春兰基因组DNA提取方法的研究

• 花匠小妙招
• 2024-11-18 00:06

【摘要】：本文通过比较不同的DNA提取方法、春兰材料不同部位的基因组DNA提取质量,试图找出春兰(Cymbidium goeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)基因组DNA提取的最佳方法,为更好开展春兰分子生物学研究奠定技术基础。结果发现,CTAB法的两种化学药品,即十六烷基三甲基溴化铵(Cetyl-trimethyl-Ammonium Bromide,上海产)与十六烷基二甲基乙基溴化铵(Cetyldimethylethyl -ammonium bromide,美国BBI产)之间提取得率和质量差异不显著。而SDS法的两种不同缓冲液配制方法对春兰基因组DNA提取有显著差异。比较CTAB法和SDS法,改良的SDS法提取的春兰DNA质量与得率比改良的CTAB法相对要好,但就花药而言,还是改良的CTAB法(采用进口CTAB)较好,去除蛋白质相对干净。春兰材料的不同提取部位也有差异,花苞基因组DNA提取得率和质量优于叶片。此外,实验中发现,适当增加氯仿/ 异戊醇抽提次数、延长异丙醇的沉淀析出时间、水浴时间等可以提高春兰基因组DNA的提取质量。

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