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花药花粉培养技术

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花药和花粉培养技术
花药培养是将花粉发育至一定阶段的花药接种到人工培养基上进行培养,以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。
第一节花药和花粉培养技术
花粉培养:是将花粉从花药中分离出来,接种到人工培养基上进行培养,以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的过程。
油菜成熟花药的结构
第一节花药和花粉培养技术
一、花药和花粉的培养方法:
(一)花粉发育时期:
1、适宜时期:单核期,尤其是单核中、晚期(单核靠边期)
雄配子体的发育
营养细胞
生殖细胞
精子
第一节花药和花粉培养技术
2、花粉发育时期的检测:
外部形态观察:(单核靠边期的花粉)
小麦旗叶和旗叶下一叶之叶耳距离约是5~15cm。
烟草中,花蕾的花冠大约与萼片等长。
压片染色法:是检测花粉发育时期的简便有效方法,常用染色剂为醋酸洋红。
第一节花药和花粉培养技术
(二)培养过程
1花药培养过程
1)预处理:低温冷藏是最常用的方法
烟草7~9℃,7~14d
黑麦1~3℃,7~14d
第一节花药和花粉培养技术
(二)培养过程
2)表面消毒
用70%酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面,即可以达到灭菌的要求。
第一节花药和花粉培养技术
(二)培养过程
3)接种
在无菌的条件下把雄蕊上的花药从花丝上摘下,水平地放在培养基上进行培养。
不要使花药受到损伤,否则会刺激花药壁形成二倍体愈伤组织。
接种的“密度效应”,要有一个合理的群体数量。
第一节花药和花粉培养技术
(二)培养过程
4)培养形成花粉植株。
花粉---愈伤组织---苗
花粉---胚状体---苗
选幼年树花蕾
第一节花药和花粉培养技术
(二)培养过程
4)培养形成花粉植株。
培养方式:
①琼脂固化培养基表面培养
②30%Ficoll的液体培养基表面漂浮培养
③固-液双层培养
第一节花药和花粉培养技术

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