基于基因编辑技术CRISPR/Cas12a和核酸等温扩增技术ERA研发EB病毒核酸检测试剂

• 花匠小妙招
• 2024-11-29 12:50

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第1章 前 言

1.1 EB病毒是鼻咽癌的重要致病因素

1.2 目前EB病毒核酸的检测技术

1.3 ERA技术在核酸检测中的应用

1.4 CRISPR/Cas12a基因编辑技术在核酸检测中的应用

1.5 ERA与CRISPR/Cas12a结合在核酸检测中的应用

第2章 ERA等温扩增技术检测EB病毒

2.1.1 实验样本

2.1.2 主要试剂

2.1.3 仪器与设备

2.2.1 ERA引物设计与合成

2.2.2 靶DNA模板的构建

2.2.3 核酸提取

2.2.4 ERA系统构建

2.2.5 ERA引物的筛选

2.2.6 ERA反应温度的优化

2.2.7 ERA反应时间的优化

2.2.8 ERA检测浓度下限的确定

2.3 实验结果

2.3.1 ERA引物的筛选

2.3.2 ERA反应温度的优化

2.3.3 ERA反应时间的优化

2.3.4 ERA检测浓度下限

第3章 ERA/CRISPR-Cas12a侧向流动试纸条系统检测EB病毒

3.1 实验材料

3.1.1 实验样本

3.1.2 主要试剂

3.1.3 仪器与设备

3.2.1 gRNA的设计与合成

3.2.2 试纸条探针F-B的设计与合成

3.2.3 CRISPR-Cas12a试纸条体系的构建

3.2.4 gRNA的筛选

3.2.5 探针F-B浓度的优化

3.2.6 CRISPR-Cas12a系统反应时间的优化

3.2.7 ERA/CRISPR-Cas12a系统浓度检测下限的确定

3.2.8 特异性验证

3.2.9 临床样本验证

3.3 实验结果

3.3.1 gRNA的筛选

3.3.2 CRISPR-Cas12a工作效率验证

3.3.3 探针F-B浓度的优化

3.3.4 CRISPR-Cas12a孵育时间的优化

3.3.5 ERA/CRISPR-Cas12a浓度检测下限

3.3.6 特异性验证

3.3.7 临床样本验证

第4章 讨 论

第5章 结 论

参考文献

文献综述:CRISPR 基因编辑技术在核酸检测方面的应用

资助本课题的基金项目

作者攻读学位期间的科研成果

致谢

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