春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化
《中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集》 2007年
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单丽丽 陆瑞菊 王亦菲 孙月芳 陆惠丽 黄剑华 开通知网号
【摘要】：以春兰为研究材料,对春兰基因组 DNA 的提取以及 RAPD-PCR 反应体系进行了优化．结果表明,在提取液中加入 PVP 和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀 DNA 和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组 DNA．电泳检测表明,所获得的 DNA 完整,无降解,完全可以满足 RAPD 等分子标记分析的需要．同时对春兰 RAPD-PCR 反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰 RAPD 分子标记的最佳反应体系,即20μL 反应体系中含 1 UTaqDNA 聚合酶,60μmol/L dNTPs,2．25 mmol/L Mg2~+,1．0μmol/L 引物,1．5 ng/μL 模板 DNA．
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