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山茶花(Camellia japonica)花卉中多酚的提取、纯化及抗氧化活性研究

【摘要】: 山茶花(Camellia japonica)为山茶科山茶属植物,它不仅有观赏价值还具有一定的药用价值,其花和叶片可起到清热、消刺痛、止血等作用。多酚广泛的存在于植物的皮、根、叶、花和果实中,具有抗氧化、抗肿瘤、止血、抗菌等作用,在食品、医药及其他领域有着广阔的应用前景,因此,从植物多酚中筛选功能食品活性物质或药物有效成分是近年研究的热点。有研究表明,山茶花的叶片中含有多酚,这可能与它具有清热、消刺痛、止血等作用相关联。而对山茶花花卉的研究仅限于从中提取色素,对其中多酚的研究尚未见报道。因此,本文开展以山茶花花卉为原料,从花卉中浸提和纯化多酚的研究工作。首先,通过单因素和正交实验确定了最佳的浸提条件,得到粗提液;然后,再比较三种方法(有机溶剂萃取法、金属离子沉淀法和大孔树脂吸附法)纯化粗浸提样品的优缺点,找到一种好的纯化方法,并将该方法所纯化的多酚进行后续的抗氧化活性实验,为利用山茶花花卉进行大规模生产多酚奠定基础。其具体研究结果如下:1.粗提液的浸提条件实验:在单因素实验中,考察温度、时间、料液比和溶剂浓度等因素对多酚提取的影响,然后采用正交实验方法,确定最佳浸提条件。结果表明,最佳浸提条件为:浸提溶剂为60%乙醇,温度为80℃,浸提时间为30min,料液比为1:35。在该条件下,所得粗提液的浸出率为7.84%。2.三种纯化方法比较:分别用有机溶剂法、金属离子沉淀法和大孔树脂吸附法纯化多酚。有机溶剂法中选用氯仿为脱色剂,乙酸乙酯为萃取剂对粗液提中的多酚进行萃取;金属离子沉淀法中研究了金属离子、pH、碱性溶液、碱性溶液的浓度对沉淀率的影响;大孔树脂吸附法中对大孔树脂吸附的流速、上样液的浓度及洗脱液的浓度做了测定。结果显示金属离子沉淀条件以A13+作为沉淀剂,0.5-1mol.L-1NaHCO3溶液调节pH,最佳pH为5.5,最后收率为7.27%;以1-1.5mL.min-1的速度上样到大孔树脂柱上,样品浓度以3mg.mL-1左右较好,用80%乙醇作为洗脱剂,解析率可达95.76%。有机溶剂法所提多酚的纯度为72.28%,金属离子沉淀法所提多酚的纯度为74.17%,大孔树脂吸附法所提多酚的纯度为89.34%,可见,大孔树脂吸附法优于前两种方法。3.抗氧化活性实验:用大孔树脂方法提取的多酚做抗氧化活性实验,结果显示,山茶花多酚对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的最大清除率达到92.86%,对自由基-OH的最大清除率为90.77%,对02-·的最大清除率为47.79%,0.5mg.mL-1多酚的总抗氧化能力为138.93U.mg-1。总之,采用三种方法(有机溶剂法、金属离子沉淀法和大孔树脂吸附法)纯化粗提液中的多酚,发现用大孔树脂吸附法纯化所得的多酚纯度和收率都较高,优于其它两种方法,而且抗氧化活性实验表明,大孔树脂吸附法所得多酚具有较强的抗氧化活性。这些结果为今后山茶花花卉的多酚应用于食品和医药等方面提供基础资料。

【学位授予单位】:重庆师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013


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所属分类:花卉
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