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油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要

花匠小妙招
2024-11-07 13:52

题型：非选择题-解答题难度：0.65 引用次数：860 题号：21860678

油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高51.71%。回答下列问题：
(1)从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用

____

的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是

____

。
(2)对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是

____

。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a~d 表示 FAD2－1基因的4个位点。

将FAD2－1基因的

____

（填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是

____

。
(3)重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过

____

的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测

____

，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。

更新时间：2024/02/22 20:55:09 |

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【推荐1】科研团队通过转基因获得了一种大肠杆菌工程菌，成为监测残留在生物组织或环境中的四环素水平的“报警器”，其监测原理如图1所示，天然大肠杆菌不具备图1中所示基因。

(1)在上述研究中，需导入天然大肠杆菌的目的基因有

______________

。(选填序号)
①四环素合成相关基因 ②GFP 基因 ③TetR 基因 ④RNA 聚合酶基因
(2)据图1，环境中四环素水平越高，该种大肠杆菌工程菌的荧光

______________

(选填“增强”“减弱”“不变”)。试概述该种四环素检测方法的原理：

_________________

。
(3)图2是2个DNA片段、质粒及其上的限制性内切核酸酶的识别序列的分布情况；其中质粒上的代表青霉素抗性基因。表为相关限制性内切核酸酶的识别序列与切割位点。

限制酶

EcoR I

Xba I

Spe I

BamHI

识别序列及切割位点

5'…G↓AATT C…3'

3'…C TTAA↑G…5'

5'…T↓CTAG A…3'

3'…A GATC↑T…5'

5'…A↓CTAG T…3'

3'…T GATC↑A…5'

5'…G↓ GATC C…3'

3'…C CTAG↑G…5'

若要拼接DNA片段1和2，结合图2和上表中信息，在特定工具酶作用下能成功拼接的位点处碱基序列为

____________

或

_______________

。
(4)研究人员设计了一个同时含DNA片段1和2的重组质粒的拼接方案，结合图表信息，你认为最终建构成功的重组质粒示意图最合理的是

______________

。

(5)为了确定组质粒和大肠杆菌工程菌建构成功，可用 PCR 技术进行检测，PCR 完成以后常采用

_____________

来鉴定 PCR的产物。也可通过观察四环素浓度变化是否能引起大肠杆菌工程菌荧光强度的相应改变来进行鉴定。

【推荐2】叶酸是生物体内极其重要的维生素，化学性质不稳定，部分植物和微生物可以合成叶酸，人类则需额外补充。GCHI和ADCS是叶酸合成途径中两种重要的酶。研究人员通过RACE技术获得转录因子APBP2基因，并将其在粮食作物小麦中过量表达，结果显示转基因小麦中叶酸量显著提高，人类有望通过食用面包补充部分叶酸。回答下列问题：
(1)RACE技术是一种基于PCR技术利用低含量的mRNA快速扩增DNA的有效方法，通过此技术获取大量APBP2基因需经逆转录和

________

两个基本过程，这两个过程需要逆转录和

______

酶。
(2)PCR的产物可通过凝胶电泳鉴定，由于APBP2基因在电泳缓冲液中带

_______

电，电泳时加样孔一端应该靠近

________

极。电泳结果如图甲，其中1号泳道是DNAMarker的电泳结果，DNAMarker是一组已知长度和

_______

的标准DNA片段混合物，2号泳道是以

_______

为材料做的阳性对照组，3号泳道为实验组。含有APBP2基因条带的凝胶可以用刀片切割下来，回收凝胶中的DNA片段，从而达到

_______

目的。

(3)为提高转录因子APBP2的表达量，研究人员构建了携带特异性强启动子的APBP2基因表达载体，如图乙。强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被

___________

识别并结合，驱动基因的持续转录，该特异性启动子能使APBP2基因在小麦植株的

___________

部位表达。
(4)将含重组Ti质粒的农杆菌和小麦愈伤组织混合培养一段时间，经过

________

后进行植物组织培养，在培养基中加入

_________

进行筛选，此物质能抑制叶绿体和线粒体中蛋白质的合成，从而引起植物细胞死亡。愈伤组织是一种相对没有

_________

的薄壁细胞团，经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成

_________

，再继续发育成转基因小麦株系。
(5)在小麦内过量表达转录因子APBP2可提高小麦叶酸量，推测APBP2基因在细胞内发挥的作用可能是

________

。

【推荐3】玉米是重要的粮食作物、饲料和工业原料，虫害是造成玉米产量损失的重要因素。随着转基因技术的发展，转Bt基因抗虫玉米对有效防治玉米害虫具有重要作用。回答下列问题：
(1)BtcrylAh基因是从苏云金杆菌BT8菌株中克隆获得的。研究人员PCR扩增Btcry1Ah基因时，扩增条件为94℃5min→94℃20s→54℃20s→72℃50s；35个循环：72℃5min。
①在上述PCR扩增过程中不需要添加解旋酶，这是因为

______________

。
②扩增过程中将温度降低至54℃，该步骤称为

______________

。
(2)获取BtcryIAh基因后，研究人员设计了如图1所示的实验。

Ⅰ．图1中步骤①需要用到的酶是

______________

，将BtcrylAh基因导入玉米细胞中的常用方法是

______________

。
Ⅱ．步骤③中，将BtcrylAh基因表达载体导入玉米细胞后，诱导玉米细胞形成愈伤组织的过程中需要添加的植物激素是

______________

。后续将愈伤组织培养为幼苗（步骤④⑤⑥）后需要进行照光培养，其目的是

______________

。
(3)研究人员通过一系列实验，获得转基因玉米HGK60。为检测转基因玉米HGK60的遗传特性，研究人员让其杂交获得3种品系：HGK60（甲）、HGK60（乙）、HGK60（丙）。研究人员对转基因玉米和非转基因玉米进行了基因检测，发现非转基因玉米中无BtcrylAh基因，三种品系均含有Btcry1Ah基因。进一步检测Btcry1Ah蛋白的表达情况，结果如图2所示。