世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿的出现，受到人们的强烈谴责。科学家在进行基因编辑的过程中需要用到限制酶，下表是几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中标注
题型：非选择题-解答题 难度：0.65 引用次数：287 题号：7751518
世界首例免疫艾滋病的基因编辑婴儿的出现，受到人们的强烈谴责。科学家在进行基因编辑的过程中需要用到限制酶，下表是几种限制酶的识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点。请回答下列有关基因工程的问题：
(1)用图1中质粒和图2的目的基因构建重组质粒，应选用
两种限制酶切割，酶切后的质粒和目的基因片段，通过
____酶作用后获得重组质粒。BamHI酶切的DNA末端能与BclI酶切的DNA末端相连接，原因是
________，连接部位的6个碱基对序列为
_____。
(2)若图2中目的基因D是人的胰岛素基因，科研工作者先从人体胰岛B细胞中获取胰岛素mRNA，然后再通过
过程可获得人胰岛素基因。启动子是
____识别和结合的部位，有了它才能驱动基因的转录。该基因利用PCR技术进行扩增，DNA合成的方向总是从子链的
____延伸。PCR的每次循环分为
____三步。
更新时间：2019/03/19 22:32:10 |
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相似题推荐【推荐1】研究者筛选到一株降解纤维素能力较强的枯草芽孢杆菌菌株（B菌），从中获得一种纤维素酶（C1酶）基因。将C1酶基因与高效表达载体（HT质粒）连接，再导入B菌，以期获得降解纤维素能力更强的工程菌。荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度的变化监测产物量的变化从而得到一条荧光扩增曲线图（如图1）。
注：DNA的转录方向是RNA的合成方向，即5'端到3'端。
回答下列问题：
(1)通过荧光定量PCR技术克隆C1酶基因，所用的试剂盒中通常都应该含有：
、
__________、荧光标记的核酸探针、dNTP、病毒核酸标准试剂、缓冲体系。
(2)“平台期”出现的最可能的原因是
。
(3)对克隆到的C1酶基因测序，与基因库中的C1酶基因编码序列相比有两个碱基对不同，但两者编码出的蛋白的氨基酸序列相同，这是因为
。
(4)图2中HT质粒酶切位点如图所示，C1酶基因以B链为转录模板链，克隆C1酶基因时在其酶切位点1和酶切位点2两端分别添加
和
__________，并且二者顺序不能调换的原因是
___________。
(5)预期该工程菌在处理废弃物以保护环境方面可能的应用
。（举一例）
【推荐2】杀草丹是一种高效、广谱除草剂，但是残留成分对环境有较大影响。科学家分离高效降解杀草丹的微生物，对杀草丹污染的环境进行修复。
(1)为分离杀草丹降解菌，研究者进行如下操作：
① 取排污口的活性泥接种至
的液体培养基富集培养一段时间后，通过紫外-可见分光光度法检测富集液中杀草丹的降解效果，紫外吸收图谱的结果如图1，图谱的峰形代表溶液中的溶质种类，峰值代表溶质的含量。
结果表明，富集液中含有能降解杀草丹的微生物，判断依据是：
__________。
② 对富集液进行
，涂布于含杀草丹的固体培养基表面，培养一段时间后，从若干菌落中挑取
___________的单菌落扩大培养，并将其命名为T1。此过程使用的培养基可用
___________法灭菌。
(2)根据
可对菌株Ｔ1 初步鉴定，但还需通过分子技术扩增菌株的核糖体RNA（rRNA） 序列进一步鉴定菌株的种属，下面是三种编码rRNA的DNA片段的特点：
a：5S rDNA，序列短，遗传信息少。
b：16S rDNA，序列长度适中，含有保守区和可变区，可变区序列具有种的特异性。
c：23S rDNA，序列长，遗传信息量多，碱基突变速度较快。
应选择上述
（填选项字母）序列设计引物PCR，并测序鉴定，理由是
__________。
(3)菌株T1彻底降解杀草丹需经多个中间产物依次降解。T1进行传代培养时，发现有一菌株（Ｔ1ｍ）失去降解杀草丹的能力，但对杀草丹下游的中间产物仍具有较强降解能力。测序并比对菌株T1和Ｔ1ｍ的基因组，发现T1m缺失tmoA和tmoB基因。为探究tmoA和tmoB两基因在杀草丹降解中的作用，将不同质粒分别导入菌株，培养一段时间后，结果如图2。
①图中1和2菌株分别是
__________。
②结合上述信息和实验结果，解释T1m对杀草丹降解能力变化的原因：
。
【推荐3】PHB2蛋白具有抑制细胞增殖的作用。为初步探究某动物PHB2蛋白抑制人宫颈癌细胞增殖的原因， 研究者从基因数据库中获取了该蛋白的基因编码序列（简称phb2基因），利用大肠杆菌表达该蛋白。回答下列问题：
(1)为获取phb2基因，提取该动物肝脏组织的
,再经
________过程得到cDNA，将其作为PCR反应的模板， 并设计一对特异性引物来扩增目的基因。与生物体内的DNA聚合酶相比，PCR技术中所用的DNA聚合酶特点是
________。
(2)图为所用载体图谱示意图，质粒DNA含有启动子，启动子是
识别并结合的位点。质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能
________。
名称
识别序列及切割位点
名称
识别序列及切割位点
HindⅢ
A↓AGCTT
EcoRI
G↓AATTC
PvitⅡ
CAG↓CTG
PstI
CTGC↓AG
KpnI
G↓GTACC
BamHI
G↓GATCC
注：箭头表示切割位点
(3)构建基因表达载体需要用到限制酶和DNA连接酶，其中，DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是
。图1中限制酶的识别序列及切割位点见表，为使phb2基因（该基因序列不含图中限制酶的识别序列）与载体正确连接，在扩增的phb2基因两端分别引入
________和
________两种不同限制酶的识别序列。经过这两种酶酶切的phb2基因和载体进行连接时，可选用
________（填“E·coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。
(4)转化前需用
处理大肠杆菌细胞，使其处于
________，以提高转化效率。将转化后的大肠杆菌接种在含
________的培养基上进行培养。
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