【摘要】:兰科植物作为一种重要的植物资源,具有巨大的经济价值和药用价值,市场需求很大。但由于人为过度采集、生境的破坏和丧失,野生兰科植物资源日趋濒危。为探索兰科菌根真菌对兰科植物的作用,改善兰科植物成活率低、生长缓慢的现状,本研究采用菌根技术与组培技术相结合的手段,以野生春兰和五唇兰为材料,从根系中分离获得真菌,通过建立美花兰组培苗与真菌的共生培养体系,筛选与美花兰有效共生并能明显促进其生物量增长的优良菌株。从真菌的处理、菌根染色、真菌的重分离、美花兰植株生物量的增长等方面研究菌根化育苗技术体系。具体结果如下:(1)筛选出美花兰生根壮苗的优良培养基组合。将美花兰分化苗转入不同培养基中,通过对叶、芽、根的长势和生物量的比较,得出组合1/2MS+NAA2.5mg/L+IBA0.5mg/L+8g/L琼脂+20g/L葡萄糖+香蕉10g/L+1g/L活性炭的效果最佳。根长平均增长55%,叶平均增长133.3%,根芽比增多47%。(2)筛选出互不对峙、能共同生长的菌株组合。将从野生春兰根系分离的菌株CF1、CF2、CF3、CF4、CF5、CF6、CF7、CF8和野生五唇兰根系上分离的菌株DMF58、DMF80以及野生独花兰根系上分离的菌株DHL16、DHL19进行交叉对峙试验,最终得出DMF80+CF1、DMF80+CF2、DMF80+CF3、DMF80+DHL19为不对峙组合,相互之间能融合生长。(3)筛选出促进美花兰生长、分化的菌株组合。以改良的DE培养基为共生培养基,建立美花兰与菌根真菌适合的共生培养体系,测定比较美花兰鲜重增长率和叶绿素含量,得出CF2+DMF80为促进美花兰组培苗生长的优良菌株组合。其鲜重增长率比对照高73.1%,叶绿素a比对照高71.4%,叶绿素b比对照高105.1%。(4)筛选出美花兰出瓶移栽的优良栽培基质。将美花兰组培苗出瓶移栽到不同组合的栽培基质中,通过将盆栽苗成活率、生物量与对照(水苔)比较,得出组合2/3草炭土+1/3珍珠岩为最佳组合,苗成活率高达92%,长势好,植株粗壮,叶色翠绿。(5)比较不同pH值、温度、维生素对菌株DMF80生长的影响。结果显示,少量的烟酸能促进菌株DMF80的生长,pH8为最适酸碱度,30℃最适合其生长。
【学位授予单位】:北京林业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
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