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一种改善睡眠的组合物、线叶金雀花

花匠小妙招
2024-11-23 15:16

一种改善睡眠的组合物、线叶金雀花-芦笋睡眠改善液、茶粉的制备方法和应用与流程

1.本发明属于食品加工技术领域，具体涉及一种改善睡眠的组合物、线叶金雀花-芦笋睡眠改善液、茶粉的制备方法和应用。

背景技术：

2.随着经济的快速发展及社会竞争的加剧，人们的生活压力增加、生活节奏加快，由此带来的睡眠问题也逐渐凸显，2018年《中国睡眠质量报告》显示，我国83.81％受访者存在睡眠困扰，其中入睡困难占25.83％，浅睡眠占26.49％。据世界卫生组织的调查，全球约27％的人口存在睡眠障碍，我国成年人的失眠发生率则高达38.2％，睡眠障碍已经成为全球关注的健康问题。
3.目前对于失眠的治疗，临床常采用镇静催眠类的西药，虽然效果好，但都会产生头晕、乏力、困倦及注意力不集中等不良反应，且会产生较为严重的依赖性；改善失眠的保健食品以褪黑素类为主，但改善效果不明显，且褪黑素属于激素类，长时间服用也会出现依赖性，无效果等现象。现有技术中，关于改善睡眠的发明专利多为中药或其他药物组合物、保健食品等，主要以中药材、西药等为主要原料，不宜长期服用。
4.线叶金雀花，又名南非路易博士茶、南非红茶，是南非独有的一种灌木花茶。因其不含咖啡因、鞣质很少、富含黄酮和多酚的功效成分而闻名，已有300多年的历史，一直以来南非人将其作为包治百病的神茶，叶金雀花需要用热水冲泡，食用不便，冲泡的液体中有效成分含量低。且现有技术中制备线叶金雀花粉时未见应用菌种发酵的相关报道，制备的线叶金雀花粉主要成分为多酚，阿司巴汀的含量低，口感差，人体吸收效果差。
5.芦笋又名石刁柏、龙须菜，属天门冬科天门冬属植物，是一种药食两用的名贵蔬菜，被世界卫生组织列为世界十大最具营养价值的蔬菜之首，在国际市场上享有“蔬菜之王”的美称。现有技术中制备的芦笋粉时主要通过清洗、粉碎、浸提、过滤、浓缩、杀菌、喷雾干燥步骤，未见超声耦合酶解的应用报道，制备的芦笋粉的芦笋皂苷含量低，人体吸收效果差。
6.因此，现有技术中急需一种可以长期服用的、安全可靠，改善睡眠效果好，风味独特的线叶金雀花和芦笋制备的组合物。

技术实现要素：

7.本发明的目的提供一种改善睡眠的组合物，本发明的改善睡眠的组合物线叶金雀花和芦笋具有协同增效作用，口感好，改善睡眠的功效好，安全可靠，可以长期服用。
8.为了解决上述技术问题，本发明还提供了以下技术方案：
9.本发明提供了一种改善睡眠的组合物，所述组合物包括线叶金雀花和芦笋；所述线叶金雀花和芦笋的原料质量比为1：(1～10)。
10.本发明还提供了一种线叶金雀花-芦笋睡眠改善液的制备方法，包含以下步骤：
11.将线叶金雀花与萃取剂混合后超声萃取，获得萃取液；分离所述萃取液，获得茶汤；发酵所述茶汤，获得线叶金雀花发酵原液；所述发酵用菌包括醋酸菌、乳酸菌和酵母菌中的一种或几种；所述超声萃取用萃取剂为水和/或乙醇；
12.将所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液混合后过滤和浓缩，得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。
13.优选的，所述线叶金雀花与萃取剂的质量体积比为1g：(20～80)ml，所述超声萃取的功率为50～300w、温度为60～95℃，时间为20～90min；
14.所述发酵用菌以菌悬液的形式接种；所述发酵时还包括在所述茶汤中添加发酵配料；所述菌悬液的接种量为所述茶汤和所述发酵配料总质量的1％～9％；所述发酵的温度为30～40℃，发酵时间为48～168h，所述发酵配料包括蔗糖、葡萄糖、果糖和乳糖中的一种或多种。
15.优选的，所述芦笋萃取液的制备方法包含如下步骤：将芦笋与水混合打浆，获得芦笋浆；将所述芦笋浆与酶混合后进行超声耦合酶解，获得酶解液；将所述酶解液离心，获得芦笋萃取液；所述酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或几种；
16.所述芦笋与水的质量体积比为1g：(3～10)ml；所述超声耦合酶解的温度为30～85℃，超声功率为50～300w，时间为30～90min；所述酶的质量为芦笋原料质量的0.1～0.5％。
17.优选的，所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液混合时，以固形物含量计，所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液的总固形物比为1：(1～10)。
18.优选的，所述过滤包括粗滤、精滤和超滤；所述粗滤的孔径为120～300目，所述精滤的孔径为5～10μm，所述超滤孔径为5～10nm；所述的浓缩包括真空浓缩或膜浓缩。
19.本发明还提供了一种线叶金雀花-芦笋速溶茶粉的制备方法，上述技术方案所述制备方法得到的线叶金雀花-芦笋睡眠改善液与辅料混合后杀菌和干燥得到；以固形物含量计，所述速溶茶粉中线叶金雀花粉和芦笋粉的质量比为1:(1～10)；所述线叶金雀花-芦笋睡眠改善液可溶性固形物含量为20～25
°
brix；
20.所述辅料包括麦芽糊精、聚葡萄糖和菊粉中的一种或几种；所述辅料的质量为所述速溶茶粉质量的30％～70％。
21.本发明还提供了上述技术方案所述改善睡眠的组合物或上述技术方案所述制备方法制备得到的线叶金雀花-芦笋睡眠改善液或上述技术方案所述制备方法制备得到的速溶茶粉在制备改善睡眠的功能性食品中的应用。
22.本发明还提供了一种改善睡眠功能饮品，按质量百分含量计，包括以下质量％的原料：线叶金雀花-芦笋速溶茶粉5～20％、γ-氨基丁酸0.1～1％、酸枣仁提取物1～5％、茶叶茶氨酸0.1～0.4％、酸樱桃汁1～5％、甜味剂0.1～0.2％、酸度调节剂0.5～2％、食用香精0.1～0.5％和余量的水。
23.优选的，所述酸枣仁提取物为炒制酸枣仁的水提物或醇提物；
24.所述甜味剂为甜菊糖苷、罗汉果苷、三氯蔗糖、甜蜜素和甘草酸铵盐中的一种或几种；
25.所述酸度调节剂为柠檬酸、柠檬酸钠和抗坏血酸中的一种或几种。
26.本发明的有益效果：
27.本发明提供了一种改善睡眠的组合物，所述组合物包括线叶金雀花和芦笋；所述
线叶金雀花和芦笋原料的质量比为1：(1～10)。本发明的组合物的活性成分阿司巴汀和芦笋皂苷的含量高，同时线叶金雀花和芦笋具有协同增效作用，改善睡眠的效果好，口感好，安全可靠，无依赖性，可长期服用，同时还具有多种保健功效。
28.本发明还提供了一种线叶金雀花-芦笋睡眠改善液的制备方法，将线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液混合后过滤和浓缩，得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。本发明通过菌种发酵可以降低线叶金雀花茶汤中的酚氨比、提高茶汤的营养价值，同时改善其风味，发酵后的线叶金雀花风味更加独特，具有酸甜的口感，口感更好，增加独特的果香，而且会产生一些有机酸及其他活性成分，不仅具有改善睡眠的作用，还具有调节肠道、降低胆固醇、降血压等多种保健功效，可长期饮用。本发明将芦笋与水打浆、超声耦合酶解，离心后获得芦笋萃取液；所述酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或几种；本发明利用超声耦合酶解促使芦笋细胞破碎，提高芦笋中芦笋皂苷的溶出速度和数量，还可以增加酶与底物的接触面积，提高酶解效率，促进芦笋中的纤维素酶解水解，提高萃取得率，促进内容物地溶出，促进芦笋萃取液的过滤及澄清，提高了睡眠改善液中的活性成分阿司巴汀和芦笋皂苷的含量，改善睡眠效果好。
附图说明
29.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
30.图1为线叶金雀花-芦笋速溶茶粉制备流程；
31.图2为实施例1和对比例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉样品感官测评结果。
具体实施方式
32.本发明提供了一种改善睡眠的组合物，所述组合物包括线叶金雀花和芦笋；所述线叶金雀花和芦笋的原料质量比为1：(1～10)。
33.本发明所述线叶金雀花和芦笋的原料质量比为1：(1～10)，优选为1：(2～8)，更优选为1：5。本发明以特定比例复配线叶金雀花和芦笋，使所得组合物具有协同增效的作用，进一步提升了改善睡眠的效果。
34.本发明所述组合物的剂型优选包括但不限于片剂、粉剂、胶囊剂和液体剂型。
35.本发明还提供了一种线叶金雀花-芦笋睡眠改善液的制备方法，包含以下步骤：
36.将线叶金雀花与萃取剂混合后超声萃取，获得萃取液；分离所述萃取液，获到茶汤；发酵所述茶汤，获得线叶金雀花发酵原液；所述发酵用菌包括醋酸菌、乳酸菌和酵母菌中的一种或几种；所述超声萃取用萃取剂为水和/或乙醇；
37.将所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液混合后过滤和浓缩，得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。
38.本发明将线叶金雀花与萃取剂混合后超声萃取，获得萃取液。
39.本发明所述线叶金雀花在进行超声萃取之前，优选还包括对所述线叶金雀花进行前处理，所述前处理优选包括依次进行凋萎、压碎及堆积发酵，本发明对所述凋萎、压碎及堆积发酵的手段没有特殊限定，采用常规的方式即可。本发明所述前处理可使线叶金雀花叶片的柔软性及韧性发生改变，在一定程度上破坏线叶金雀花叶的细胞壁，更有助于冲泡
或提取过程中内容物的溶出，而堆积发酵使线叶金雀花叶的颜色及风味、香气发生改变，提升线叶金雀花的口感。
40.本发明优选将前处理后的线叶金雀花进行超微粉碎，所述超微粉碎后的线叶金雀花粒径优选为10～25μm。
41.在本发明中，所述超声萃取用萃取剂为水和/或乙醇，所述乙醇的质量分数优选优选为30～70％。本发明所述萃取剂可以提高线叶金雀花中黄酮的溶出速度和数量，最终提高线叶金雀花中黄酮的有效成分含量。在本发明中，所述线叶金雀花与萃取剂的质量体积比优选为1g：(20～80)ml，进一步优选为1g：(30～60)ml，更优选为1g：50ml。在本发明中，所述超声萃取的功率优选为50～300w，进一步优选为100～200w，更优选为150w；所述超声萃取的温度优选为60～95℃，进一步优选为70～85℃，更优选为80℃；所述超声萃取的时间优选为20～90min，进一步优选为30～70min，更优选为50min。本发明所述超声辅助萃取利用超声波的机械粉碎和空化作用产生的冲击波和剪切力促使线叶金雀花细胞破碎，提高线叶金雀花茶汤中黄酮的溶出速度和数量，以达到提高提取效率、缩短提取时间的目的。本发明所述超声萃取时萃取装置外优选带有蒸汽夹套，可进行加热和/或保温。
42.获得萃取液后，本发明对所述萃取液进行分离，获得茶汤。在本发明中，所述分离方式优选包括过滤和离心，所述过滤优选为80目袋式过滤器，所述过滤的作用为除去茶渣，所述离心的参数优选为转速6000r/min，时间20mim；所述离心优选利用碟片离心机完成。
43.获得茶汤后，本发明对所述茶汤进行发酵，获得线叶金雀花发酵原液。在本发明中，所述发酵用菌包括醋酸菌、乳酸菌和酵母菌中的一种或几种，更优选为醋酸菌、乳酸菌和酵母菌。本发明所述醋酸菌、乳酸菌和酵母菌在发酵过程中会产生多种有机酸(包括乳酸、醋酸、苹果酸、丙酮酸、葡糖酸、葡萄糖醛酸等)、氨基酸、b族维生素、多酚和部分水解酶等代谢产物和生物活性物质，具有改善肠道健康、抗氧化、降血脂、改善睡眠的功能，提高了线叶金雀花发酵原液的功效。
44.本发明对所述醋酸菌、乳酸菌和酵母菌的来源没有特殊限定，采用常规的市售产品即可。本发明所述醋酸菌acetobactersp.优选为菌种编号bncc336433，购买自北纳生物。
45.本发明所述乳酸菌优选为植物乳杆菌lactobacillusplantarum sp.菌种编号为bncc336421，购买自北纳生物。本发明所述酵母菌saccharomyces sp.菌种编号优选为bncc356377，购买自北纳生物。
46.本发明所述发酵之前在所述茶汤中优选添加发酵配料，所述发酵配料优选包括蔗糖、葡萄糖、果糖和乳糖中的一种或多种，进一步优选为蔗糖、葡萄糖和乳糖中的一种或多种，更优选为葡萄糖。本发明所述发酵配料的添加量优选为茶汤质量的8～20％，进一步优选为10～17％，更优选为13％。
47.本发明所述茶汤进行发酵时，优选先制备发酵用菌的菌悬液，再将菌悬液接种到茶汤中进行发酵。以醋酸菌、乳酸菌和酵母菌为发酵用菌举例说明：本发明优选利用所述醋酸菌、乳酸菌和酵母菌制备所述醋酸菌菌悬液、乳酸菌菌悬液和酵母菌菌悬液，将所述菌悬液接种于所述茶汤中进行发酵，所述菌悬液的浓度优选od
600
为0.9～1，所述接种量优选为所述茶汤质量和所述发酵配料总质量的1％～9％，进一步优选为2％～7％，更优选为5％。本发明所述醋酸菌菌悬液、乳酸菌菌悬液和酵母菌菌悬液体积比优选为3:1:1。
48.本发明所述发酵的温度优选为30～40℃，进一步优选为33～36℃，更优选为32℃；
发酵的时间优选为48～168h，进一步优选为80～130h，更优选为120h。本发明改进了线叶金雀花的工艺，首次将菌种发酵的方式应用在线叶金雀花中。本发明通过菌种发酵可以降低线叶金雀花茶汤中的酚氨比、提高茶汤的营养价值，同时改善其风味，发酵后的线叶金雀花风味更加独特，具有酸甜的口感，口感更好，增加独特的果香，而且会产生一些有机酸及其他活性成分，不仅具有改善睡眠的作用，还具有调节肠道、降低胆固醇、降血压等多种保健功效，可长期饮用。
49.本发明所述芦笋萃取液的制备方法优选包含如下步骤：将芦笋与水混合打浆，获得芦笋浆；将所述芦笋浆与酶混合后进行超声耦合酶解，获得酶解液；将所述酶解液离心，获得芦笋萃取液；所述酶包括纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或几种。
50.本发明所述芦笋进行打浆之前，还包括优选对所述芦笋进行前处理，所述前处理优选包括依次进行的清洗、切段、热水漂烫和沥干。本发明对所述前处理的操作没有特殊限定，采用常规的操作方式即可。
51.在本发明中，所述芦笋与水的质量体积比优选为1g：(3～10)ml，进一步优选为1g：(3.5～8)ml，更优选为1g：4ml。所述打浆的时间优选5～10min，进一步优选为7～9min，更优选为8min，所述打浆优选利用打浆机。本发明对所述打浆机没有特殊限定，采用市售的产品即可。
52.所述打浆后本发明优选还包括进行胶体磨，所述胶体磨的次数优选为2次。本发明对所述胶体磨的参数没有特殊限定，采用常规的方式即可。
53.获得芦笋浆后，本发明将所述芦笋浆与酶混合后进行超声耦合酶解，获得酶解液。本发明所述酶优选为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或几种，进一步优选为纤维素酶、果胶酶和淀粉酶中的一种或几种，更优选为果胶酶和纤维素酶。本发明所述超声耦合酶解优选进行两步酶解，所述两步酶解优选包括第一步酶解和第二步酶解。在本发明实施例中，所述第一步酶解优选为果胶酶酶解，所述第二步酶解优选为纤维素酶解。所述两步酶解过程中均开启超声装置。本发明所述超声耦合酶解的温度优选为30～85℃，进一步优选为35～50℃，更优选为37～45℃；超声功率优选为50～300w，进一步优选为100～300w，更优选为300w；时间优选为30～90min，进一步优选为40～80min，更优选为60min；所述酶的添加量为芦笋原料质量的0.1～0.5％，进一步优选为0.1～0.4％，更优选为0.1～0.3％，所述超声耦合酶解的ph值根据酶的种类选择最适ph值。在本发明实施例中，所述果胶酶的添加量优选为芦笋原料质量的0.3％，所述酶解温度优选为45℃，ph值优选为3.5；所述纤维素酶的添加量优选为芦笋原料质量的0.1％，所述酶解温度优选为37℃，ph值优选为5.0。本发明所述超声耦合酶解优选在超声萃取罐中添加酶制剂同时进行萃取及酶解，所述超声萃取罐外带有蒸汽夹套，可进行加热或保温。本发明添加纤维素酶和果胶酶可以使芦笋中的不溶性纤维素水解为可溶的葡萄糖等，且能够更加有效地加速细胞壁地破碎，促进内容物地溶出，促进芦笋萃取液的过滤及澄清。
54.所述超声耦合酶解结束后，本发明优选还包括对所述酶解液进行灭酶，所述灭酶的温度优选为90～95℃，时间优选为10～25min。本发明所述灭酶结束后对酶解液进行离心，获得芦笋萃取液，所述离心的转速优选为3000r/min，时间优选为15min。本发明超声耦合酶解利用超声波的机械粉碎和空化作用产生的冲击波和剪切力促使芦笋细胞破碎，提高芦笋中芦笋皂苷的溶出速度和数量，还可以增加酶与底物的接触面积，提高酶解效率，促进
芦笋中的纤维素酶解水解，提高萃取得率。
55.本发明将所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液混合后过滤和浓缩，得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。
56.以固形物含量计，本发明所述线叶金雀花发酵原液与芦笋萃取液的质量比优选为1：(1～10)，进一步优选为1：(2～8)，更优选为1：5。
57.本发明所述过滤优选包括粗滤、精滤和超滤；所述粗滤的孔径优选为120～300目，所述精滤的孔径优选为5～10μm，所述超滤的孔径优选为5～10nm。本发明所述的浓缩包括真空浓缩或膜浓缩；所述浓缩的温度优选为60℃；所述浓缩后得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。
58.本发明还提供了一种线叶金雀花-芦笋速溶茶粉的制备方法，包含以下步骤：
59.上述技术方案获得的线叶金雀花-芦笋睡眠改善液与辅料混合后杀菌和干燥得到；以固形物含量计，所述速溶茶粉中线叶金雀花粉和芦笋粉的质量比为1:(1～10)；所述线叶金雀花-芦笋睡眠改善液的可溶性固形物含量为20～25
°
brix；
60.本发明所述辅料包括麦芽糊精、聚葡萄糖和菊粉中的一种或几种，优选为麦芽糊精和聚葡萄糖中的一种或几种，更优选为聚葡萄糖；所述辅料的质量为所述速溶茶粉质量的30％～70％，优选为35％～50％，更优选为40％。此处速溶茶粉的质量以辅料和线叶金雀花-芦笋睡眠改善液中固形物含量的总质量计。
61.本发明所述杀菌优选采用超高温瞬时灭菌，所述杀菌的温度优选为110～139℃，更优选为130℃，所述杀菌时间优选为10～60s，更优选为45s。本发明所述干燥优选采用喷雾干燥，所述喷雾干燥的温度优选为进风温度80～90℃，出风温度110～120℃；所述喷雾干燥的泵流速优选为0.5～2ml/min，进一步优选为1～1.5ml/min。
62.所述喷雾干燥后，本发明还包括对喷雾干燥后的线叶金雀花-芦笋固形物进行造粒，获得线叶金雀花-芦笋速溶茶粉。本发明所述造粒的优选利用流化床造粒，所述流化床的舱体温度优选为60℃，蠕动泵优选为75rpm，引风机频率优选为45～50hz。本发明首次将线叶金雀花和芦笋联合使用，线叶金雀花发酵原液和芦笋萃取液混合后，进行喷雾干燥，使线叶金雀花和芦笋性质更加稳定。
63.本发明将线叶金雀花萃取后发酵和芦笋进行萃取后线叶金雀花黄酮和芦笋皂苷含量提高，并且将线叶金雀花及芦笋粉复配使用，具有协同增效的作用。所述线叶金雀花黄酮包括阿司巴汀。本发明制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉，可快速溶解，且溶解后澄清透亮，风味独特，且提高线叶金雀花黄酮和芦笋皂苷的活性成分含量，不仅具有改善睡眠的效果，安全可靠，无依赖性，可长期服用，同时还具有多种保健功效。本发明制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉，不仅可直接食用，还可用于制备改善睡眠的功能食品。
64.本发明还提供了上述技术方案获得的改善睡眠的组合物或线叶金雀花-芦笋睡眠改善液或线叶金雀花-芦笋速溶茶粉在制备改善睡眠的功能性食品中的应用。在本发明中，所述功能性食品的剂型优选包括但不限于饮品、片剂、粉剂、颗粒剂和胶囊剂。
65.本发明还提供了一种改善睡眠功能饮品，按质量百分含量计，包括以下原料：前述技术方案所述线叶金雀花-芦笋速溶茶粉5～20％、γ-氨基丁酸0.1～1％、酸枣仁提取物1～5％、茶叶茶氨酸0.1～0.4％、酸樱桃汁1～5％、甜味剂0.1～0.2％、酸度调节剂0.5～2％、食用香精0.1～0.5％和余量的水。
66.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括线叶金雀花-芦笋速溶茶粉5～20％，优选为8～13％，更优选为8～10％。
67.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括γ-氨基丁酸0.1～1％，优选为0.15～1％，更优选为0.2～1％。
68.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括酸枣仁提取物1～5％，优选为2～4％，更优选为2～3％。本发明所述酸枣仁提取物为炒制酸枣仁的水提物或醇提物。本发明对所述酸枣仁的炒制方法、水提取和醇提取的方法没有特殊限定，采用常规的方法即可；或者采用常规市售酸枣仁提取物。
69.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括茶叶茶氨酸0.1～0.4％，优选为0.1～0.3％，更优选为0.1～0.2％。在本发明实施例中，所述茶叶茶氨酸为0.4％或0.1％。
70.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括酸樱桃汁1～5％，优选为2～4.5％，更优选为3～4％。
71.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括甜味剂0.1～0.2％，优选为0.13～0.2％，更优选为0.15～0.2％。在本发明中，所述甜味剂优选为甜菊糖苷、罗汉果苷、三氯蔗糖、甜蜜素和甘草酸铵盐中的一种或几种，进一步优选为甜菊糖苷、罗汉果苷、三氯蔗糖和甘草酸铵盐中的一种或几种，更优选为甜菊糖苷或三氯蔗糖。
72.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括酸度调节剂0.5～2％，优选为0.5～1％，更优选为0.5～0.65％。所述酸度调节剂优选为柠檬酸、柠檬酸钠和抗坏血酸中的一种或几种，更优选为柠檬酸和柠檬酸钠。
73.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括食用香精0.1～0.5％，优选为0.2～0.4％，更优选为0.2％。本发明所述食用香精选择常规的食用香精即可，无特殊要求。
74.以质量百分含量计，本发明所述改善睡眠功能饮品包括水65.9～92.1％，优选为70～85％，更优选为81.8～84.6％。
75.本发明所述改善睡眠功能饮品制作方法优选为将所述线叶金雀花-芦笋速溶茶粉、γ-氨基丁酸、酸枣仁提取物、茶叶茶氨酸、甜味剂、酸度调节剂和水全部加入调配罐，第一搅拌溶解后再加入酸樱桃汁和食用香精进行第二搅拌，获得调配液，所述调配液过滤和灭菌后灌装获得改善睡眠功能饮品。所述第一搅拌时间为25min，所述水的温度为50℃；所述第二搅拌时间为5min，所述过滤优选利用400目过滤器；所述灭菌的温度为135℃，时间为25s。
76.为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的一种改善睡眠的组合物、线叶金雀花-芦笋睡眠改善液、茶粉的制备方法和应用进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
77.实施例1-1
78.步骤1：线叶金雀花发酵原液的制备
79.(1)前处理：线叶金雀花在室内进行自然凋萎，压碎及堆积发酵12h后，进行超微粉碎，粉碎后粒径≤25μm；
80.(2)超声辅助萃取：将步骤(1)粉碎后的线叶金雀花粉投入超声萃取罐中进行超声
萃取，按照1g：50ml的质量体积比加入80℃热水，超声功率150w，萃取时间50min，萃取温度80℃；
81.(3)固液分离：萃取结束后，首先通过80目袋式过滤器除去茶渣，再通过碟片离心机在6000r/min转速下离心20mim，得到线叶金雀花茶汤；
82.(4)菌悬液准备：将购买的植物乳杆菌、醋酸菌及酵母菌分别活化后，配制成菌悬液，用分光光度计测定，调整菌悬液的浓度至od
600
为0.972，即得到待接种的菌悬液；
83.(5)微生物发酵：向线叶金雀花茶汤中加入茶汤质量13％的葡萄糖，搅拌使其完全溶解后，按照茶汤和葡萄糖总质量5％的接种量，接种植物乳杆菌、醋酸菌及酵母菌，植物乳杆菌、醋酸菌及酵母菌的菌悬液体积比例为3:1:1，接种后在32
±
1℃条件下发酵120h，得到线叶金雀花发酵原液，用分光光度计测定其od
600
为0.48，采用糖度仪直接测试读数的方式测定所得线叶金雀花发酵原液可溶性固形物含量为0.564
°
brix。
84.步骤2：芦笋萃取液的制备
85.(1)前处理：取新鲜芦笋，清洗、切段后，在95℃热水中漂烫5min，沥干水分，待用。
86.(2)打浆：沥干水分后的芦笋按照1g：4ml的质量体积比加水，置于打浆机中打浆，打浆时间8min，打浆后过2遍胶体磨，得到芦笋浆；
87.(3)超声耦合酶解：调节芦笋浆ph至3.5，转移至超声罐中，加入芦笋原料质量0.3％的果胶酶，在45℃条件下进行第一步酶解40min，第一步酶解结束后，调整ph至5.0，加入芦笋原料质量0.1％的纤维素酶进行第二步酶解，酶解温度37℃，酶解时间20min。第一步酶解和第二步酶解两步酶解过程中均开启超声装置，超声功率为300w。酶解结束后，加热至90℃以上，保持10min进行灭酶，3000r/min条件下离心15min，取上清液，得到芦笋萃取液。采用糖度仪直接测试读数的方式测定所得芦笋浆可溶性固形物含量，为2.321
°
brix。
88.步骤3：线叶金雀花-芦笋速溶茶粉的制备
89.混合调配：取上述所得线叶金雀花发酵原液和芦笋萃取液按照固形物含量比1:5的比例即线叶金雀花发酵原液和芦笋萃取液体积比为1:1.215混合均匀；
90.过滤：上述混合液依次通过300目双联过滤器、5μm孔径压滤机以及10nm孔径的陶瓷膜进行粗滤、精滤及超滤，得到线叶金雀花-芦笋混合清汁；
91.浓缩：过滤后的混合清汁采用降膜蒸发器在60℃条件下，低温浓缩至可溶性固形物24.852
°
brix，得到线叶金雀花-芦笋睡眠改善液。
92.实施例1-2
93.将实施例1-1得到的线叶金雀花-芦笋睡眠改善液进行调配及灭菌：按照线叶金雀花-芦笋速溶茶粉质量40％(计算方法：线叶金雀花-芦笋睡眠改善液固形物含量为24.852
°
brix，称取241g线叶金雀花-芦笋睡眠改善液，加入40g聚葡萄糖，并加水补充至400g，此时混合溶液的总固形物含量为25
°
brix)的比例加入聚葡萄糖，并调整总固形物含量为25
°
brix，搅拌使其充分溶解后，采用超高温瞬时灭菌，灭菌的温度为130℃，时间为45秒；
94.喷雾干燥：灭菌后的混合料液进行喷雾干燥，喷雾干燥进风温度为120℃，出风温度为80℃；喷雾干燥的泵流速为1.5ml/min；
95.造粒：喷雾干燥后的粉末经流化床造粒，舱体温度60℃，蠕动泵设置75rpm，引风机频率45～50hz，造粒后得到线叶金雀花-芦笋速溶茶粉。线叶金雀花-芦笋速溶茶粉制备流程见图1。
96.实施例2改善睡眠功能饮品制备
97.(1)按照如下比例配料：取实施例1-2制备得到的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉8g、γ-氨基丁酸1g、酸枣仁提取物2g、茶叶茶氨酸0.4g、酸樱桃汁3g、三氯蔗糖0.15g、柠檬酸0.5g、柠檬酸钠0.15g、食用香精0.2g，用水补足100g(水84.6g)。
98.(2)制备方法：
99.1)调配：将上述配料除果汁及香精外，全部加入调配罐，加50℃水搅拌25min，使其完全溶解，然后将果汁及香精加入调配罐中，并加水定容，继续搅拌5min，使其混合均匀，得到调配液，过400目过滤器后泵送至暂存罐中；
100.2)灌装及灭菌：上述调配液通过管式加热器加热至85℃，以50ml/瓶的规格，灌装至玻璃瓶后，密封，在115℃条件下灭菌15min，冷却后即得到改善睡眠功能饮品。
101.实施例3改善睡眠功能饮品制备
102.(1)原料组成
103.取实施例1-2制备得到的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉10g、γ-氨基丁酸0.2g、酸枣仁提取物3g、茶叶茶氨酸0.1g、酸樱桃汁4g、甜菊糖苷0.2g、柠檬酸0.4g、柠檬酸钠0.1g、食用香精0.2g，余量用水补足100g(水81.8g)。
104.(2)制备方法：
105.1)调配：将上述配料按照所需量称重后，除果汁及香精外，全部加入调配罐，加50℃水搅拌25min，使其完全溶解，然后将果汁及香精加入调配罐中，并加水定容，继续搅拌5min，使其混合均匀，得到调配液，过400目过滤器后泵送至暂存罐中；
106.2)灌装及灭菌：上述调配液通过超高温瞬时灭菌，灭菌温度为135℃，时间为25s，无菌灌装至200ml pet瓶中，冷却后得到改善睡眠功能饮品。
107.对比例1线叶金雀花-芦笋速溶茶粉制备
108.步骤1：线叶金雀花发提取液的制备
109.(1)前处理：线叶金雀花在室内进行自然凋萎，压碎及堆积发酵12h后，进行超微粉碎，粉碎后粒径≤25μm；
110.(2)热提：粉碎后的线叶金雀花粉投入萃取罐中进行萃取，按照1g：50ml的质量体积比加入80℃热水，萃取时间50min，萃取温度80℃；
111.(3)固液分离：萃取结束后，首先通过80目袋式过滤器除去茶渣，再通过碟片离心机在6000r/min转速下离心20mim，得到线叶金雀花茶汤。
112.步骤2：芦笋萃取液的制备
113.(1)前处理：取新鲜芦笋，清洗、切段后，在95℃热水中漂烫5min，沥干水分，待用；
114.(2)打浆：沥干水分后的芦笋按照1g：4ml的质量体积比加水，置于打浆机中打浆，打浆时间8min，打浆后过2遍胶体磨，得到芦笋浆；
115.(3)酶解：将芦笋浆调节ph至3.5，转移至酶解罐中，加入芦笋原料质量0.3％的果胶酶，在45℃条件下酶解40min，酶解结束后，加热至90℃以上，保持10min进行灭酶，3000r/min条件下离心15min，取上清液，得到芦笋萃取液。
116.步骤3：线叶金雀花-芦笋速溶茶粉的制备
117.混合调配：取上述所得线叶金雀花提取液和芦笋萃取液按照固形物含量1:5的比例混合均匀；
118.过滤：上述混合液依次通过300目双联过滤器、5μm孔径压滤机以及10nm孔径的陶瓷膜进行粗滤、精滤及超滤，得到线叶金雀花-芦笋混合清汁；
119.浓缩：过滤后的混合清汁采用降膜蒸发器在60℃条件下，低温浓缩至可溶性固形物24.382
°
brix；
120.调配及灭菌：按照线叶金雀花-芦笋速溶茶粉质量40％(计算方法：线叶金雀花-芦笋睡眠改善液固形物含量为24.382
°
brix，称取246g线叶金雀花-芦笋睡眠改善液，加入40g聚葡萄糖，并加水补充至400g，此时混合溶液的总固形物含量为25
°
brix)的比例加入聚葡萄糖，并调整总固形物含量为25
°
brix，搅拌使其充分溶解后，采用超高温瞬时灭菌，灭菌的温度为130℃，时间为45秒；
121.喷雾干燥：灭菌后的混合料液进行喷雾干燥，喷雾干燥进风温度为120℃，出风温度为80℃；
122.造粒：喷雾干燥后的粉末经流化床造粒，舱体温度60℃，蠕动泵设置75rpm，引风机频率45hz，造粒后得到线叶金雀花-芦笋混合茶粉对比样品。
123.应用例1理化指标测定
124.以实施例1和对比例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉为样品，测定其溶解度、浊度，阿司巴汀以及芦笋皂苷的含量。试验方法如下：
125.1)溶解度测定
126.将需要测定的样品用去离子水制备成质量浓度为5％溶液，边搅拌边观察其溶解过程，记录完全溶解所需的时间。
127.2)浊度的测定
128.上述样品完全溶解后，采用2100n型浊度仪进行测定。
129.3)阿司巴汀含量的测定
130.以阿司巴汀标准品配制成不同浓度的溶液，用高效液相色谱测定其峰面积，以峰面积(y)为纵坐标，溶液浓度(x)为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y＝40.25x+11.62，r2＝0.9997。
131.阿司巴汀含量测定方法：取供试样品1.0g，置具塞锥形瓶中，加入150g煮沸的蒸馏水，称重，超声20min，摇匀、过滤。精密量取续滤液100ml，置分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次，用量分别为100、100、60ml，每次约半小时，时时振摇。合并三次乙酸乙酯层萃取液，置蒸发皿中水浴蒸干，残渣用甲醇定容于10ml容量瓶中，用高效液相色谱仪进行测定其阿司巴汀含量。
132.色谱条件：c18柱(4.6mm
×
250mm)，流速：0.5ml/min；紫外检测器，检测波长为280nm；进样量：25μl；柱温：38℃；流动相：以(a)0.25％甲酸溶液-(b)甲醇为流动相，梯度洗脱。hplc流动相梯度变化见表1。
133.表1 hplc流动相梯度变化表
[0134][0135]
4)芦笋皂苷含量的测定
[0136]
以菝葜皂苷元为标准品，加高氯酸5ml，摇匀，65℃水浴15min，取出后冰水冷却5min，在310nm处测定吸光度，以吸光度值(y)为纵坐标，标准品浓度(x)为横坐标，绘制标准曲线，回归方程为：y＝1.139x+0.01261，r2＝0.9978。
[0137]
芦笋皂苷含量测定方法：取待测样品1g，加高氯酸5ml，摇匀，65℃水浴15min，取出后冰水冷却5min，在310nm处测定吸光度，根据标准曲线计算芦笋皂苷的含量。
[0138]
实施例1和对比例1样品的溶解度、浊度、阿司巴汀含量和芦笋皂苷含量试验结果见表2。
[0139]
表2实施例1和对比例1样品的溶解度、浊度、阿司巴汀含量和芦笋皂苷含量试验结果
[0140][0141]
根据表2可知，本发明实施例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉的溶解度高于对比例1，浊度显著低于对比例1，说明其澄清度更好，且其中的活性成分阿司巴汀和芦笋皂苷的含量也远高于对比例1。
[0142]
应用例2感官测评试验
[0143]
将实施例1和对比例1制备的茶粉样品，按照5％的浓度加入纯净水冲调，进行感官测评。
[0144]
测评人数18人，年龄24～35岁，其中男性7人，女性11人。分别对两个样品的酸、甜、涩、苦、茶香、果香、青草味进行评分，评分标准见表3。
[0145]
表3评分标准
[0146][0147]
实施例1和对比例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉样品感官测评结果见图2，由感官测评结果可以看出，实施例1由于在线叶金雀花发酵过程中加入了葡萄糖，且发酵过程中产生了大量的有机酸，所以甜味及酸味较对比例1更强，并且茶的涩味、苦味以及芦笋的青草味都有所降低，还具有一定的果香，喜好度也更高，说明实施例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉风味更好。
[0148]
应用例3改善睡眠动物实验
[0149]
1动物实验分组及处理方法
[0150]
将spf级6周龄icr雄性小鼠动物根据体重随机分为40组，每组10只。具体处理方法为：所有动物在适应饲养一周后，开始灌胃。不同组别灌胃样品及剂量如表4所示，其中实施例组的低中高剂量分别相当于人体推荐量的10、20、30倍。
[0151]
表4不同组别灌胃样品及剂量
[0152][0153]
每天上午灌胃1次。屏障环境饲养间温度控制在20～26℃，相对湿度控制在40～70％，白昼与黑夜每12h为一个循环。整个动物实验饲养过程、动物处理和操作规范遵照相关sop执行。
[0154]
2实验方法
[0155]
改善睡眠实验参考《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》中改善睡眠功能评价规范部分进行。所有实验均在温度适宜、安静环境下进行。
[0156]
(1)直接睡眠实验
[0157]
每日灌胃后观察各组小鼠是否出现直接睡眠现象。小鼠是处在睡眠或觉醒状态根据翻正反射是否消失来判断。翻正反射是指如果将小鼠置于背卧位时，能立即将身位翻正。如果小鼠超过30～60s不能翻正身位，即认为翻正反射消失，睡眠状态开始。而当小鼠恢复翻正反射即认为其睡眠状态结束。
[0158]
(2)延长戊巴比妥钠睡眠时间实验
[0159]
在正式实验前先进行预实验确定戊巴比妥钠腹腔注射剂量，以腹腔注射后全部小鼠入睡且睡眠持续时间适中的剂量为标准，并用此剂量进行正式实验。
[0160]
小鼠灌胃15min后通过给每只小鼠腹腔注射诱导睡眠，按10ml/kg腹腔注射戊巴比妥钠48mg/kg.bw，以翻正反射消失至再次出现的时间记录为小鼠睡眠时间，观察各组戊巴比妥钠睡眠时间是否延长。
[0161]
(3)戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验
[0162]
在正式实验前先进行预实验，最大阈下剂量确定为腹腔注射戊巴比妥钠后80～90％小鼠翻正反射不消失的剂量，并用此剂量进行正式实验。
[0163]
正式实验：小鼠灌胃15min后，按10ml/kg给各组动物腹腔注射巴比妥钠25mg/kg.bw的戊巴比妥钠，小鼠翻正反射消失大于1min则认为入睡成功，记录30min内入睡动物数与睡眠率，使用卡方检验。
[0164]
(4)戊巴比妥钠睡眠潜伏期实验
[0165]
在正式实验前先进行预实验，确定使全部小鼠入睡且潜伏期适中的巴比妥钠腹腔注射剂量，并用此剂量进行正式实验。
[0166]
正式实验：小鼠灌胃15min后，按10ml/kg给各组动物腹腔注射巴比妥钠280mg/kg，小鼠睡眠潜伏期记录为巴比妥钠注射后至翻正反射消失的时间，观察受试物对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响。
[0167]
3实验结果
[0168]
实施例1、实施例2和对比例1样品组改善睡眠结果如表5～表7所示。
[0169]
(1)直接睡眠实验结果。由直接睡眠实验可知小鼠给予无菌生理盐水及不同剂量实施例样品后，各组小鼠均未出现睡眠现象且能够正常活动，表明各组受试物对小鼠无直接催眠作用。
[0170]
(2)延长戊巴比妥钠睡眠时间实验结果见表5。
[0171]
表5实施例1、实施例2和对比例1样品组对小鼠睡眠时间的影响
[0172][0173][0174]
注：“*”表示与空白组相比，具有显著差异性(p《0.05)
[0175]
(3)戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验结果见表6。
[0176]
表6实施例1、实施例2和对比例1样品组对戊巴比妥诱导小鼠睡眠率的影响
[0177][0178]
(4)戊巴比妥钠睡眠潜伏期实验结果见表7。
[0179]
表7实施例1、实施例2和对比例1样品组对小鼠睡眠潜伏期的影响
[0180][0181][0182]
注：“*”表示与空白组相比，具有显著差异性(p《0.05)。
[0183]
综上，根据《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》中改善睡眠功能评价规范的要求获得的结果见表5～表7，根据表5～表7可知，本发明实施例1制备的线叶金雀花-芦笋速溶茶粉及实施例2制备的改善睡眠饮品可以明显的增加小鼠睡眠时间，增加小鼠入睡几率(卡方检验结果显示，实施例1样品组、实施例2样品组、对比例1样品组的小鼠睡眠发生率是存在显著差异的，实施例1组的小鼠睡眠发生率最高)，缩短小鼠的睡眠潜伏期，具有改善睡眠功能作用；对比例1在一定条件下具有增加小鼠睡眠时间、缩短睡眠潜伏期的作用，但所需的剂量较高，在相同剂量条件下，增加小鼠睡眠时间以及缩短睡眠潜伏期的效果较实
施例1制备的速溶茶粉差。
[0184]
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。