转基因抗虫棉花PCR定性检测
【摘要】：转基因抗虫棉花在我国棉花害虫综合治理中发挥着越来越重要的作用。转基因棉花可以通过PCR 定性方法进行检测。本试验采用改良的棉花种子DNA提取方法抽提棉花种子基因组DNA,利用Sadl内标准基因、CaMV35S启动子、Nos终止子及cry1Ac、cry1Ab与cry1Ab／cry1Ac融合基因序列通用引物对非转基因棉花种子(阴性对照)、转基因棉花种子(阳性对照)、试样种子的总DNA进行扩增。同时设置空白对照 (不加DNA模板)。结果显示,SadI基因在阳性、阴性及试样种子DNA中均得到了扩增,证实所检验的试样是棉花种子。CaMV35S启动子,Nos终止子、cry1Ac基因、cry1Ab基因、以及cry1Ac与cry1Ab融合基因序列在阴性对照没有得到扩增,在阳性对照和1号试样中都得到了扩增,且扩增片段大小与预期片段大小一致, 表明所检测的样品是转基因棉花种子,并且来自转Bt基因棉花。另外,2号试样SadI内标准基因和基因表达调控元件(CaMV35S启动子和／或NOS终止子)得到了扩增,且扩增片段大小与预期片段大小一致,但目的基因(cry1Ac基因、cry1Ab基因、或者cry1Ab／cry1Ac融合基因)没有得到扩增,表明该试样可能含有转基因成分,需要进一步检测。
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