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核桃种皮多酚的提纯鉴定及抗氧化活性研究

花匠小妙招
2024-11-03 08:07

摘要

核桃富含的维生素、蛋白质、矿物质和多酚等物质，具有很高的营养价值。在工业生产中，核桃副产物核桃种皮含有多种多酚活性成分，具有抗氧化、抗肿瘤、抑菌、消炎等功效。目前，应用较多的核桃去皮法还是传统的碱液浸泡法，而且很多的关于核桃种皮的研究仅仅是对新鲜核桃种皮的研究。因此，本论文以山西汾阳纸皮核桃为原料，研究新的核桃去种皮方法——盐液浸渍法的科学性。同时，收集副产物核桃种皮，从中超声波辅助提取多酚类物质，并对提取物进行初步纯化、鉴定及体内、外抗氧化活性的研究。主要研究结果如下:
　　(1)利用新的脱除核桃种皮的方法——盐液浸渍法，较之碱液浸泡法，核桃仁营养成分保留较完整，无限制性氨基酸，且氨基酸评分比后者高026，不饱脂肪酸减少量是后者的一半;核桃种皮中多酚含量分别为15.32％、4.26％。表明盐液浸渍法去皮效果更好，且能够保留更多的活性成分，提高附加值。
　　(2)超声波辅助提取核桃种皮多酚，超声功率300W，频率为50Hz，乙醇浓度70％，提取时料液比为1∶50，提取温度为50℃，提取时间为50min，在该条件下，核桃种皮多酚的得率达到15.34％。
　　(3)大孔吸附树脂NKA-9的综合吸附解析效果最好，动态吸附解析后，核桃种皮多酚类物质的纯度为66.32％。
　　(4)显色反应表明，核桃种皮多酚类物质中多酚及酚羟基的特征反应较明显。紫外-可见吸收光谱分析表明提取物中含有多酚及黄酮类物质。红外光谱分析结果表明，核桃种皮多酚中含有乙酰化的酸性多酚;核桃种皮多酚类物质的HPLC谱图表明，核桃种皮多酚中可能含有主要的物质分别为没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、咖啡酸、香草酸、丁香酸、槲皮素，摩尔比为19.192∶30.836∶9.341∶13.936∶0.563∶7.824∶0.651∶5.406。
　　(5)核桃种皮多酚的体外抗氧化活性研究结果表明，核桃种皮多酚具有较强的还原力、清除DPPH·自由基、羟自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)及脂质过氧化物能力，在一定范围内随浓度的增加而增加;抗氧化能力与茶多酚相当，略低于VC。
　　(6)选用D-半乳糖衰老模型的小鼠，分别灌胃50、100、200mg/kg.bw.d剂量的核桃种皮多酚水溶液，七周后，对小鼠进行Morris水迷宫实验，结果表明，模型建造成功，剂量组小鼠的记忆能力明显强于模型组小鼠，核桃种皮多酚具有一定的提高记忆力的作用，作用效果与等剂量的茶多酚相当。
　　(7)选用D-半乳糖衰老模型的小鼠，分别灌胃50、100、200mg/kg· bw·d剂量的核桃种皮多酚水溶液，同时灌胃茶多酚进行对照研究。研究结果表明，核桃种皮多酚可能能够抑制脂肪的形成、降低脑细胞的凋亡率、降低脑和肝细胞中活性氧水平、减少不饱和脂肪酸的氧化，保护脑细胞免受损伤。同时还可能能够有效显著提高脑组织、血清和肝脏中的总抗氧化能力、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力，降低脑组织、肝脏和血清中的丙二醛含量，同时提高脑组织和肝脏中的谷胱甘肽过氧化物酶活力。核桃种皮多酚的抗氧化作用效果有一定的剂量依赖性，相同浓度下与茶多酚的作用效果相当。展开▼