浸花法是拟南芥转化最常用的方法.对生长5〜6周已抽苔的拟南芥打顶来促进侧枝生长.待花序大量产生时将其在含有转化辅助剂Silwet和蔗糖的农杆菌溶液中浸泡几分钟.3〜4周后收取转化植株的种子．在含有合适抗生素的平板上对种子进行筛选.能够健康生长的幼苗为转基因植株．这种转化方法不需要组织培养和� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网——
13．浸花法是拟南芥转化最常用的方法，对生长5〜6周已抽苔的拟南芥打顶来促进侧枝生长，待花序大量产生时将其在含有转化辅助剂Silwet和蔗糖的农杆菌溶液中浸泡几分钟，3〜4周后收取转化植株的种子．在含有合适抗生素的平板上对种子进行筛选，能够健康生长的幼苗为转基因植株．这种转化方法不需要组织培养和再生植株的过程，操作简便、转化效率较高．回答下列问题：
（1）若要短时间内获得大量目的基因，可采用PCR技术；该技术用到的酶是耐热的DNA聚合酶．
（2）基因工程中一般都需要构建基因表达载体，原因是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能稳定表达和发挥作用．
（3）使用农杆菌是因为它含有T-DNA能插入到拟南芥染色体DNA中，并且可以稳定的遗传给后代．目的基因整合到拟南芥染色体DNA中，引起的变异属于基因重组．
（4）上述操作过程用到的受体有农杆菌、植物细胞．
（5）若要检测转基因拟南芥的染色体DNA上是否插入了目的基因，采用的技术是DNA分子杂交技术．
分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
解答 解：（1）PCR技术可在体外大量扩增目的基因；该技术是在较高温度下进行的，因此需要用到耐热的DNA聚合酶．
（2）基因工程中一般都需要构建基因表达载体，这可使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能稳定表达和发挥作用．
（3）农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上．根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上，导致基因重组．
（4）上述操作过程用到的受体有农杆菌、植物细胞．
（5）若要检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因可采用DNA分子杂交技术．
故答案为：
（1）PCR 耐热的DNA聚合酶
（2）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能稳定表达和发挥作用
（3）T-DNA 基因重组
（4）农杆菌、植物细胞
（5）DNA分子杂交技术
点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题．
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