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包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟提取物的皮肤保护用化妆品组合物的制作方法

花匠小妙招
2024-12-20 08:38

1.本发明涉及包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物作为有效成分的皮肤保护用化妆品组合物，更详细地，涉及表现出皮肤保湿、皮肤镇静、抗氧化、美白及抗炎活性效果的皮肤保护用组合物。

背景技术：

2.通常，皮肤由表皮、真皮、皮下脂肪组织构成，可以在物理、化学刺激等外部环境中保护皮肤。但是，若直接暴露于过度的紫外线或污染物质等外部环境中，则会诱发红斑、浮肿、瘙痒等皮肤刺激及炎症反应。这样的皮肤过敏不仅在美观上成为问题，炎症反应过程中生成的物质还伴随引起色素沉着，发生促进与皮肤弹性相关的胶原蛋白(collagen)、弹性蛋白(elastin)、透明质酸(hyaluronic acid)、粘多糖类(mucopolysaccharide)等的崩溃等的皮肤损伤。
3.表皮层从外向内依次形成角质层、颗粒层、棘皮层、基底层的结构，角质层位于皮肤最外部来保护皮肤内部，就像墙砖一样保护着皮肤。
4.尤其，有报告说角质细胞之间的细胞间脂质起到灰泥一样的作用，从而构成皮肤屏障(j.invest.dermatol.80(suppl.),44-49.1983)。
5.通过这种作用，使在正常皮肤中的表皮的角质层含有约10％～20％的水分，从而使构成皮肤的细胞与固有的蛋白质能够发挥正常功能。
6.尤其，角质层的表面被从皮脂腺中分泌的皮脂与从汗腺中分泌的汗液形成的薄薄的天然保护膜覆盖，可以预防水分的蒸发。
7.相反，若表皮层的水分保持能力丧失，则角质层的水分降低至不足10％，皮肤的弹性和柔韧性消失，皮肤变得干燥粗糙。这诱发皮肤的干燥化，成为炎症和过敏的病因，使角质形成细胞和成纤维细胞的活性减少。不仅不能保持正常的皮肤保湿，还丧失皮肤弹性和健康。
8.并且，随着水分保有力的降低引起皮肤弹性的减少，使支撑皮肤的毛孔壁的胶原蛋白和弹性蛋白的弹性减少，使缩紧毛孔的力变弱而使毛孔扩张。随着毛孔扩张和干燥使皮肤屏障失效，细菌侵入而发生炎症，因此，保持皮肤角质层的水分含量是非常重要的。
9.随着皮肤老化进行的弹性下降现象，是由于紫外线引起的光老化、年龄的增长及绝经等内因、遗传因素、环境因素引起的现象使成纤维细胞的分裂减少、胶原蛋白合成的减少、mmp生成的增加而引起的皮肤弹性的减少。尤其，在40岁前后，由于激素均衡被破坏，在细胞再生能力、胶原蛋白合成能力、皮肤保湿中起到重要作用的皮肤脂质的生成能力也大大降低。随着消费者对外表年轻的要求和对化妆品的期望的日益增加，有关于以改善上述皮肤弹性下降为目的的化妆品的研究也在活跃地进行着。
10.现在，为了防止皮肤内水分的消失，使用作为凡士林、羊毛脂、可可脂、矿物油、荷荷巴油、乳木果油以及硅胶等疏水性物质的闭塞剂(occlusive agent)，为了制备化妆品，
现有技术使用十二烷基硫酸钠(sodium lauryl sulfate)、二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide)、巴豆油(croton oil)及氢氧化钠等20到50多种的普通原料。将上述原料加入产品，不仅刺激皮肤，还伴有瘙痒症、过敏、皮肤炎症等免疫反应，角质层的经皮水分损失(transepidemal water loss)也增加，从而成为诱发皮肤炎症的病因。
11.因此，由于化妆品组合物所包含的以往的保湿剂具有在引起刺激和与炎症相伴的过敏的副作用，因此在皮肤保湿效果、保护效果等方面具有局限性。
12.为了弥补上述问题，向化妆品中加入具有与皮脂相似结构的成分或者天然保湿因子(nmf)、羟基(-oh)为3个的三元醇等多元醇等以起到保湿剂的作用。
13.然而，由于多元醇固有的黏性和物性，具有过于黏稠或感觉黏糊糊的缺点，此外，由于随着地理或环境的改变引起的温度和湿度的影响，还有粘稠或感到不适的使用感，反而会时而发生被多元醇夺走水分的问题。
14.为了解决上述问题，近来正活跃地进行着如下化妆品的研究开发，即，将源自动植物乃至微生物的天然来源的生理活性材料导入化妆品来保持甚至提高皮肤自身固有的防御能力，从而抑制皮肤内的水分消失并增加弹性及保湿能力。
15.因此，本研究致力于从现有的植物提取物中开发具有皮肤保湿、皮肤镇静、抗氧化及抗炎效果的生理活性材料以及用于水分保持的稳定的化妆品。
16.现有技术文献
17.专利文献
18.专利文献0001：韩国公开专利公报第10-2016-0036120号(2016年04月04日公开)，“包含由稻、奇亚籽、绿豆、燕麦、昆诺阿藜、薏仁、丝蛋白构成的提取物作为有效成分的化妆品组合物”。
19.专利文献0002：韩国授权专利公报第10-2193209号(2020年12月18日公告)，“包含芦苇提取物作为有效成分的皮肤美白用化妆品组合物”。
20.专利文献0003：韩国公开专利公报第10-2016-0045289号(2016年04月27公开)，“包含玉米须发酵液的皮肤美白用化妆品组合物”。
21.专利文献0004：韩国公开专利公报第10-2011-0016536号(2011年02月18日公开)，“包含欧锦葵提取物或者欧锦葵提取物与北美乔松树皮提取物的皮肤美白化妆品组合物”。
22.专利文献0005：韩国授权专利公报第10-0614467号(2006年08月25日公告)，“抑制黑色素生成的包含泽漆、牡丹皮、芦荟混合提取物的美白化妆品组合物”。

技术实现要素：

23.要解决的技术问题
24.为了解决上述问题，本发明的目的在于提供如下化妆品组合物：包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟混合提取物作为有效成分，具有皮肤保湿、皮肤镇静、抗氧化、美白及抗炎效果。
25.解决问题的技术方案
26.为了实现上述目的，本发明提供包含混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟并提取混合提取物作为有效成分的具有皮肤保湿、镇静、抗氧化及美白效果的化妆品组合物。
27.并且，上述稻提取物∶芦苇提取物∶欧锦葵提取物∶芦荟提取物的混合重量比为0.1
～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0。
28.并且，上述提取物使用选自由水、碳原子数为1个至4个的无水或含水低级醇类、乙酸乙酯、甘油及乙二醇组成的组中的任一种或者混合两种以上的提取溶剂来提取。
29.并且，上述化妆品组合物配制为化妆水、护肤乳、乳液、面霜、粉底、精华、凝胶、面膜、乳化型防晒霜、乳化型粉底、乳化型妆前乳、油饼型粉底、干湿两用粉饼或粉饼的剂型。
30.发明的有益效果
31.本发明的包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟混合提取物的具有皮肤保湿、镇静、抗氧化、美白及抗炎活性的皮肤保护用化妆品组合物提供皮肤保湿、镇静、抗氧化、美白及抗炎效果。
附图说明
32.图1为示出实施例1至实施例7的细胞毒性的柱状图。
33.图2为有关比较例1、比较例2以及制备例1至制备例7的皮肤保湿改善效果的柱状图。
34.图3为有关比较例1、比较例2以及制备例1至制备例7的经皮水分损失量评估的柱状图。
35.图4为示出比较例1、比较例2以及制备例1至制备例7的皮肤镇静效果的柱状图。
36.图5为示出实施例1至实施例7的自由基消除效果的柱状图。
37.图6及图7为示出实施例1至实施例7的皮肤美白效果的柱状图。
38.图8为示出实施例1至实施例7的抗炎效果的柱状图。
具体实施方式
39.以下有关本发明的详细说明为能够实施本发明的实施例，参照例示相关实施例的附图。这些实施例的详细说明是为使本发明所属技术领域的普通技术人员充分实施本发明。应该理解的是，本发明的多种实施例虽互不相同，但相互间没有排他的必要。例如，在此记载的与一实施例相关的特定现象、结构及特性在不脱离本发明的思想及范围的情况下，可以实现为其他实施例。并且，应该理解的是，在不脱离本发明的思想及范围的情况下，可以变更所记载的各实施例中的个别结构要素的位置或配置。
40.因此，后述的详细说明不应理解为限制的含义，若适当说明，则本发明的范围应通过随附的发明要求保护范围及与之同等的所有范围来限定。附图中相似的附图标记在诸多方面是指相同或相似的功能。
41.本发明所使用的术语虽然在考虑本发明中的功能的情况下尽可能地选择当前广泛使用的普通术语，但会根据本发明所属技术领域的普通技术人员的意图或判例、新技术的出现等而不同。并且，在特定情况下，还有申请人任意选择的术语，在此情况下，将在相关的说明书部分中详细记载其含义。因此，本发明所使用的术语应以其本身所具有的含义及本发明的全部内容为基础来定义，而不应仅以该术语的名称来理解。
42.在本发明中，当提及某部分“包含”某结构要素时，若无特别反对的记载，则不表示排除其他结构要素，而是表示还可以包含其他结构要素。
43.本发明提供包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟作为有效成分并具有皮肤保湿、
镇静、抗氧化、美白及抗炎效果的化妆品组合物。
44.上述“稻(oryza sativa(rice)”为属于禾本科(gramineae)的一年生草本植物，广泛分布于亚洲全域(郑乐勋等，韩国应用生命化学会，2014，26：112-118)。有报告说，稻含有膳食纤维、植酸(phytic acid)、阿魏酸(ferulic acid)、多酚(polyphenolics)、维生素(vitamins)、γ-谷维素(γ-oryzanol)等功能性成分，作为天然抗氧化物质，防止细胞膜内氧化，降低血中胆固醇，对慢性病的预防有效(徐先静等，韩国食品营养科学会，2008，37(2)：129-135)。
45.上述“芦苇(phragmites communis)”为单子叶植物，属于禾本目禾本科，主要生长在大海附近或者江河湿地。已知芦苇的根茎中含有碳水化合物、蛋白质、脂肪及天冬酰胺，据报告，芦苇的功效有抗氧化活性和皮肤美白效果(冰东柱等，韩国食品营养学会2015，28(4)：666-675)。
46.上述“玉米须(zea mays(corn)silk)”是指玉米的副产物玉米穗，也称为玉蜀黍须、蜀黍须。玉米须包含相当量的维生素k，黄酮类化合物有maysin、apimaysinm、methoxymaysin等，尤其含有大量maysin。已知基于这些成分具有玉米螟蛉(corn earworm)的繁殖抑制活性、对肿瘤细胞株的细胞毒性效果及自由基消除活性等(金宪英等，韩国作物学会，2016，61(3)：184-190)。
47.上述“欧锦葵(malva sylvestris(mallow))”为有紫色花朵和低矮的叶子的一年生植物，在海边、湿地、江河等潮湿的地方生长。欧锦葵包含锦葵酮a(malvone a)、萘醌(naphthoquinone)、单萜(monoterpenes)、四羟基化无环二萜(tetrahydroxylated acyclic diterpense)、花青素(antocyanin)等，具有降低血浆的胆固醇、降低中性脂肪、治愈伤口、治疗炎症及抗菌效果(seyed mehdi razavi et al.,iran j basic med sci,2011,14(6)：574-579)。
48.上述“芦荟(aloe barbadensis)”属于栖息在热带地方的百合科(liliaceae)的芦荟属(aloineae)。芦荟含有脂肪酸、有机酸、黄酮类化合物等化合物，包含蒽醌、蒽酮、色酮、吡喃酮、氨基酸、维生素以及矿物质等成分，已知具有抗菌、抗氧化、抗过敏、促进胶原蛋白分解及再生、紫外线保护效果(赵恩惠等，韩国生物工学，2014，29(6)：437-442)。
49.为了赋予皮肤保湿、皮肤镇静、抗氧化、美白及抗炎效果，本发明使用含有天然保湿因子以及氨基酸、黏蛋白等天然多醣体成分等的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的提取物作为有效成分。
50.上述稻提取物、芦苇提取物、玉米须提取物、欧锦葵提取物及芦荟提取物在皮肤保湿、皮肤镇静、抗氧化、美白及抗炎等方面具有某种程度的活性效果，在本发明中，发现混合上述原物中的两种以上的混合物，优选地，混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟并提取的组合物与单独提取各原物的组合物相比，具有优秀的协同增效效果。
51.根据本发明的优选实例，将本发明的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟分别以等量混合来制备的混合物的比例可以包括下述比例。
52.优选地，上述混合物为以0.1～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0∶0.1～40.0的重量比混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来构成。
53.另一方面，上述混合物以混合粉碎稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟获得的原物粉碎物的混合物为更适当。
54.优选地，本发明的混合提取物为使用选自由水、碳原子数为1个至4个的无水或含水低级醇类、乙酸乙酯、甘油及乙二醇组成的组中的任一种或者混合两种以上的提取溶剂来提取混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合物的提取物。
55.本发明的混合提取物以如下方法制备为更适当：在60℃～90℃的条件下将混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合物回流提取3次，每次2小时～6小时，在室温下冷浸，使用过滤纸过滤后在30℃～70℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备。
56.在本发明的包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟混合提取物作为有效成分的具有皮肤保湿、镇静、抗氧化、美白及抗炎效果的化妆品组合物中，在最终形态中至少包含0.001重量百分比至30.0重量百分比的上述混合提取物，更优选地，包含0.01重量百分比至20.0重量百分比的上述混合提取物，更加优选地，包含0.1重量百分比至10.0重量百分比的上述混合提取物。
57.若上述混合提取物的含量小于0.001重量百分比，则不显出皮肤保湿效果，若含量为30重量百分比以上，则其效果增加得不大，会发生剂型的安全性及稳定性的问题，并且，经济性也相应地降低。
58.本发明的皮肤保湿用化妆品组合物是根据皮肤科学基础资料的组合，当使用分别混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来提取的混合提取物作为有效成分时，在皮肤保湿方面可以实质上实现长期的功效。
59.本发明的化妆品组合物所包含的成分除上述本发明的分别提取稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟并混合来制备的混合物外，还包含化妆品组合物通常使用的成分，例如，包含抗氧化剂、稳定剂、溶解剂、维生素、颜料、色素及香料之类的通常的辅助剂，还有载体。
60.本发明的化妆品组合物可以制备为本发明所属技术领域中通常制备的任意剂型，例如，可以配制为溶液、悬浮液、乳浊液、隔离霜、凝胶、面霜、乳液、粉剂、香皂、含表面活性剂的洗剂、油剂、粉状粉底、乳浊液粉底、蜡粉底及喷剂等，但不限定于此。更详细地，可以制备为柔肤化妆水、营养化妆水、营养霜、按摩霜、精华素、面膜、眼霜、洁面霜、洁面泡沫、卸妆水、面膜、喷剂或粉剂等剂型。
61.在本发明的剂型为隔离霜、面霜或凝胶的情况下，可以在动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅、膨润土、二氧化硅、滑石或氧化锌中选择一种以上来用作载体成分。
62.在本发明的剂型为粉剂或喷剂的情况下，可以使用乳糖、滑石粉、二氧化硅、氢氧化铝、硅酸钙或聚酰胺粉末作为载体成分，尤其是在喷剂的情况下，还可以包含氯氟烃、丙烷/丁烷或二甲醚之类的促进剂。
63.在本发明的剂型为溶液或悬浮液的情况下，使用溶剂、溶解剂或者乳浊剂作为载体成分，例如，可以选择水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、丁二醇、1,3-丁二醇油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、丙三醇、甘油、脂肪族酯、苯氧乙醇、三乙醇胺、聚乙二醇、蜂蜡、聚山梨醇酯60、脱水山梨糖醇倍半油酸酯、石蜡、脱水山梨糖醇硬脂酸酯、亲油型单脂肪酸甘油酯、硬脂酸、硬脂酸甘油酯/peg-400硬脂酸酯、羧基聚合物、谷甾醇、聚甘油2-油酸酯、神经酰胺、胆固醇、硬脂醇聚醚-4(steareth-4)、磷酸二鲸蜡酯、澳洲坚果油、羧乙烯基聚合物、黄原胶或者山梨糖醇的脂肪酸酯中的一种以上来使用。
64.在本发明的剂型为悬浮液的情况下，可以选择水、乙醇、甘油、丁二醇或丙二醇之
类的液体稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇酯及聚氧乙烯山梨糖醇酯之类的悬浮剂、微晶纤维素、羟乙基纤维素、透明质酸钠、苯氧乙醇、偏氢氧化铝、膨润土、硬脂酸、鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、山梨糖醇倍半油酸酯、单硬脂酸甘油酯/硬脂酸甘油酯/聚氧乙烯硬脂酸酯、蜡、石蜡、角鲨烷、辛酸/癸酸甘油三酯、羧乙烯基聚合物、三乙醇胺、琼脂或黄芪胶中的一种以上来用作载体成分。
65.在本发明的剂型为含表面活性剂的洗剂的情况下，可以选择脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸盐、咪唑啉衍生物、牛磺酸甲酯、肌氨酸盐、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基氨基甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物或乙氧基化甘油脂肪酸酯中的一种以上作为载体成分。
66.并且，本发明的一实施例的化妆品组合物的使用功效可以根据个人的皮肤状态、健康状况及外部环境条件进行适当的调节。
67.以下，通过实施例及实验例详细说明本发明以帮助理解本发明。然而，下述实施例及实验例仅为便于理解本发明而提供，而不应解释为以此来限定本发明的技术水平与范围。本发明的实施例及实验例是为向本发明所属技术领域的普通技术人员更为完整的说明本发明而提供的。
68.实施例1.制备稻提取物
69.在流动的纯水中清洗稻并干燥后，全部粉碎后使用100目的过滤网过滤来确保只有细微的粉碎物。向50％的乙醇加入稻粉碎物以使浓度为50g/l后，回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备稻提取物。
70.实施例2.制备芦苇提取物
71.在流动的纯水中清洗芦苇并干燥后，全部粉碎后使用100目的过滤网过滤来确保只有细微的粉碎物。向50％的乙醇加入芦苇粉碎物以使浓度为50g/l后，回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备芦苇提取物。
72.实施例3.制备玉米须提取物
73.在流动的纯水中清洗玉米须并干燥后，全部粉碎后使用100目的过滤网过滤来确保只有细微的粉碎物。向50％的乙醇加入玉米须粉碎物以使浓度为50g/l后，回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备玉米须提取物。
74.实施例4.制备欧锦葵提取物
75.在流动的纯水中清洗欧锦葵并干燥后，全部粉碎后使用100目的过滤网过滤来确保只有细微的粉碎物。向50％的乙醇加入欧锦葵粉碎物以使浓度为50g/l后，回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备欧锦葵提取物。
76.实施例5.制备芦荟提取物
77.在流动的纯水中清洗芦荟并干燥后，全部粉碎后使用100目的过滤网过滤来确保只有细微的粉碎物。向1kg的50％的乙醇水溶液加入芦荟粉碎物以使浓度为50g/l后，在60℃～90℃的条件下回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后
在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备芦荟提取物。
78.实施例6.混合提取物a
79.以与实施例1至实施例5相同的方式，向50g的将分别粉碎稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来获得的原物粉碎物以1∶1∶1∶1∶1的重量比混合的混合物加入1kg的50％的乙醇水溶液后，在60℃～90℃的条件下回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备混合提取物。
80.实施例7.混合提取物b
81.以与实施例1至实施例5相同的方式，向50g的将分别粉碎稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来获得的原物粉碎物以3.2∶2.5∶2.5∶5.0∶3.0的重量比混合的混合物加入1kg的50％的乙醇水溶液后，在60℃～90℃的条件下回流提取3次，每次4小时，在室温下冷浸，使用whatman#3过滤纸过滤后在50℃以下的温度下减压浓缩及冷冻干燥来制备混合提取物。
82.制备例1至制备例7及比较例1至比较例2.制备化妆品组合物
83.将上述实施例1至实施例5的稻提取物、芦苇提取物、玉米须提取物、欧锦葵提取物、芦荟提取物及实施例6至实施例7的混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟并提取的混合提取物a、混合提取物b制备为制备例1至制备例7，如下述表1所示。
84.并且，为了比较制备例1至制备例7，制备了不包含实施例1至实施例7中任一种的化妆品组合物比较例1至比较例2。
85.表1
86.[0087][0088]
实验例1.细胞存活率试验：mtt assay
[0089]
1)实验方法
[0090]
确认了上述实施例1至实施例7中制备的试样给细胞增殖带来的影响。为了确认细胞增殖及毒性，按照下述方法进行实验。
[0091]
将培养中的细胞3t3(成纤维细胞系(fibroblast cell line))以5000细胞/孔的量分株于96孔微孔板后，在恒温槽中培养30分钟，分别以0.0008、0.0016、0.0048、0.008、0.0112、0.0114(％，w/v)的不同浓度加入试样后，培养72小时。
[0092]
培养72小时后，加入噻唑啉蓝(thiazoline blue)后再培养4小时。将培养液全部清除后向微孔板的各孔加入终止液并搅拌5分钟后，在570nm的波长下测量吸光度。对照组加入与试样加入量相同量的10％的胎牛血清(fetal bovine serum，fbs)培养基，在细胞生
长的最佳条件下进行同步培养，设对照组的细胞增殖为100％来计算加入试样的实验组的细胞增值率。
[0093]
细胞增殖效果通过下述计算式1来计算，结果如下述表2所示。
[0094]
数学式1
[0095][0096]
表2
[0097][0098]
如上述表2所示，确认到上述实施例1至实施例7制备的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟提取物及混合物a、混合物b在所有浓度中都没有细胞毒性。
[0099]
实验例2.皮肤保湿改善效果
[0100]
1)实验方法
[0101]
以25名受试者(25岁-50岁的男性及女性)为对象，以一天2次的方式，在受试者的面部两侧的面颊及全部分别涂敷按照表1制备的制备例1至制备例7以及比较例1至比较例2的化妆品剂型共4周时间，使用皮肤水分检测仪corneometer cm 820(courage+khazaka公司，德国)检测涂敷前、涂敷2周后以及涂敷4周后的皮肤保湿改善状态，单位以仪器赋予的任意单位(arbitrary unit，au)来表示，检测值越高，表示皮肤表面的水分量越高。
[0102]
2)实验结果
[0103]
皮肤保湿改善相关的实验结果如下述表3所示。
[0104]
表3
[0105][0106]
如上述表3所示，检测了制备例1至制备例7及比较例1至比较例2制备的化妆品组合物的保湿效果，结果可以确认，稻提取物、芦苇提取物、玉米须提取物、欧锦葵提取物、芦荟提取物及混合它们并提取的制备例1至制备例7的保湿力比比较例1至比较例2高。尤其可以确认，制备例7的混合提取物b比制备例1至制备例6的提取原料更为优异地提高了保湿效果。
[0107]
实验例3.评估经皮水分损失量
[0108]
1)实验方法
[0109]
以25名受试者(20多岁～50多岁的男性及女性)为对象，将上臂部位设定为检测部位，以纵向2
×
2cm2的大小表示为试验部位后检测表1的制备例1至制备例7、比较例1至比较例2的化妆品组合物。在试验部位涂敷化妆品组合物后仔细揉搓，使用tewameter tm210(c+k eletronic gmhh.公司，德国)测量经皮水分损失量。以涂敷前0小时的水分保有量为基准，通过测量涂敷后30分钟、涂敷后4天、涂敷后8天的水分增加率(％)来评估短期保湿效果。测量时，使探针(probe)垂直接触并保持水平60秒钟，以此方式连续测量3次经皮水分损失量。测量在恒温恒湿室以相同的方式进行，数值越高表示水分的损失越多。
[0110]
2)实验结果
[0111]
经皮水分损失量的结果如下述表4所示。
[0112]
表4
[0113][0114]
如表4所示，在8天内比较制备例1至制备例7及比较例1至比较例2的经皮水分损失量的结果可以确认，制备例7随时间的损失量改善最高。尤其可以确认，制备例7的混合提取物b比制备例1至制备例6的提取原料更为优异地提高了保湿效果。
[0115]
实验例4.对皮肤刺激物质的镇静效果
[0116]
1)实验方法
[0117]
以25名没有皮肤疾病或者过敏症状且没有过敏反应病史的20多岁～50多岁的成人男女为对象，通过人体皮肤信息实验来确认皮肤镇静效果。
[0118]
向上述制备例1至制备例7及比较例1至比较例2的化妆品和对照试样加入作为皮肤刺激物质的5％的乳酸后，分别实施皮肤斑贴试验。在进行镇静试验之前，使用70％的乙醇充分擦拭试验对象的前臂内侧后完全干燥，各使用30μg的9种化妆品进行斑贴。以斑贴的时间点为基准经过24小时后，去除贴片约30分钟后使用放大镜(microview公司)观察斑贴部位来确认有无红斑及浮肿。以下述表5的标准进行评估，根据下述数学式2计算平均皮肤反应度。结果如下述表6所示。
[0119]
表5
[0120]
标记分数皮肤反应评估标准-0无刺激无反应
±
0.5微刺激模糊或仅能感知的微微的红斑+1轻刺激境界明显的微弱的红斑++2中刺激明显的红斑+++3强刺激严重的红斑及大水泡
[0121]
数学式2
[0122]
[0123]
2)实验结果)
[0124]
皮肤镇静效果的结果如下述表6所示。
[0125]
表6
[0126][0127][0128]
通过上述表6的结果可以确认，制备例1至制备例7与对照试样相比，对通过乳酸诱导的刺激的皮肤镇静效果优秀，与之相反，在比较例1至比较例2的情况下，与对照试样没有差异。并且，比较制备例6至制备例7与制备例1至制备例5，可以确认与单独使用稻提取物、芦苇提取物、玉米须提取物、欧锦葵提取物、芦荟提取物相比，混合它们时显出协同增效效果，比较制备例6与制备例7可以确认，以与实施例7相同的比例混合的情况比以相同的比例混合的情况显出更为优秀的皮肤镇静效果。
[0129]
实验例5.确认自由基消除效果
[0130]
1)实验方法
[0131]
利用上述实施例1至实施例7的提取干燥粉末确认给自由基(free radical)消除带来的影响。为了确认给自由基(free radical)消除带来的影响，以如下所述的方法进行实验。
[0132]
使用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)法(参照：blois.m.s.nature 181,1190，1958)进行实验，1,1-二苯基-2-三硝基苯肼与槲皮素(quercetin)使用sigma公司的产品。分别将2ml的不同浓度(8ppm、16ppm、48ppm、80ppm)的实施例1至实施例7以及阳性对照组加入1ml的0.2mm 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼的甲醇溶液中并搅拌后，在室温下反应10分钟。然后，在517nm的波长下测量吸光度，在此情况下，使用纯水替代各个试样作为空白试验。
[0133]
利用下述数学式3测量自由基的变化，结果如表5所示。
[0134]
数学式3
[0135][0136]
2)实验结果
[0137]
有关自由基消除的结果如下述表7所示。
[0138]
表7
[0139][0140][0141]
如上述表7所示，可以确认实施例1至实施例7都对自由基消除有效。尤其可以确认，实施例6至实施例7的抗氧化效果比实施例1至实施例5更高，其中，实施例7的该效果最优秀。
[0142]
实验例6.阻碍酪氨酸酶活性
[0143]
1)实验方法
[0144]
酪氨酸酶(tyrosinase)活性阻碍实验采用作为用于确认相关物质的黑色素活性阻碍效果的实验的通过多巴铬(dopa chrome)比色法来测量的yagi等方法来检测。
[0145]
本实验在96孔培养板中向120μl的0.1m的磷酸缓冲液(phosphate buffer ph6.5)加入40μl的1.5mm的l-酪氨酸(l-tyrosine)溶液来制备反应溶液，向反应溶液加入10μl的试样溶液后反应5分钟后，加入10μl的蘑菇酪氨酸酶(mushroom tyrosinase)(100unit/ml)在37℃的温度下进行酶反应10分钟。经过10分钟后，使用微孔板计数仪在490nm的波长下测量反应液中生成的多巴铬。
[0146]
通过下述数学式4计算酪氨酸酶活性阻碍率，结果如下述表8所示。
[0147]
数学式4
[0148][0149]
表8
[0150][0151]
确认到实施例1至实施例7都依赖浓度地表现出阻碍酪氨酸酶活性的渐进效果，可以确认如实施例6至实施例7一样混合原物时，该效果比实施例1至实施例5增加。尤其如表8所示，以与实施例7相同的比例混合原物时，表现出该效果进一步增加的协同增效效果，从而可知对阻碍酪氨酸酶的酶活性是有效的。
[0152]
实验例7.阻碍黑色素合成
[0153]
1)实验方法
[0154]
将b16f10小鼠黑色素瘤细胞以3.5
×
105细胞/孔的浓度分株于6孔培养板并培养24小时后，分别使用α黑素细胞刺激素(α-msh，melanocyte stimulatinghormone)和不同浓度制备的实施例、制备例、比较例的试样处理各孔。培养48小时后，使用磷酸缓冲溶液(phosphate buffer saline，pbs)洗涤2次去除培养基，将附着的细胞移到e-p管后进行离心分离后获得培养细胞颗粒(pellet)。拍摄沉淀的b16f10黑色素瘤细胞的形状，在60℃的温度下使用添加有二甲基亚砜(dmso)的1n的naoh溶液溶解黑色素1小时后，向96孔培养板的每孔分株200μl后在405nm的波长下测量吸光度。
[0155]
通过下述数学式5计算黑色素合成阻碍率，结果如下述表9所示。
[0156]
数学式5
[0157]
[0158][0159]
确认到实施例1至实施例7都依赖浓度地阻碍黑色素合成。尤其确认到，当实施例6至实施例7的混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来提取时，黑色素合成抑制效果比如实施例1至实施例5那样单独使用的情况更为增加。
[0160]
实验例8.调查通过抑制no生成的抗炎症效果
[0161]
1)实验方法
[0162]
将作为小鼠巨噬细胞的raw 264.7细胞以3.5
×
105细胞/孔的浓度分株于6孔培养板并培养24小时。然后，使用含有按照表10的浓度稀释的实施例1至实施例7中制备的试样细胞培养基更换各孔的培养基。使用1μg的脂多糖(lps，lipopolysaccharide)作为刺激源处理各孔并培养24小时。每孔各取100μl的上清液移到96孔培养板，各加入100μl的griess溶液后在常温下反应10分钟，通过在540nm的波长下测量吸光度来判断no抑制效果，结果如下述表10所示。
[0163]
表10
[0164]
[0165][0166]
确认到实施例1至实施例7都依赖浓度地具有抑制no生成的功效。尤其确认到，当实施例6至实施例7的混合稻、芦苇、玉米须、欧锦葵、芦荟来提取时，抑制no生成的效果比如实施例1至实施例5那样单独使用的情况更为增加。
[0167]
以下，根据上述实验例的结果提出组合含有稻提取物、芦苇提取物、玉米须提取物、欧锦葵提取物、芦荟提取物等混合提取物的化妆品如下。
[0168]
但是，本发明的组合物不限定于下述剂型例。
[0169]
剂型例1.制备包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的化妆水
[0170]
包含上述实施例7的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的化妆品中化妆水(护肤乳、乳液)的处方例如表11所示。
[0171]
表11
[0172]
[0173][0174]
制备方法：向第11项依次加入第2、3、4、8项并搅拌溶解后，将第5项加热至60℃左右溶解并加入第10项溶解后加入第11项。最后，加入第6、7、9项后，加入第1项充分搅拌后熟成。
[0175]
剂型例2.制备包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的营养乳液
[0176]
包含上述实施例7的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的化妆品中营养乳液的处方例如表12所示。
[0177]
表12
[0178]
[0179][0180]
制备方法：混合第10、11、12、13、16项并边搅拌边加热至80℃～85℃之间后放入制备釜后，启动乳化器将第2、3、4、5、6、7、8、9、12项加热至80℃～85℃之间并溶解后进行乳化。乳化结束后，使用搅拌机边搅拌边冷却至50℃后，加入第15项冷却至45℃后加入第14项，在35℃的温度时加入第1项，冷却至25℃后熟成。
[0181]
剂型例3.制备包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的营养霜
[0182]
包含上述实施例7的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的化妆品中营养霜的处方例如表13所示。
[0183]
表13
[0184]
[0185][0186]
制备方法：混合第12、13、14、16项并边搅拌边加热至80℃～85℃之间后放入制备釜后，启动乳化器将第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11项加热至80℃～85℃之间并溶解后加入第15项并搅拌后放入制备釜中乳化。乳化结束后使用搅拌机边搅拌边冷却至35℃，加入第1项冷却至25℃后熟成。
[0187]
剂型例4.制备包含稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的精华素
[0188]
包含上述实施例7的稻、芦苇、玉米须、欧锦葵及芦荟的混合提取物的化妆品中精华素的处方例如表14所示。
[0189]
表14
[0190][0191]
[0192]
制备方法：将第2、3、4、5、6项在规定温度下均质化并称之为非离子两亲脂质。混合上述非离子两亲脂质与第7、8、14项，再放入第1项混合后在规定的温度下均质化，通过高压均质机，接着在规定的温度下慢慢加入第9项并均质化后再次通过高压均质机。然后加入第10、11、12、13项分散并稳定化后熟成。
[0193]
以上，结合附图说明了本发明，但这只是包括本发明要旨在内的多种实施方式中的一个实施例而已，其目的在于，使本发明所属技术领域的普通技术人员能够轻松实施本发明，因此本发明不限定于上述说明的实施例。因此，本发明的保护范围应由随附的发明要求保护范围解释，在不脱离本发明要旨的范围内，通过变更、置换、替代等方式在与之同等的范围内的所有技术思想都包括在本发明的权力内。并且，应该明确的是，为了更加明确说明，附图中的一部分结构以比实际结构夸大或缩小的方式提供。