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一种白及种子的液体快速繁殖方法

花匠小妙招
2025-01-20 16:32

，如无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0026]MS为现有常规的标准培养基，1/2MS就是指大量元素减半，其余元素与MS相同。
[0027]实施例1:
(I)外植体的选择与消毒:选取安徽紫花白及的成熟果荚(9月中旬至11月中旬)为外植体，用洗衣粉将表面污垢洗净，在超净台内，用75%乙醇消毒2分钟，倾出乙醇后用无菌水清洗3次。用0.1%升汞溶液消毒25分钟，无菌水清洗3次。污染率小于5%。
[0028](2)种子的萌发:将白及种子均匀播撒在1/2MS液体培养基表面。每瓶300颗种子，温度26°C，光照强度3000Lx，光照时间16小时/天，培养时间60天。种子萌发率大于90%。
[0029](3 )成苗培养:将漂浮的白及小苗从母瓶中转移到MS+2.0mg/L 6_BA (市售)+1.0mg/L IAA (市售)+香蕉泥(市售)80g/L的固体培养基中(pH5.6-6.4)，培养温度28°C，光照强度3000Lx，光照时间12小时/天，培养时间20天。
[0030](4)炼苗有驯化:瓶苗在遮阴大棚中炼苗30天，控制昼夜温度在10-35°C之间，然后洗净培养基，多菌灵浸泡5分钟后，阴凉处晾干16小时。种植到人工介质中，人工介质由粗刨花、农家肥、营养土、蛭石或珍珠岩配比而成。具有分为三层，最底层铺一层刨花，中间铺农家肥6cm，最上面一层由营养土:輕石(2:1)混勾而成，厚度在2cm左右。驯化温度在10-40°C之间，湿度80±5%。成活率达到95%以上。
[0031]实施例2: (I)外植体的选择与消毒:选取安徽紫花白及的成熟果荚(9月中旬至11月中旬)为外植体，用洗衣粉将表面污垢洗净，在超净台内，用75%乙醇消毒3分钟，倾出乙醇后用无菌水清洗3次。用0.1%升汞溶液消毒20分钟，无菌水清洗5次。污染率小于5%。
[0032](2)种子的萌发:将白及种子均匀播撒在1/2MS液体培养基表面。每瓶400颗种子，温度26°C，光照强度3500Lx，光照时间14小时/天，培养时间45天。种子萌发率大于90%。
[0033](3)成苗培养:将漂浮的白及小苗从母瓶中转移到MS+1.0mg/L 6-BA+2.0mg/LIAA+香蕉泥60g/L的固体培养基中(pH5.6-6.4)，培养温度28°C，光照强度3500Lx，光照时间10小时/天，培养时间15天。
[0034](4)炼苗有驯化:瓶苗在遮阴大棚中炼苗30天，控制昼夜温度在10-35°C之间，然后洗净培养基，多菌灵浸泡5分钟后，阴凉处晾干20小时。种植到人工介质中，人工介质由粗刨花、农家肥、营养土、蛭石或珍珠岩配比而成。具有分为三层，最底层铺一层刨花，中间铺农家肥6cm，最上面一层由营养土:珍珠岩(2:1)混勾而成，厚度在2cm左右。驯化温度在10-40°C之间，湿度80±5%。成活率达到95%以上。
[0035]实施例3:
(I)外植体的选择与消毒:选取安徽紫花白及的成熟果荚(9月中旬至11月中旬)为外植体，用洗衣粉将表面污垢洗净，在超净台内，用75%乙醇消毒2分钟，倾出乙醇后用无菌水清洗3次。用0.1%升汞溶液消毒25分钟，无菌水清洗4次。污染率小于5%。
[0036](2)种子的萌发:将白及种子均匀播撒在1/2MS液体培养基表面。每瓶350颗种子，温度26°C，光照强度3000Lx，光照时间15小时/天，培养时间50天。种子萌发率大于90%。
[0037](3)成苗培养:将漂浮的白及小苗从母瓶中转移到MS+3.0mg/L 6-BA+l.0mg/LIAA+香蕉泥100g/L的固体培养基中(pH5.6-6.4)，培养温度28°C，光照强度3000Lx，光照时间11小时/天，培养时间18天。
[0038](4)炼苗有驯化:瓶苗在遮阴大棚中炼苗30天，控制昼夜温度在10-35°C之间，然后洗净培养基，多菌灵浸泡5分钟后，阴凉处晾干18小时。种植到人工介质中，人工介质由粗刨花、农家肥、营养土、蛭石或珍珠岩配比而成。具有分为三层，最底层铺一层刨花，中间铺农家肥6cm，最上面一层由营养土:輕石(2:1)混勾而成，厚度在2cm左右。驯化温度在10-40°C之间，湿度80±5%。成活率达到95%以上。
[0039]经过本发明的改良，可以使组培周期缩短2个月左右，大大减少了在组培温室中培养的时间，减少了生产成本，而且由于炼苗时间也比改良前要长，使得驯化成活率要高于改良前，使得白及大规模工厂化生产成为可能。本方法中，采用种子为材料，保存方便，一次处理之后，可以随时取用，并且种子数目繁多，保证了材料的充足。
[0040]以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案，并非对本发明作任何形式上的限制，在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。
【主权项】
1.一种白及种子的液体快速繁殖方法，其特征在于，步骤包括:(1)外植体的选择与消毒，(2)种子萌发及幼苗培养，(3)成苗培养，(4)炼苗和移栽；所述种子萌发及幼苗培养步骤具体为:将白及种子在液体培养基中培养，培养条件为:温度26±2°C，光照强度3000-3500Lx，光照时间为14-16小时/天，培养时间为45-60天。2.根据权利要求1所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:所述液体培养基配方为1/2MS，pH为5.8-6.4 ;液体培养基装于规格为650mL的培养瓶中，控制培养瓶中的液体量为250-300mL，每个培养瓶接种量为300-400颗白及种子。3.根据权利要求1或2所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)外植体的选择与消毒具体为:选用9月中旬至11月中旬，成熟未开裂的白及果荚，首先用0.3%-0.5%浓度的洗衣粉水溶液浸泡15-30分钟，然后在超净台内用75%乙醇消毒2-3分钟，再用0.1%升汞溶液消毒20-25分钟，装入无菌纸袋中，33±2°C烘干。4.根据权利要求1或2所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)成苗培养采用的培养基配方为:MS, 1.0-2.0mg/L IAA, 1.0-3.0mg/L 6-BA，香蕉泥 60_100g/L，pH 为5.6-6.4 ;培养条件为:温度28±2°C，光照强度3000_3500Lx，光照时间10-12小时/天，培养时间15-20天。5.根据权利要求4所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)成苗培养采用的培养基配方为:MS，1.0mg/L IAA, 2.0mg/L 6-BA,香蕉泥 80g/L，pH 为 5.6-6.4。6.根据权利要求1或2所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)炼苗和移栽为:将步骤(3)培养获得的白及瓶苗放置在遮阴大棚中，控制昼夜温度在10-35°C之间，培养30天后，将白及瓶苗根部的培养基洗净，浸泡消毒，阴凉处晾16-20小时，然后将白及瓶苗栽种到人工介质中培养，控制培养温度10-40°C，湿度80±5%。7.根据权利要求6所述的液体快速繁殖方法，其特征在于:所述人工介质分为三层，最底层铺一层刨花，中间铺农家肥，最上面一层由营养土与蛭石或珍珠岩按照2:1的重量比混勾而成，三层介质从上到下依次厚度依次为2cm，6cm，2cm。
【专利摘要】本发明公开了一种白及种子的液体快速繁殖方法，步骤包括：（1）外植体的选择与消毒，（2）种子萌发及幼苗培养，（3）成苗培养，（4）炼苗和移栽；所述种子萌发及幼苗培养步骤具体为：将白及种子在液体培养基中培养，培养条件为：温度26±2℃，光照强度3000-3500Lx，光照时间为14-16小时/天，培养时间为45-60天。本发明可以将白及的种苗繁殖工厂化，在短时间内获得满足大规模生产所需要要的种苗，还有具有成本低、种苗生长整齐、炼苗驯化成活率高等特点。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105075858
【申请号】CN201510283520
【发明人】丁志山, 蒋福升, 钱朝东, 丁兴红, 程东庆, 陈铌铍, 高承贤, 李美芽, 鲁光耀, 杨仙
【申请人】浙江中医药大学
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年5月29日