兰科植物作为一种重要的植物资源,具有巨大的经济价值和科研价值。菌根真菌对于自然状态下兰科植物完成正常的生活史具有不可替代的生物作用,因此从菌根真菌的角度研究珍稀濒危兰科植物的保育十分重要。本研究旨在探索兰花快速繁殖技术,并通过人工接种促使组培苗菌根化,提高移栽成活率,保证兰花组培苗的正常生长发育。本研究主要包括兰科植物的组织培养;促进象牙白(Cymbidium eburneum)原球茎生长、不定芽分化的真菌诱导子及组合的筛选;促进美花兰(Cymbidium insigne)苗生长的菌根菌的筛选及菌根结构的观察;以及实验所用菌株鉴定的研究。具体结果如下:1、在春兰原球茎增殖诱导的过程中发现,以KC附加1.0mg/L的NAA(α-萘乙酸)效果最好。在象牙白原球茎增殖过程中,1/2MS培养基分化生长的象牙白组培苗生长健壮,有利于成活。2、将不同的菌根真菌制成诱导子,加入象牙白原球茎的培养基中进行诱导培养。在生物量的增长方面,不同真菌诱导子的作用强度依次为HF26>CF6>CF8>CF3。3、将由不同真菌制备成的真菌诱导子和诱导子组合加入象牙白组培苗生长的培养基上,进行诱导培养。与对照相比,生物量增加以DMF80和H+C菌株效果最好,且DMF80菌株与对照在鲜重增加量上达到极显著差异。HF26菌株在促进叶片和根的分化上优于其他菌株,而DMF80菌株最有利于基生根的形成;在多糖含量的积累上,诱导子组合表现出极大的促进作用。4、将美花兰组培苗与7菌株进行共生培养,结果表明:接种CF2、CF8、DMF80菌株的组培苗鲜重增长率达到了显著差异水平。结合石蜡切片的观察结果及该菌的再分离结果,认为这3菌株已与美花兰组培苗形成了良好的共生体系。5、通过对美花兰菌根切片的显微结构观察,表明美花兰具有典型的兰科菌根结构:菌丝通过破坏根被和外皮层细胞进入皮层;菌丝结不均匀的分布在皮层细胞中,且较外侧的几层细胞中分布较多;菌丝结常出现在细胞核附近或与之缠绕成一团;菌丝通过穿透细胞壁来侵染其它细胞,并再次形成菌丝结。皮层细胞中分布着大量的菌丝团和消解的菌丝,它们的不断形成和消解提供了兰科植物生长所需要的营养。6、对研究中所用到的部分菌根真菌进行鉴定,供试的7菌株分别隶属于7个属:角菌根菌属(Ceratorhiza)、曲霉属(Aspergillus)、伞状霉属(Umbelopsis)、交链孢属(Alternaria)、毛壳菌属(Chaetomium)、镰孢属(Fusarium)、瘤菌根菌属(Epulorhiza)。
摘要 3-5
Abstract 5-10
1 引言 10-26
1.1 兰科植物简介 10-11
1.2 兰科植物组织培养的研究进展 11-16
1.2.1 外植体选择的研究进展 11-14
1.2.1.1 种子的培养 11-12
1.2.1.2 茎尖和侧芽的培养 12
1.2.1.3 叶片的培养 12-13
1.2.1.4 根的培养 13
1.2.1.5 花器官的培养 13-14
1.2.2 培养基及植物激素应用的研究进展 14
1.2.2.1 培养基应用的研究进展 14
1.2.2.2 植物生长调节剂的应用进展 14
1.2.3 培养方式与条件的研究进展 14-15
1.2.3.1 培养方式 14-15
1.2.3.2 培养条件 15
1.2.4 兰花组织培养中常见问题及解决方案的研究进展 15-16
1.3 兰科植物内生菌根真菌的研究进展 16-22
1.3.1 兰科植物菌根的一般特征 17-18
1.3.2 兰科菌根真菌的种类及分类鉴定方法的研究进展 18-19
1.3.3 兰科植物与菌根真菌之间的专一性研究进展 19-20
1.3.4 兰科植物与内生真菌的互作关系 20-21
1.3.4.1 促进种子萌发和参与幼苗生长 20
1.3.4.2 扩大根际范围,增加吸收养分的能力 20-21
1.3.4.3 产生植物激素和维生素,促进植物生长 21
1.3.4.4 作为真菌诱导子,增强兰科植物的抗性 21
1.3.5 兰科菌根真菌的应用 21-22
1.3.5.1 研制菌根菌剂 21
1.3.5.2 产生与宿主相同或相似的具有生理活性物质的菌株筛选 21-22
1.4 真菌诱导子应用的研究进展 22-23
1.4.1 诱导子的作用机制 22
1.4.2 诱导子的作用效果 22
1.4.3 诱导子在植物组织培养中的应用 22-23
1.5 本研究的目的和意义 23-24
1.6 研究内容 24-25
1.7 技术路线 25-26
2 两种兰科植物的组织培养 26-32
2.1 材料 26
2.2 方法 26
2.3 基本培养基及激素的筛选 26
2.4 春兰根状茎的分化培养 26-27
2.5 结果与分析 27-29
2.5.1 不同培养基对春兰原球茎增殖的影响 27-28
2.5.2 不同生长素对春兰原球茎增殖的影响 28-29
2.5.3 春兰原球茎的分化培养 29
2.5.4 象牙白原球茎的增殖与分化 29
2.6 讨论 29-32
3 对兰科植物有效的真菌诱导子的筛选 32-42
3.1 对象牙白原球茎有效的真菌诱导子的筛选 32-37
3.1.1 材料与方法 32-34
3.1.1.1 真菌菌株的复壮及诱导子制备 34
3.1.1.2 培养基与培养方法 34
3.1.1.3 原球茎生物量及分化程度的统计 34
3.1.2 结果与分析 34-36
3.1.2.1 真菌诱导子对象牙白生长量的影响 34-35
3.1.2.2 真菌诱导子对象牙白原球茎分化的影响 35-36
3.1.2.3 真菌诱导子对象牙白根分化的影响 36
3.1.3 讨论 36-37
3.2 对象牙白组培苗有效的真菌诱导子及组合的筛选 37-42
3.2.1 材料与方法 37-38
3.2.2 统计方法 38
3.2.2.1 生物量及分化程度的统计 38
3.2.2.2 多糖含量的测定 38
3.2.3 结果与分析 38-40
3.2.3.1 真菌诱导子对象牙白组培苗干、鲜重的影响 38-39
3.2.3.2 真菌诱导子对象牙白组培苗生长分化的影响 39-40
3.2.3.3 真菌诱导子对象牙白组培苗多糖含量的影响 40
3.2.4 讨论 40-42
4 美花兰有效菌根真菌的研究 42-56
4.1 对美花兰组培苗有效的菌根真菌的筛选 42-50
4.1.1 材料与方法 42-43
4.1.1.1 材料 42-43
4.1.1.2 方法 43
4.1.2 结果与分析 43-46
4.1.2.1 美花兰组培苗与接种菌株共生培养状况 43-44
4.1.2.2 不同菌株对美花兰组培苗鲜重的影响 44-45
4.1.2.3 不同菌株对美花兰组培苗根原基形成的影响 45-46
4.1.3 讨论 46-50
4.2 美花兰菌根结构观察 50-56
4.2.1 材料与方法 50-51
4.2.1.1 材料 50
4.2.1.2 方法 50-51
4.2.2 结果与分析 51-52
4.2.3 结论与讨论 52-56
5 实验所用菌根真菌的鉴定 56-60
5.1 材料与方法 56-57
5.1.1 材料 56
5.1.2 方法 56-57
5.1.2.1 菌落培养特征及形态学观察 56
5.1.2.2 有性态诱导 56-57
5.2 结果与分析 57-60
5.2.1 菌种性状描述及子实体诱导结果 57-58
5.2.2 形态鉴定结果 58-60
6 结论与展望 60-62
6.1 结论 60-61
6.2 展望 61-62
附录 62-66
参考文献 66-71
个人简介 71-72
导师简介 72-73
致谢 73-74
发表的论文、著作及目录 74
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网址: 几种兰科植物组织培养及菌根真菌的研究 https://m.huajiangbk.com/newsview588751.html
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