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一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法与流程

花匠小妙招
2025-08-13 04:29

本发明属于植物组织培养，特别涉及一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法。

背景技术：

1、柊叶(学名：phrynium capitatumwilld.)是竹芋科，柊叶属多年生草本植物，株高可达1米，叶基生，长圆形或长圆状披针形，叶柄可达60厘米。

2、柊叶之叶可清热利尿，治音哑，喉痛，口腔溃疡，解酒毒等。据《南方草木状》(嵇含，公元304年)记载“南方多湿热，物易腐败变质，唯柊叶包裹存之，方可持久”。研究结果还表明，柊叶的挥发油和乙醇提取物均有较好的抗氧化功能。此外，柊叶的挥发油对常见食源性腐败菌和致病菌有显著的抑制作用。因此，柊叶还可用作具有防腐功能的包装材料，而天然可降解的环保包装材料近年来一直为人们所推崇和追寻，因此，柊叶在包装、药品和食品工业等领域均具有良好的应用前景。

3、目前，柊叶通常采用分株繁殖。例如cn108739146a公开的一种柊叶的种植方法，该方法是通过在特定季节，将母株进行分株种植，一般是从母株中分离部分新生长的粗壮植株做种苗。然而，这种繁殖方法不仅受限于时节气候，而且增殖率非常低，严重阻碍了柊叶的大规模快速繁殖，也无法保证柊叶的园艺学性状的稳定。

技术实现思路

1、为解决上述现有技术存在的缺点，本发明的目的在于提供一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法。本发明的繁殖方法采用腋芽进行离体快速繁殖，解决了传统分株繁殖增殖率低的问题。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其包括如下步骤：

4、(1)选取柊叶腋芽作为外植体，并进行消毒处理；

5、(2)取消毒后的外植体剥除苞片，接种于诱导培养基中进行丛生芽诱导培养；

6、(3)将诱导得到的柊叶丛生芽接种于增殖培养基中进行增殖培养；

7、(4)将增殖培养得到的柊叶增殖芽接入生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。

8、优选地，所述柊叶腋芽为抽芽15-20天的柊叶幼嫩腋芽。

9、优选地，所述消毒处理包括：先用水洗净柊叶腋芽上的泥沙，然后用洗衣液稀释溶液浸泡，然后用流水冲洗，然后在超净工作台上用酒精消毒，再用氯化汞溶液消毒，最后用无菌水清洗。

10、优选地，所述诱导培养基为：ms+(2.5-3.0)mg/l 6-ba+(1.5-2.0)mg/ltdz+0.1mg/l naa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶。

11、优选地，所述丛生芽诱导培养的培养温度为24-26℃。

12、优选地，所述增殖培养基为：ms+(1.5-2.0)mg/l 6-ba+(1.0-1.5)mg/l tdz+0.1mg/l naa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶。

13、优选地，所述增殖培养的条件为：培养20-25天，培养温度24-26℃，光照时间8-10h/天，光照强度2500-4000lx。

14、优选地，所述增殖培养的次数为3-4次。

15、优选地，所述生根培养基为：ms+0.1mg/l naa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶+0.5g/l活性碳。

16、优选地，所述生根培养的条件为：培养25-30天，培养温度26-30℃，光照时间8-10h/天，光照强度2500-4000lx。

17、与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明以柊叶腋芽作为外植体,通过离体快速繁殖方法进行柊叶种苗生产，结合对外植体的诱导培养基、丛生芽的增殖培养基及组培苗的生根培养基进行优化筛选，使得外植体的诱导率达到76％以上，丛生芽的增殖系数达到2.3以上，组培苗的生根率达到99％以上。本发明能快速有效地大量生产优质柊叶种苗，适合种苗工厂化生产,实现了柊叶的大规模快速繁殖，突破了传统分株繁殖方式，解决了柊叶增殖率的问题，对柊叶的规模种植和推广利用有着重要意义。

技术特征：

1.一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述柊叶株芽为抽芽15-20天的柊叶幼嫩腋芽。

3.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述诱导培养基为：ms+(2.5-3.0)mg/l6-ba+(1.5-2.0)mg/ltdz+0.1mg/lnaa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶。

4.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述丛生芽诱导培养的培养温度为24-26℃。

5.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述增殖培养基为：ms+(1.5-2.0)mg/l6-ba+(1.0-1.5)mg/ltdz+0.1mg/lnaa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶。

6.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述增殖培养的条件为：培养20-25天，培养温度24-26℃，光照时间8-10h/天，光照强度2500-4000lx。

7.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述增殖培养的次数为3-4次。

8.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培养基为：ms+0.1mg/lnaa+(25-30)g/l糖+(7-9)g/l卡拉胶+0.5g/l活性碳。

9.根据权利要求1所述的以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培养的条件为：培养25-30天，培养温度26-30℃，光照时间8-10h/天，光照强度2500-4000lx。

技术总结
本发明公开了一种以腋芽为外植体的柊叶组织培养快速繁殖方法，其包括如下步骤：选取柊叶腋芽作为外植体，并进行消毒处理；取消毒后的外植体剥除苞片，接种于诱导培养基中进行丛生芽诱导培养；将诱导得到的柊叶丛生芽接种于增殖培养基中进行增殖培养；将增殖培养得到的柊叶组培苗切除叶子和须根，接入生根培养基中进行生根培养，得到生根苗。本发明以柊叶腋芽作为外植体,通过离体快速繁殖方法进行柊叶种苗生产，能快速有效地大量生产优质柊叶种苗，适合种苗工厂化生产,实现了柊叶的大规模快速繁殖，突破了传统分株繁殖方式，解决了柊叶增殖率的问题，对柊叶的规模种植和推广利用有着重要意义。

技术研发人员：李贵雨,周日花,毛海涛,张冬雪
受保护的技术使用者：海南热作两院种业科技有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/10/28