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自诱导LB培养基选购指南

花匠小妙招
2025-06-30 07:18

自诱导培养基背景原理

自诱导培养基Auto lnducion Medium (AIM)，包含LB Broth (AIM)，2x YT Broth (AlM), Terifc Broth (AIM)， Super Broth (AIM)。通常，外源蛋白在细营中表达时常便用IPTG诱导的启动子，女Lac启动子。当细胞密度达到理想值时，通过向培养基中加入!PTG的方法诱导蛋白表达。使用这个自动诱导培养基，不再需要监测细胞密度和添加PTG。葡萄糖作为半乳糖提纵子的阳過因子阳止细莹利用α-乳糖，而被优先代谢，促进高密度生长。一旦培养基中的葡萄糖被耗尽(通第发生在对数期的后期)，乳糖被B-半乳糖苷酶转换成异乳糖(葡萄糖-1,6-半乳糖)，而后者作为IPTG诱导型启动子的诱导剂，引起乳糖阻過子从与DNA结合的位点上释放，启动重组蛋白的表达。对于DE3基因型的E.col中，异乳糖使T7ac启动子去阻遏，并诱导lacUV5启动子表达T7 RNA聚合酶。通过这种方式，在细菌培养物生长到某一特定点时蛋白表达自发开始，省掉了监测细胞密度(OD600)和添加IPTG这两个步骡，与传统IPTG诱导的蛋白表达过程相比，使用自动诱导培养基极大地方便和简化了试验流程。

自诱导培养基(lac启动子)(Auto-induction Medium)产品及特点

本产品是在pET专用生长培养基的基础上开发而成的,它利用E.coi自身对培养基中碳源和能源的调控利用机制,实现外源蛋白在细菌达到饱和期后的自动诱发。

具有下列特点:

1.不需添加任何IPTG或相关诱导物,节约成本。

2.免去密切监控菌液密度的过程,尤其适合大规模筛选

3.细菌生长密度远高于IPTG诱导表达系统。

4.外源蛋白表达量远远高于IPTG诱导表达系统

5.本产品即开即用,操作简单

6.与各种细胞培养容器兼容(如培养瓶、培养、深孔管、发酵等)。

过夜培养自动诱导细胞表达的培养基系统，培养基都可以大程度上提高pET系列和其它IPTG原核诱导表达系统在大肠杆菌中蛋白的表达量，其的方便之处在于使用这种培养基不需要对大肠杆菌的生长密度OD值进行检测。因为IPTG会对细胞存在毒性，因此使用了这种不含IPTG的自动诱导体系培养基与传统培养基相比可以使细胞数量和目的蛋白量都大大增加教倍。

自诱导LB培养基选购指南

Quantity: 500g

Appearance: Beige powder. Autoclaved medium should be amber.

Storage: 2ºC – 25ºC. When not in use, keep container closed to avoid hydration.

Preparation:
Add 34,85g of the dehydrated medium to one liter of distilled water. Mix well and dissolve by heating with regular agitation. Boil for 1 minute in order to dissolve completely. Dispense in appropriate containers and sterilize by autoclaving at 121ºC for 15 to 20 minutes. Store at 2ºC to 8ºC.

Formulation (g/L)
Tryptone: 10,00
Yeast Extract: 5,00
MgSO4: 0,15
(NH4) 2SO4: 3,30
KH2PO4: 6,80
Na2HPO4: 7,10
Glucose 0,50
Alpha Lactose 2,00
Final pH (25ºC): 7,0 ± 0,2