一种适合植物组织冰冻切片的包埋剂和冰冻切片的方法技术
本发明专利技术涉及一种包埋剂和直接进行冰冻切片，能在快速在植物组织中进行组织化学等分析的方法。包埋剂聚乙烯醇、聚乙二醇、羧甲基纤维素纳、丙三醇、甲醛、胶原蛋白、植物凝胶、去离子水组成。冰冻切片方法是对植物材料未进行固定，直接把经过组织化学染色等处理的样品或新鲜组织用上述包埋剂包裹在样品台上进行冷冻切片的方法。该方法解决了在植物组织化学、免疫定位和原位杂交等研究的显微观察中，目标化学物质易溶于固定剂，无法先固定再切片或目标化学物质溶于醇类物质，无法用乙醇脱水的难题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及能在快速在植物组织中进行组织化学等分析的方法，具体的说，涉及一种用于植物组织冰冻切片方法及包埋剂。
技术介绍
与常规的石蜡切片相比，冰冻切片具有快速、简便、易操作等特点，且有利于进行组织化学、免疫定位和原位杂交等研究。冰冻切片技术在动物和人体的研究中已广泛应用，但由于植物细胞结构的特殊性，仅在少数植物组织切片中应用，在植物的研究中难以推广。如何改进冰冻切片技术和寻找适合的冰冻切片包埋剂是冰冻切片技术在植物细胞学研究应用中所面临的一个重要问题。目前虽然有冰冻切片组织包埋剂专利技术的报道(冰冻切片组织支持剂，专利ZL00109471. 8 ;生物组织冰冻切片包埋剂及其配制方法，专利号ZL92102744. 3)，但这些包埋剂比较适合于动物和人体组织，不适宜用于新鲜的植物 组织；也有简单快速植物组织冰冻切片方法的报道，但这些方法是包埋时选用进口包埋剂OCT (Optimum cutting temperature compound)进行包埋(一种简单快速植物组织冰冻切片方法.热带亚热带植物学报，2008，16:386-389 ;植物冰冻切片技术的改进.南京林业大学学报，2006, 30:128-130)，进口包埋剂OCT价格贵，不易购买，同时有些植物材料不太适合用OCT包埋。我们在植物组织化学和免疫定位等研究中发现，部分研究的目标化学物质易溶于固定剂，无法先固定再切片；有些目标化学物质溶于醇类物质，无法用乙醇脱水，如在植物细胞中原花色素组织化学染色的显微观察时，原花色素易溶于醇类物质，不能用含醇类的固定剂固定和乙醇脱水，以前报道的方法不能完成这些...
【技术保护点】
一种适合植物组织冰冻切片的包埋剂，其特征在于，由以下组分的原料配制而成：聚乙烯醇8？10份；聚乙二醇1？2份；羧甲基纤维素纳？0.5？1.0份；丙三醇1？2份；甲醛4？7份；胶原蛋白0.5？0.8份；植物凝胶0.3？0.9份；去离子水？90？100份；配置时先将聚乙烯醇加入去离子水中，充分加热溶解，待温度降至80？90℃时，依次加入上述的其他原料，水浴加热溶解后，至室温备用。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：严明理，冯涛，向言词，刘丽莉，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：
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