一种适合植物组织器官的冰冻切片方法技术
本发明专利技术公开了一种适合植物组织器官的冰冻切片方法，是将植物组织器官在温度为‑20℃至‑25℃条件下用冰冻包埋剂包埋后，在温度为‑6℃至‑12℃条件下保持30分钟以上再进行切片。采用本发明专利技术方法，能够快速地获得高质量且保持植物原有生物活性的植物组织器官切片，并且操作简易，成本低，尤其适用于鲜重含水量在85%以上的幼嫩植物组织器官以及切面组织间木质化程度不均一且髓部所含海绵组织超过茎秆横切面面积二分之一的植物组织器官。另外，采用本发明专利技术方法制备的切片如果只需要进行普通组织结构观察，用冰水浴保存可以存放3天以上，方便对切片进行长时间的显微观察分析。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于植物材料切片
，涉及一种适合植物组织器官的冰冻切片方法。
技术介绍
在植物学及细胞生物学研究方面，切片制作尤其是获得高质量的切片非常重要。冰冻切片是将生物组织置于低温下迅速冻结达到一定硬度后进行切片的一种实验技术。与常规的石蜡切片相比，冰冻切片不需要脱水、透明、浸蜡等繁琐的操作过程，生物组织不会收缩，易保持细胞结构原有的生活形态，并且还具有快速、简便、易操作，成本较低等优点，因此常用于组织化学、免疫定位及原位杂交等研究。目前冰冻切片技术主要在动物和人体组织器官研究方面应用得比较广泛，而在植物方面，由于植物细胞含有较硬的细胞壁以及含水量很高的大液泡，冰冻后的植物组织器官硬度大，形成的冰晶多，从而不易获得高质量的切片。近年来，有一些研究报道对关于植物中不同组织器官冰冻切片技术的应用及方法进行了探讨，但这些方法大多数是将植物材料经过FAA、多聚甲醛或乙醇等固定液固定、以及一定浓度的甘油处理或液氮速冻等处理后才能得到较好的切片效果，不仅切片条件各异，而且操作过程也较为复杂，对于初学者较难掌握。另外对于切面组织间木质化程度差异大、直径较大且髓部含有较大面积海绵状细胞的植物组织器官（如甘蓝型油菜发育成熟的主茎）也很难获得完整的切片。因此，为了推广冰冻切片在植物研究方面的应用，有必要进一步优化和专利技术操作简易且效果理想的植物材料冰冻切片新技术。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种适合植物组织器官的冰冻切片方法，可以快速地获得高质量且保持植物原有生物活性的植物组织器官切片，并且操作简易，成本低，尤其适合鲜重含水量在85%以上的幼嫩植物...
【技术保护点】
一种适合植物组织器官的冰冻切片方法，其特征在于，将植物组织器官在温度为‑20℃至‑25℃条件下用冰冻包埋剂包埋后，在温度为‑6℃至‑12℃条件下保持30分钟以上再进行切片。
【技术特征摘要】
1.一种适合植物组织器官的冰冻切片方法，其特征在于，将植物组织器官在温度为-20℃至-25℃条件下用冰冻包埋剂包埋后，在温度为-6℃至-12℃条件下保持30分钟以上再进行切片。2.根据权利要求1所述的适合植物组织器官的冰冻切片方法，其特征在于，所述植物组织器官为新鲜的植物组织器官。3.根据权利要求2所述的适合植物组织器官的冰冻切片方法，其特征在于，所述植物组织器官为鲜重含水量在85%以上的幼嫩植物组织器官。4.根据权利要求3所述的适合植物组织器官的冰冻切片方法，其特征在于，所述植物组织器官为植物幼嫩茎秆、叶片、叶柄或花药。5.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员：尹能文，柴友荣，李加纳，练剑平，刘雪，李威，
申请(专利权)人：西南大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50
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网址: 一种适合植物组织器官的冰冻切片方法技术 https://m.huajiangbk.com/newsview1155752.html
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