加组合物包含：

至少一原材料，其具有一第一预定含量；及

至少一兰花萃取物，其具有一第二预定含量，且该兰花萃取物萃取自一兰花部位，将该兰花萃取物添加于该原材料内，以制成一抗真菌组成物；

其中该兰花萃取物包含至少一抗真菌成分，而该抗真菌成分具有抗真菌的活性。

本发明较佳实施例的该萃取物为一粗萃取物，且该萃取物或粗萃取物适用于抑制镰胞菌、炭疽菌、白绢菌或其它植物真菌。

本发明较佳实施例的该萃取物包含vicilin蛋白及其它有效成分。

本发明较佳实施例的该萃取物具有一预定浓度，且该预定浓度为50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml、200ug/ml或400ug/ml。

本发明较佳实施例的该兰花部位为一兰花种子、一兰花叶子、一兰花拟原球体、一兰花花部、一兰花花部蕊柱或其它花部器官。

本发明较佳实施例的另一目的为提供一种兰花种子的萃取物及其添加产品，其中该兰花种子的萃取物包含至少一脂质成分，而该脂质成分包含至少一脂肪酸，且该脂肪酸可作为抗发炎、抗菌和抗氧化等生理活性的应用，以达成提升兰花种子经济价值的目的。

为了达成上述目的，本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物包含一萃取物，其萃取自一兰花种子，该萃取物包含至少一脂质成分，而该脂质成分包含至少一脂肪酸，且该脂肪酸可作为抗发炎、抗菌和抗氧化等生理活性的应用。

本发明较佳实施例的该兰花种子选自蝴蝶兰的兰花种子。

本发明较佳实施例的该兰花种子选自不同生长时期的兰花种子。

本发明较佳实施例的该脂肪酸包含棕榈酸及亚麻油酸。

本发明较佳实施例的该棕榈酸及亚麻油酸的含量比例为1：4。

为了达成上述目的，本发明较佳实施例的兰花种子萃取物添加产品包含：

至少一化妆品原料，其具有一第一预定含量；及

至少一兰花种子萃取物，其具有一第二预定含量，且该兰花种子萃取物萃取自一兰花种子，将该兰花种子萃取物添加于该化妆品原料内，以制成一化妆品组成物；

其中该兰花种子萃取物包含至少一脂质成分，而该脂质成分包含至少一脂肪酸。

本发明较佳实施例的该化妆品原料选自一保养品原料、一彩妆品原料或一香水原料，以制成一保养品、一彩妆品或一香水。

本发明较佳实施例的该化妆品原料选自一粉末状原料、一膏状原料或一液态原料。

本发明另一较佳实施例的兰花种子萃取物添加产品包含：

至少一食品原料，其具有一第一预定含量；及

至少一兰花种子萃取物，其具有一第二预定含量，且该兰花种子萃取物萃取自一兰花种子，将该兰花种子萃取物添加于该食品原料内，以制成一食品组成物；

其中该兰花种子萃取物包含至少一脂质成分，而该脂质成分包含至少一脂肪酸。

本发明较佳实施例的该食品组成物为一饮料、一食品、一调味酱、一调味粉、一健康食品或一保健用品。

本发明较佳实施例的该兰花种子选自蝴蝶兰的兰花种子。

本发明较佳实施例的该兰花种子选自不同生长时期的兰花种子。

本发明较佳实施例的该脂肪酸包含棕榈酸及亚麻油酸。

本发明较佳实施例的该棕榈酸及亚麻油酸的含量比例为1：4。

附图说明

图1为本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法的流程示意图。

图1a为本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法的流程示意图。

图1b为本发明较佳实施例的具抗真菌功能的兰花萃取物用以各种浓度抑制镰胞菌、炭疽菌或白绢菌实验结果的示意图。

图2为本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物内脂质成分含量的示意图。

图3为本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物内各脂肪酸成分含量的示意图。

图4为本发明第一较佳实施例的兰花萃取物添加于产品作业的流程示意图。

图5为本发明第二较佳实施例的兰花种子的萃取物添加于产品作业的流程示意图。

图6为本发明第三较佳实施例的兰花种子的萃取物添加于产品作业的流程示意图。

附图标记

1：原材料；1a：化妆品原料；1b：食品原料；2：兰花萃取物；20：兰花种子萃取物；3：抗真菌组成物；3a：化妆品组成物；3b：食品组成物；100：加工设备。

具体实施方式

为了充分了解本发明，于下文将举例较佳实施例并配合所附附图作详细说明，且其并非用以限定本发明。

本发明较佳实施例的具抗真菌功能的兰花萃取物、其添加产品及其萃取方法适用于各种兰花(例如：蝴蝶兰或其它兰花)及其种子的萃取物、其添加产品及其萃取方法，但其并非用以限定本发明的范围。再者，本发明较佳实施例的兰花萃取物添加于各种加工品，例如：医疗用产品、药物或美妆保养品，但其并非用以限定本发明的范围。

举例而言，本发明较佳实施例的具抗真菌功能的兰花萃取物选择一兰花部位进行萃取，且该兰花部位为一兰花种子、一兰花叶子、一兰花拟原球体(或胚胎部)、一兰花花部、一兰花花部蕊柱或其它花部器官，但其并非用以限定本发明的范围。

本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物富含油脂(lipid)成分，且该油脂成分具有抗发炎能力、抗菌能力及抗氧化能力。另外，该兰花种子的萃取物并没有特殊异味，且也不会影响食物外观(例如：食物颜色)的缺点，因此其特别适合添加于各式饮料、食品、调味酱、调味粉、健康食品或保健用品。

举例而言，本发明较佳实施例选择采用蝴蝶兰的兰花种子，而蝴蝶兰属于单子叶植物，且在学术研究上已经发现蝴蝶兰的兰花种子内不必具有胚乳的组织。因此，本发明采用组织化学染色的方式确实证明在蝴蝶兰的兰花种子内富含油脂成分。

图1揭示本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法的流程示意图。请参照图1所示，本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法包含步骤s1：首先，提供一预定量的兰花种子，并将该兰花种子进行粉碎处理，以获得一兰花种子碎块。举例而言，该兰花种子选自蝴蝶兰的兰花种子，且该兰花种子选自不同生长时期的兰花种子。举例而言，利用一粉碎机(blender)或其它具搅拌功能的装置(搅拌机，stirrer)进行适当充份粉碎搅拌，以获得该兰花种子碎块。

请再参照图1所示，本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法包含步骤s2：接着，选择于一容器(container)内将该兰花种子碎块添加于一溶剂(例如：hexane)，以形成一悬浮液(suspension)。

请再参照图1所示，本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法包含步骤s3：接着，将该悬浮液进行适当萃取处理，以获得一兰花种子萃取液。举例而言，将该兰花种子萃取液制成一兰花种子萃取物，且该兰花种子萃取物包含抗真菌(antifugal)成分、碳水化合物(carbohydrate)成分、脂肪酸(fattyacid)成分及其它成分。

请再参照图1所示，本发明第一较佳实施例的兰花种子的萃取方法包含步骤s4：最后，将该兰花种子萃取液以适当分析仪器进行适当分析其成分，以获得一抗真菌成分或其它有效成分。举例而言，该分析仪器包含核磁共振光谱学分析仪(nuclearmagneticresonancespectroscopy，nmr)、气相层析质谱分析仪(gaschromatography-massspectrometry，gc-ms)或高效液相层析仪(highperformanceliquidchromatography，hplc)。

举例而言，本发明选择采用核磁共振光谱学(nmr)的方式去分析蝴蝶兰的兰花种子内所含的成分，且其结果显示蝴蝶兰的兰花种子内富含三酸甘油脂。同时，再进行分析不同生长时期的蝴蝶兰的兰花种子，其显示随着生长时间，蝴蝶兰的兰花种子的油脂含量会随着时间下降，即其显示蝴蝶兰的兰花种子确实会将这些能量提供萌芽生长。

图1a揭示本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法的流程示意图。请参照图1a所示，本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法包含步骤s1：首先，提供一预定量的兰花拟原球体，并将该拟原球体进行粉碎处理，以获得一拟原球体碎块。举例而言，该兰花拟原球体选自蝴蝶兰的兰花拟原球体，且该兰花拟原球体选自不同生长时期的兰花拟原球体。举例而言，利用一粉碎机或其它具搅拌功能的装置(搅拌机)进行适当充份粉碎搅拌，以获得该拟原球体碎块。

请再参照图1a所示，本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法包含步骤s2：接着，选择于一容器内将该拟原球体碎块添加于一溶剂(例如：hexane)，以形成一悬浮液。

请再参照图1a所示，本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法包含步骤s3：接着，将该悬浮液进行适当萃取处理，以获得一拟原球体萃取液。举例而言，将该拟原球体萃取液制成一拟原球体萃取物，且该拟原球体萃取物包含抗真菌成分、碳水化合物成分、脂肪酸成分及其它成分。

请再参照图1a所示，本发明第二较佳实施例的兰花拟原球体的萃取方法包含步骤s4：最后，将该拟原球体萃取液以适当分析仪器进行适当分析其成分，以获得一抗真菌成分或其它有效成分。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：制备一第一萃取缓冲液(extractbuffersolution)，其包含三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(tris-hcl)缓冲液(ph8.3，4.8g)、十二烷基硫酸锂(lithiumdodecylsulfate)缓冲液(2.0g)、甘油(glycerol)缓冲液(35ml)、乙二胺四乙酸(edta)缓冲液(0.5mstock，0.4ml)及其混合。另外，将该萃取缓冲液加入二次水(ddh2o)至100ml(ph8.25-8.75)，且将其保存于-20℃。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：另制备一第二萃取缓冲液(50ml)，其包含第一萃取缓冲液(12.5ml)、甘油(glycerol)缓冲液(0.625ml)、十二烷基硫酸锂(lithiumdodecylsulfate)缓冲液(0.75g)、二次水(ddh2o，36.875ml)及其混合。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：另制备一蛋白酶抑制剂(proteaseinhibitor)，其包含1mm苯甲基磺酰氟(pmsf，phenymethylsulfonylfluoride)、100mm苯甲基磺酰氟(0.174g)加入甲醇(meoh，1ml)、第二萃取缓冲液(每10ml)1xextractionbuffer加入1mm苯甲基磺酰氟(0.1ml)。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：将一兰花部位加入液态氮，并于一容器(例如：研钵)进行磨成粉末，以获得一兰花粉末。接着，将该兰花粉末移入另一容器(例如：30ml玻璃管)中，并于每1公克的该兰花粉末加入2ml的萃取缓冲液，以获得一兰花粗萃取液。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：将该兰花粗萃取液于一离心机以一预定转速及一预定温度(例如：4℃)进行离心一预定离心时间(例如：3分钟)，以获得一兰花粗萃取离心液。

举例而言，本发明另一较佳实施例的抗真菌兰花萃取物的萃取方法包含：将收集该兰花粗萃取离心液的上清液(含蛋白质)，而该上清液含有抗真菌功能的蛋白质萃取物，且将该上清液较佳收集至一微量离心管(eppendorftube)中，以蛋白质定量法(bcamethod)测量其浓度。

图1b揭示本发明较佳实施例的具抗真菌功能的兰花萃取物用以各种浓度抑制镰胞菌(fusariumoxysporumfsp.lycopersici)、炭疽菌(colletotrichumcapsici)或白绢菌(sclerotiumrolfsii)实验结果(三个实验)的示意图。请参照图1b所示，举例而言，本发明较佳实施例选择采用各种浓度(例如：50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml、200ug/ml、400ug/ml)有效抑制镰胞菌(如图1b的上部所示)、炭疽菌(如图1b的中间所示)、白绢菌(如图1b的底部所示)或其它植物真菌。

请再参照图1b所示，本发明较佳实施例的该萃取物为一粗萃取物或一纯化萃取物，而该萃取物包含vicilin蛋白及其它有效成分，且该萃取物具有一预定浓度，且该预定浓度为50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml、200ug/ml、400ug/ml。另外，本发明较佳实施例的该兰花部位为一兰花种子、一兰花拟原球体、一兰花花部蕊柱或其它花部器官。

图2揭示本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物内脂质成分含量的示意图。请参照图2所示，将兰花种子内含的三酸甘油脂(triacylglycerol)进行水解，并以气相层析质谱分析仪(gc-ms)进行分析。接着，根据不同的延迟时间比对化合物分子资料库，本发明发现该兰花种子内富含脂质成分，而该脂质成分包含至少一脂肪酸，且该脂肪酸可作为抗发炎、抗菌和抗氧化等生理活性的应用。

图3揭示本发明较佳实施例的兰花种子的萃取物内各脂肪酸成分含量的示意图，其对照于图2。请参照图2及图3所示，该脂肪酸主要包含棕榈酸(palmiticacid)、亚麻油酸(linolenicacid)及其它脂肪酸成分。另外，本发明较佳实施例的该棕榈酸及亚麻油酸的含量比例为1：4。

请再参照图2及图3所示，举例而言，棕榈酸具有抗氧化的功效；而亚麻油酸的结构则具有两个双键的ω-6的不饱和脂肪酸，因此其具有抗发炎的功效，如图3的右半部所示。

图4揭示本发明第一较佳实施例的兰花萃取物添加于产品作业的流程示意图。请参照图4所示，本发明第一较佳实施例将一原材料1及至少一种或数种兰花萃取物(或兰花萃取液或粉末)2以适当比例于一加工设备100制成一抗真菌组成物3。

举例而言，该原材料1为一药膏原料或一油脂类，其包含凡士林(白或黄)、羊毛脂、薄荷脑(油)、龙脑、梅片、水杨酸、冬青油、樟脑粉(油)、香茅油、丁香油、矽利康油、牛油、白腊油、亚麻仁油、油酸、松节油、松香、桉叶油(尤加利油)或其它。

图5揭示本发明第二较佳实施例的兰花种子的萃取物添加于产品作业的流程示意图。请参照图5所示，相对于第一实施例，本发明第二较佳实施例将一化妆品原料1a及至少一种或数种兰花种子萃取物(或兰花种子萃取液或粉末)20以适当比例于该加工设备100制成一化妆品组成物3a。举例而言，该化妆品原料1a选自一保养品原料、一彩妆品原料或一香水原料，以制成一保养品、一美妆保养品、一彩妆品或一香水。另外，该化妆品原料1a选自一粉末状原料、一膏状原料或一液态原料。该美妆保养品包含肌肤调理用品(例如：面膜、乳霜或精华液)。

图6揭示本发明第三较佳实施例的兰花种子的萃取物添加于产品作业的流程示意图。请参照图6所示，相对于第一实施例，本发明第三较佳实施例将一食品原料1b及至少一种或数种兰花种子萃取物(或兰花种子萃取液或粉末)20以适当比例于该加工设备100制成一食品组成物3b。举例而言，该食品组成物3b选择为一饮料、一调味酱、一调味粉、一健康食品或一保健用品。本发明另一较佳实施例将至少一种或数种兰花种子萃取物(或兰花种子萃取液或粉末)20添加于各种加工品，其包含一医疗用产品、一药物或一美妆保养品。

前述较佳实施例仅举例说明本发明及其技术特征，该实施例的技术仍可适当进行各种实质等效修饰及/或替换方式予以实施；因此，本发明的权利范围须视所附权利要求书所界定的范围为准。