细胞工程花药和花粉培养
主要内容
花药培养
花粉培养
花药和花粉培养中的白化苗问题
操作实例
植物花药/花粉培养历史
Guha和Maheshwari (1964) 曼陀罗花药培养
Nitsch 和 Norreel (1973) 烟草花粉培养(游离小孢子培养)
Chu(1973)小麦花粉培养 (早期花药培养主要依靠小孢子的自然胚胎发生产生单倍体,能自 发形成胚胎发生的基因频率较低,效率极低)
80年代后期到90年代期间,花培技术迅速发展。许多作物小孢子 培养已经成功。十字花科、麦类、水稻、玉米等。
90年代,一些先前被认为是不易进行小孢子培养的基因型也相续 成功Konzak (1999) 。
花粉和花药的区别
两者的异同点
,均获得小孢子植株。
;而花粉培养属于细胞培
,可计数小孢子产胚率;能观察雄核发育的全过程,单倍体产量高。但技术更复杂。
花粉和花药的培养作用
1、作物育种
(1)缩短育种周期:常规育种需4-6年获得纯系,而小孢子培养仅需一年。
供体植株 小孢子(n)
花粉植 株(n)
加倍 纯合植株DH (2n)
花培
雄核发育
自然加倍
人工
一年内获得纯系
(2)提高了目标基因型的选择效率
例子: 二倍体供体植株基因型为AaBb,若要从后代中选择基因为AAbb的纯合单株
常规方法: AAbb出现的概率为1/16,并且不能将AAbb 与Aabb区分开。
AB
Ab
aB
ab
AB
AABB
AABb
AaBB
AaBb
Ab
AABb
AAbb
AaBb
Aabb
aB
AaBB
AaBb
aaBb
aaBb
ab
AaBb
Aabb
aaBb
aabb
(3)诱变育种中的作用
植株不受显隐性的影响,在诱变育种中能在当代及 时获得突变个体,加倍后成为稳定的纯系。
花药离体培养的过程:
花药培养
花药培养:是指把发育到一定阶段的花药接种在适宜培养基上,使其中的花粉发育成单倍体植株的过程。
花药培养过程的主要环节:
1、选取花粉单核期的花蕾和幼穗;
2、进行适当的预处理;
3、对外植体进行表面消毒;
4、无菌条件下取出花药接种到合适的培养基上,在适宜的条件下培养;
5、花粉胚或花粉愈伤组织发育到适宜阶段后,转入植株再生培养基形成花粉植株;
6、在试管苗阶段或移栽成活以后进行花粉植株的染色体加倍;
7、炼苗,移入土壤栽培。
一、材料的选择
花药外植体的选择是否合适,直接关系到培养能否功。
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