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一种红花荷组培苗快速繁育方法与流程

花匠小妙招
2024-12-15 21:09

技术领域
本发明涉及一种红花荷组培苗快速繁育方法，属于生物工程技术领域。
技术背景
红花荷(学名：RhodoleiachampioniiHook.f.)：金缕梅科红花荷属常绿乔木，高可达12
米，红花荷多被广泛种植作观赏用途。红花荷的花形像吊钟，而且体积颇大，所以又名“吊
钟王”。但红花荷结实少，繁育困难，而且难以规模化的保持优良性状繁育。因此，开发
一种红花荷组培苗快速繁育方法显得很有必要。

技术实现要素：

本发明所要解决的问题是使红花荷组培苗快速繁育方法。
本发明是通过以下方案来实现的：
一种红花荷组培苗快速繁育方法，按以下步骤进行操作：
(1)种子采摘：种子10至11月上旬成熟，果熟时由灰青色转为黄绿色，及时采收，采回
后晾至果壳开裂，筛取种子，进行干藏；
(2)种子催芽处理及播种：用质量浓度为0.1-0.5％的高锰酸钾溶液浸泡种子30-60分钟，
自来水洗净，用40-50℃热水浸种，自然冷却后，再换自来水浸泡24-48小时，自来水洗净
后放在催芽机中25-30℃催芽2-5天，催芽后，每个育苗托盘播种5-10g种子，使育苗托盘内
的种子均匀；
(3)外植体的预处理：待红花荷催芽后幼苗高度在3-5cm时，以幼苗的顶芽作为外植体，
外植体在流水下冲洗1～3h，浸泡于质量浓度为3％～5％洗衣粉溶液5～10分钟后用软毛刷
洗外植体，再用自来水以滴水的形式冲洗60～90min，用蒸馏水冲洗3-5次，于超净工作
台中以质量浓度为75％～80％乙醇溶液浸泡20～60s，无菌水冲洗3～5次，再用含有质量
浓度0.1～0.5％升汞溶液消毒5～15min，无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分，
得到预处理的外植体，备用；
(4)诱导培养：将经步骤(3)预处理的外植体的顶芽剪成约1.0cm的茎段并接种到诱导
培养基进行丛生芽诱导培养，接种后每天置于光照强度为1000～2000lx，培养温度为23～
25℃，空气相对湿度为75％～80％的条件下光照12～14小时，培养28-35天，得到诱导培养
的丛生芽；
(5)丛生芽增殖：将步骤(4)诱导培养得到的丛生芽接种到增殖培养基进行不定芽增殖

培养，接种后每天置于光照强度为1000～2000lx，培养温度为23～25℃，空气相对湿度为
75％～80％的条件下光照12～14小时，培养38-45天，得到增殖植株；
(6)生根培养：将步骤(5)增殖植株从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根，
接种后每天置于光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为23～25℃，空气相对湿度为
75％～80％的条件下光照12～14小时，培养7-12天，得到生根的植株；
(7)炼苗移栽：将生根培养的红花荷瓶苗进行在室外炼苗15-25天，然后洗去附着于苗根
系上的培养基，在1000倍的多菌灵溶液中浸泡5～10min，移栽至容器袋中进行培养，即
可完成红花荷组培苗的快速繁育。
所述的步骤(4)中诱导培养基含有MS100份，0.5～1.0mg/LNAA1-5份，2.0～4.0mg/L
6-BA3-8份，1.0～3.0mg/LKT0.5-5份，1.0g/LAC10-15份，30g/L蔗糖5-15份，6.0g/L
琼脂20-30份，质量分数为20-30％的聚丙烯酸2-8份，经混合配置后，使其pH为4-7。
进一步优选为诱导培养基含有MS100份，0.8mg/LNAA4份，3.2mg/L6-BA6份，
2.8mg/LKT5份，1.0g/LAC12份，30g/L蔗糖12份，6.0g/L琼脂25份，质量分数为20-30％
的聚丙烯酸7份，经混合配置后，使其pH为5.8。
所述的步骤(5)中增殖培养基含有MS100份，0.1～0.5mg/LNAA4-10份，2.0～4.0mg/L
6-BA12-15份，1.0～3.0mg/LKT6-10份，1.0g/LAC3-7份，30g/L蔗糖5-15份，6.0g/L琼
脂20-30份，质量分数为10-20％的聚γ谷氨酸3-7份，经混合配置后，使其pH为4-7。
进一步优选为增殖培养基含有MS100份，0.35mg/LNAA5份，3.5mg/L6-BA12份，
2.5mg/LKT8.5份，1.0g/LAC5.5份，30g/L蔗糖10份，6.0g/L琼脂30份，质量分数为12.5％
的聚γ谷氨酸5.5份，经混合配置后，使其pH为5.8。
所述的步骤(6)中生根培养基含有MS25份，0.1～1.0mg/LNAA4-10份，1.0～2.0mg/L
IBA12-15份，30g/L蔗糖5-15份，6.0g/L琼脂20-30份，2.5-5.5g/L的硫脲5-10份，经混合
配置后，使其pH为4-7。
进一步优选为生根培养基含有MS25份，0.55mg/LNAA6.5份，1.8mg/LIBA12份，
30g/L蔗糖15份，6.0g/L琼脂30份，4g/L的硫脲6份，经混合配置后，使其pH为5.8。
本申请采用在幼苗期间选育，并以幼苗的顶芽为外植体，建立了红花荷的组织培养快
速繁殖技术体系。
附图说明
图1为红花荷组培继代苗生长图。
图2为a为红花荷组培苗生根的苗部生长图；b为红花荷组培苗生根的根部生长图。
图3为红花荷组培苗移栽20天生长图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明。
实施例1：一种红花荷组培苗快速繁育方法
(1)红花荷母树选优：根据树枝分叉离地高度、头状花序长短、花序柄长、花瓣形状、
花色、花期等性状筛选优良单株；
(2)种子采摘：种子10至11月上旬成熟，果熟时由灰青色转为黄绿色，及时采收。采回
后晾至果壳开裂，筛取种子，进行干藏；
(3)种子催芽处理及播种：播种前用0.35％的高锰酸钾溶液浸泡种子40分钟，清水洗净，
用48℃热水浸种，自然冷却后，再换水浸泡30小时，清水洗净后放在催芽机中30℃催芽3
天；催芽后，每个育苗托盘播种8g种子(每个育苗托盘0.25m2)，保持育苗托盘内的种子
均匀；
(4)幼苗选育：幼苗高度在3-5cm时，根据苗高、地径、叶片数量、抗病虫害程度等指
标选择优势苗，并以优势苗的顶芽作为外植体；
(5)外植体的处理：外植体在流水下冲洗2h，浸泡于3％洗衣粉溶液5～10分钟，用软毛
刷洗外植体，再用自来水以滴水的形式冲洗70min，用蒸馏水冲洗3次，于超净工作台中
以75％乙醇溶液浸泡40s，无菌水冲洗5次，再用含有质量浓度0.1％升汞溶液消毒10min，
无菌水冲洗3～5次后用无菌滤纸吸干表面的水分备用；
(6)诱导培养：将经步骤(5)处理后的顶芽剪成约1.0cm的茎段并接种到诱导培养基进
行丛生芽诱导培养,接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为
25℃，空气相对湿度为75％的条件下培养；所述的诱导培养基为：MS100mL，0.8mg/LNAA
4mL，3.2mg/L6-BA6mL，2.8mg/LKT5mL，1.0g/LAC12mL，30g/L蔗糖12mL，6.0g/L
琼脂25mL，质量分数为20-30％的聚丙烯酸7mL，经混合配置后，使其pH为5.8。培养30
天后统计诱导情况，诱导率平均可达81.8％。
(7)丛生芽增殖：将步骤(6)诱导培养得到丛生芽接种到增殖培养基进行不定芽增殖培
养,接种后置于每天光照12小时，光照强度为2000lx，置于培养温度为25℃，空气相对
湿度为75％的条件下培养；所述的增殖培养基为：MS100mL，0.35mg/LNAA5mL，3.5mg/L
6-BA12mL，2.5mg/LKT8.5mL，1.0g/LAC5.5mL，30g/L蔗糖10mL，6.0g/L琼脂30mL，
质量分数为12.5％的聚γ谷氨酸5.5mL，经混合配置后，使其pH为5.8。培养40天后统计
增殖倍数平均可达3.0倍。
(8)生根培养：将步骤(7)增殖中获得的植株(无根嫩梢2～3cm)从基部切下并接种
至生根培养基中进行诱导生根,接种后置于每天光照12小时，光照强度为3000lx，置于培

养温度为25℃，空气相对湿度为75％的条件下培养10天；所述的生根培养基为：MS25mL，
0.55mg/LNAA6.5mL，1.8mg/LIBA12mL，30g/L蔗糖15mL，6.0g/L琼脂30mL，4g/L的
硫脲6mL，经混合配置后，使其pH为5.8。
(9)炼苗移栽：将生根培养10天的红花荷瓶苗进行炼苗20天统计生根率，然后洗去附着
于苗根系上的培养基，在1000倍的多菌灵溶液中浸泡5～10min，然后移栽至容器袋中进
行培养，移栽20天后统计成活率。经统计：生根培养10天的红花荷瓶苗进行炼苗20天后生
根率平均可达95.8％，移栽20天后统计成活率平均可达95.2％。采用本发明的技术方案培
养时间短，稳定性高，不带来病菌，保持了红花荷原有的生长特性。