摘要: 本发明提出了一种金边玫瑰的组织培养方法,包括将外植体接种至含有脯氨酸的MS诱导培养基,诱导培养至芽茎长到至少1cm,接种至含有单磷酸腺苷的MS育壮培养基,育壮培养后接种至含PSK‑α和单磷酸腺苷的MS增殖培养基,将增殖培养获得的芽茎,最后接种至MS生根培养基,获得目标金边玫瑰组培苗。本发明选用含芽枝条作为外植体,采用脯氨酸作为诱导培养组分,提高诱导效率,结合单磷酸腺苷促进芽茎的生长、育壮,为后续芽条的生长、生根,以及组培苗的移栽奠定了一定的物质基础,6‑BA、植物肽生长因子PSK‑α和单磷酸腺苷协同提高成活率与新芽的萌发速率,以及移栽成活率...
权利要求:
1.一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤: S1外植体处理:取含芽枝条,消毒,得外植体; S2诱导萌发:将外植体接种至含有脯氨酸的MS诱导培养基,诱导培养至芽茎长到至少1cm; S3育壮培养:将步骤S2诱导萌发获得的芽茎,接种至含有单磷酸腺苷的MS育壮培养基; S4增殖和生根培养:将步骤S3育壮培养获得的芽茎,接种至含PSK-α和单磷酸腺苷的MS增殖培养基,将增殖培养获得的芽茎,最后接种至MS生根培养基,获得目标金边玫瑰组培苗。 2.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,所述MS诱导培养基的组分包括:在MS基础培养基中加入6-BA 0.5~2mg/L、NAA 0.2~0.3mg/L和脯氨酸2~3mg/L。 3.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,所述MS育壮培养基的组分包括:在MS基础培养基中加入6-BA 0.5~1mg/L和单磷酸腺苷1~3mg/L。 4.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,所述MS增殖培养基的组分包括:在MS基础培养基中加入6-BA 0.5~1mg/L、PSK-α20~30pmol和单磷酸腺苷1~3mg/L。 5.根据权利要求4所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,所述MS增殖培养基还包括加入蔗糖15~20g/L。 6.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,步骤S4中,育壮培养至芽茎长度至少3cm,长出2~3片叶片时,进行增殖培养。 7.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,所述诱导萌发、育壮培养、增殖和生根培养的培养条件包括:培养温度21~23℃,每天光照12~14h,光照强度1000~1500Lx。 8.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,步骤S1中,所述消毒的方法包括:流动水冲洗后,加入洗洁精浸泡1~3min,再使用流动水冲洗8~15min,而后加入体积浓度70~80%乙醇溶液浸泡15~20s,采用无菌水冲洗后,再加入质量浓度0.05~0.15%氯化汞浸泡3~8min,无菌水冲洗后,得所述外植体。 9.根据权利要求1所述的一种金边玫瑰的组织培养方法,其特征在于,步骤S2中,保留外植体1~2个腋芽进行所述诱导萌发。
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