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一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法与流程

花匠小妙招
2024-11-29 07:27

本发明涉及植物组织培养，具体为一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法。

背景技术：

1、春兰(cymbidium goeringii)花香馥郁、叶子飘逸，对于中国人来说，兰花有着极其特殊的意义和重要性，深受人民的喜爱。传统春兰杂交育种，需要通过实验室无菌播种培养，并进行室外种植达到开花才能确定杂交后代形状是否优良，从授粉、出苗到开花、大规模种植至少需要10年的时间，具有研发周期长，投入高，产出低等缺陷，难以满意快速转变的市场需求。此外，现有诱导根状茎开花存在花芽诱导率过低以及正常花率过低的问题。

技术实现思路

1、(一)解决的技术问题

2、针对现有技术的不足，本发明提供了一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，直接促进春兰试管苗根状茎从营养生长转入生殖生长阶段，诱导成花，提前确定杂交后代形状，大大缩短了传统春兰育种周期，提升花芽的诱导率和花率，解决了上述背景技术中提出的问题。

3、(二)技术方案

4、为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：

5、根据本发明的第一方面，提供了一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，包括以下步骤：

6、(1)无菌萌发获取根状茎：准备无菌的春兰蒴果的种子均匀分散的接种于萌发培养基中封口，将接种后的萌发培养基移入培养室中培养，获取0.5cm的根状茎，所述萌发培养液为：1/2ms+0.5mg/l 6-ba+1.5mg/l naa+1g/l活性碳+30g/l蔗糖，ph为5.5；

7、(2)根状茎增殖：将步骤(1)获得的根状茎接种到增殖培养基中培养，获取2～8cm的健壮根状茎，所述增殖培养基为：ms+1.5mg/l 6-ba+0.2mg/lnaa+蛋白胨+10％椰汁，ph为5.8；

8、(3)根状茎花芽诱导：将步骤(2)获得的健壮根状茎接种到花芽诱导培养基中培养45天，使健壮根状茎上生长明显花苞，所述花芽诱导培养基为：ms+8mg/l 6-ba+0.02mg/lnaa+0.05mg/l tdz+50g/l蔗糖+7.5g/l琼脂+0.02g/l活性炭，ph为5.8；

9、(4)根状茎成花培养：将步骤(3)中获得的生长有花苞的根状茎接种到成花培养基中，培养15～25天，形成完全形态的花，所述成花培养基为1/2ms+(1.5～3mg/l)6-ba+(0.1～0.5mg/l)naa+30g/l糖+5％椰汁，ph为5.5。

10、优选的，所述步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)和步骤(4)中的培养条件均为：温度为24～26℃，光强为1500～2000lx，相对湿度为65～80％，每天光照16h。

11、优选的，步骤(1)中，所述无菌的春兰蒴果的种子的准备包括以下步骤：采用无菌水将春兰蒴果洗净，首先置于75％乙醇中静置10s后用无菌水清洗3次，然后再置于0.1％次氯酸钠中浸泡15～20min后用无菌水清洗3次，最后用0.1％次氯酸钠中浸泡3～4min后用无菌水清洗3次。

12、优选的，所述春兰蒴果选自成熟未开裂前采收的春兰蒴果。

13、(三)有益效果

14、本发明提供了一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法。具备以下有益效果：

15、(1)本方案提供的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，通过培养基中基液的调配，使春兰根状茎从营养生长直接过渡到生殖生长阶段，自春兰种子萌发到开花，只需可以在较短的时间内促使春兰开花只需一年左右，能够更快的评估兰花的形状，大大缩短了传统春兰的育种周期，提高育种效率。

16、(2)本方案提供的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，通过调配花芽诱导培养基中的naa和tdz的浓度，使春兰试管苗根状茎花芽诱导率提高至18％以上。

17、(3)本方案提供的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，通过调配成花培养基中6-ba和naa的浓度，使春兰试管苗根状茎的成花率提高至69％以上。

技术特征：

1.一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，其特征在于：所述步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)和步骤(4)中的培养条件均为：温度为24～26℃，光强为1500～2000lx，相对湿度为65～80％，每天光照16h。

3.根据权利要求1所述的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，其特征在于：步骤(1)中，采用无菌水将春兰蒴果洗净，首先置于75％乙醇中静置10s后用无菌水清洗3次，然后再置于0.1％次氯酸钠中浸泡15～20min后用无菌水清洗3次，最后用0.1％次氯酸钠中浸泡3～4min后用无菌水清洗3次。

4.根据权利要求3所述的一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法，其特征在于：所述春兰蒴果选自成熟未开裂前采收的春兰蒴果。

技术总结
本发明提供一种诱导春兰试管苗根状茎开花的方法。属于植物组织培养技术领域，具体步骤为：将种子取出接种于萌发培养基中培养210天获得根状茎；再将根状茎置于增殖培养基中培养成健壮根状茎，然后再将健壮根状茎接种到花芽诱导培养基中，诱导形成花苞，最后将花苞接种到成花培养基中，培养20天至花苞明显彭大，形成完全形态的花。本发明采用的方法直接促进春兰试管苗根状茎从营养生长转入生殖生长阶段，诱导成花，提前确定杂交后代形状，大大缩短了传统春兰育种周期，通过调控花芽诱导培养基和成花培养基中各组分的浓度，提升了花芽的诱导率和花率。

技术研发人员：智永祺,王森,王孙杰,赵虎,魏强,傅博,王丽丽
受保护的技术使用者：绍兴市农业科学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/10/21