用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力
用清除有机自由
基
D
P
P
H
法评价植物抗氧化能
力
3
彭长连
陈少薇
林植芳
林桂珠
(
中国科学院华南植物研究
所
,
广
州
510650
)
摘要
几种抗氧化剂的浓度与其清除
1
,
1
2
二苯
基苦基
苯
肼
(
D
P
P
H
)
能力呈显著的线性相
关
.
不同抗氧化剂
清
除
D
P
P
H
能力差异明
显
.
抗坏血酸与
D
P
P
H
反应的灵敏
性高于其抑制肾上腺素氧化的能
力
.
用
D
P
P
H
法和亚
油
酸
氧化法同时测定了生长在不同光强下植物
叶片抗氧化能力的变
化
,
两种方法所得结论相一
致
.
结果表明清
除
有机自由基法是一种快速
、
简便
、
灵敏的评估植物抗氧化能力的可行方法
.
关键词
1
,
1
2
二苯基苦基苯肼
(
D
P
P
H
)
,
植物
,
抗氧化能力
,
自由基
学科分类号
Q
94
6
生物的抗氧化能力与其抗病性
、
抗逆性及延缓
衰老密切相关
.
因而从天然植物中寻找有效的抗氧
化剂应用于医药
、
食品
、
保健品
、
饮料
、
化妆品等
之中
,
或从氧化与抗氧化代谢的帄衡来探讨生物对
变化环境条件的适应性机理
,
都是当前的研究热点
之
一
.
迄今用于评价植物抗氧化能力的方法虽已有诸
抗氧化剂抗
坏血
酸
(
A
s
A
)
、
皮
素
(
Q
C
T
)
、
还
原
型
谷
胱
甘
肽
(
G
S
H
)
、
丁
基
羟
基
甲
苯
(
B
H
T
)
,
为
S
ig
m
a
公司
产
品
,
α
2
生育
酚
(
α
2
T
P
)
为
M
e
r
c
k
公
司
产
品
.
自由基捕获
剂
1
,
2
2
二羟基
苯
2
3
,
5
2
二磺
酸
钠
(
T
i
r
o
n
)
,
甲醇
,
乙醇为国产产
品
.
1
1
2
植物材料
试验植物为广东省鼎湖山常绿阔叶林中的乔木
法
1
如
硫
氰
酸
盐
(
t
h
i
o
c
y
a
n
a
t
e
)
、
硫
代
巴
比
妥
酸
黧
蒴
(
C
a
s
t
a
n
o
p
s
is
f
i
s
s
a
)
和
林
下
灌
木
九
节
法
2
(
P
s
y
c
o
t
r
i
a
r
ub
ra
)
.
盆栽
帅苗生长于本所试验地
的
自
然光强
(
10
0
%
光
)
和遮阴降低光强为自然光
的
3
6
%
和
1
6
%
条件
下
.
0
1
2
g
叶片
用
5
0
%
乙醇
浸
提
,
(
T
B
A
)
、
O
R
A
C
法
(
a
ut
o
m
a
t
e
d
o
x
y
g
e
n
r
a
d
i
c
a
l
a
b
s
o
r
b
a
nc
e
c
a
p
a
c
i
t
y
a
s
s
a
y
)
3
等
.
但这些
方法或者
手
续相当繁琐费时
,
或者所需试剂或大型仪器的费用
昂贵
,
尚缺乏一种灵敏
、
简单易行的有效方
法
.
1
,
1
2
二
苯
基
苦
基
苯
肼
(
1
,
1
2
D
i
p
h
e
n
y
l
2
2
2
p
i
c
r
y
l
2
h
yd
r
a
z
y
l
,D
P
P
H
)
是
一
种
稳
定
的
有
机
自
由
基
,
通
过
检测
生物试剂
对
D
P
P
H
自由基
的清除能力可
以
表示其抗氧化性的强
弱
.
然而对自由基信号的直接
检
测
需要使用
顺磁共振仪而使其难以普
及
.
近
年
来
,
国外
已有人
初步利
用
D
P
P
H
溶液的紫红色
吸
光
度
变
化
作
为
清
除
自
由
基
能
力
的
分
光
光
度
测
研磨和离心
(
5
00
0
×
g
,
1
5
m
i
n
)
,
定容至
1
0
m
l
.
1
1
3
有机自由基
(
D
P
P
H
)
消除能力的测定
参
考
L
a
r
r
a
u
ri
和
Y
o
k
o
z
aw
a
等
4
,
5
的
方
法
进
行
修
改
.
利用
D
P
P
H
溶液的特
征紫红色团的吸收
峰
,
以
分
光
光
度
法
测
定
加
抗
氧
化
剂
或
植
物
提
取
液
后
A
52
5
吸收的下降表示其对有机自由
基消除能
力
.
反
应
体积
2
m
l
,
D
P
P
H
溶
于少量甲醇
后
,
以
5
0
%
乙
醇
配制为
12
0
μ
m
o
l
/
L
.
植物提取液稀
释
1
0
倍
,
反
应
时
加
0
1
1
m
l
稀释的提取液
及
1
1
9
m
l
D
P
P
H
.
室
温
下静
置
2
0
m
i
n
后测吸光度变
化
.
样品
对
D
P
P
H
的
清除百分比
=
1
2
[
(
A
-
B
)
/
A
0
]
×
10
0
%
,
这
里
A
0
为未加样
的
D
P
P
H
(
1
1
9
m
l
D
P
P
H
+
0
1
1
m
l
5
0
%
乙
醇
)
的吸光
度
,
A
为样品
与
D
P
P
H
反应
后
的吸光度
,
B
为样品的空白
(
样品
0
1
1
m
l
+
1
1
9
m
l
定
4
,
5
,
但对其准确性
、
灵敏度和可行性尚未有
系
统
的探
讨
.
本文
旨在研
究
D
P
P
H
分光光度法用
以
评价植物抗氧化能力的可行性
,
为抗氧化剂的筛选
和抗氧化胁迫机理的研究提供新的方法和依
据
.
材料与方
法
1
1
1
1
仪器和试剂
紫外可
见分光光
度
计
3
中国科学
院广州分院及广东省科学院测试基金和中国科学
院
“
九五
”
重点基
金
(
K
Z
95
2
2
J
1
2
10
5
)
联合资
助
.
T
e
l
:
(
02
0
)
8770562
6
2
40
5
,
E
2
m
a
i
l
:
p
e
n
g
c
h
l
@
s
c
i
b
.
a
c
.
c
n
收稿日
期
:
199
9
2
1
1
2
2
0
,
修回日
期
:
200
0
2
0
4
2
0
2
(
B
e
c
k
m
a
n
D
U
2
7
)
,
二
苯
基
苦
基苯
肼
(
1
,
1
2
d
i
p
h
e
n
y
l
2
2
2
p
i
c
r
y
l
h
yd
r
a
z
y
l
,
D
P
P
H
)
,
肾
上
腺
素
,
硫代巴比妥
酸
(
T
B
A
)
,
亚油
酸
,
外
源
研究简
报
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