茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取、分离纯化及抑菌性研究
茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取、分离纯化及抑菌性研究
作 者: 卢雯静导 师: 方世辉; 宁井铭
学 校: 安徽农业大学
专 业: 茶学
关键词: 茶皂素 茶多酚 茶树花 提取分离纯化 抑菌
分类号: R284.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
茶树花是茶树（Camellia sinensis（L.）O.Kuntze）的生殖器官之一。茶树花中含有丰富的茶多酚、茶皂素、茶多糖、氨基酸和维生素等多种生物活性物质，对人体具有解毒、降脂、抗癌、养颜等多种功效。本文利用超声波辅助提取技术对茶树花中茶皂素和茶多酚进行综合提取和分离纯化，并对其抑菌性进行研究，旨在开发茶树花中天然活性物质资源，为茶树花的综合利用提供理论依据。茶皂素（Theasaponins）是山茶科（Theaceae）山茶属（Camellia）植物茶叶皂素的统称，是一类结构相近的七墩果烷型五环三萜类皂苷的混合物，广泛存在于茶树的根、叶、种子和花中，茶皂素是一种性能良好的天然的表面活性剂，具有祛斑、消炎、止咳、镇痛、抗渗透、杀菌、杀虫及促进植物生长等多种作用。茶多酚（Tea Polyphenols，简写TP）亦称“茶鞣质”、“茶单宁”，是一类存在于茶树中的多元酚的混合物，它不仅是一种天然无毒的抗氧化剂，而且也是一种理想的天然药物，具有抗氧化、抗病毒、抗菌、抗辐射和抗癌等多种保健功能和药理作用。实验以茶树花为材料，采用超声波辅助浸提技术对茶树花中茶皂素和茶多酚进行综合提取，分别以乙醇浓度、浸提温度、料液比、超声波功率、浸提时间为因子，首先进行单因素实验，在单因素实验的基础上，采用正交试验对乙醇浓度（A）、浸提温度（B）、料液比（C）、超声波功率（D）和浸提时间（E）进行优化。方差分析结果表明，对茶皂素得率影响显著的因素依次为：A、D、B、E、C，而对茶多酚得率影响显著的因素依次为：A、B、D、E、C，研究结果表明，茶皂素和茶多酚最佳综合浸提工艺条件为：乙醇浓度为70%，浸提温度为60℃，料液比为1:30g/mL，超声波功率为350W，浸提时间为10min，在此条件下，茶皂素和茶多酚的浸提得率达到23.69%和28.38%，此最佳浸提工艺提取的结果重复性好。实验采用大孔树脂对浸提粗品分离纯化，首先通过静态吸附实验，从HPD100、HPD722、AB-8、D101、DM130这五种常用大孔吸附树脂中筛选出比较适宜的大孔树脂，根据这五种大孔树脂对茶皂素和茶多酚的吸附率和解析率的情况，最终选择DM130为最佳大孔吸附树脂用于产品的分离纯化。将DM130大孔吸附树脂装入层析柱后，采用不同浓度梯度的乙醇溶液进行洗脱，最后将两种物质的样品流份进行浓缩干燥，通过分光光度法得出茶皂素和茶多酚样品的纯度分别为90.9%和87.3%。利用茶皂素和茶多酚样品对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、四联球菌和酵母菌的抑菌试验，来研究这两种天然提取物的抑菌性。结果表明，茶皂素和茶多酚对这四种菌都有一定的抑制作用，特别是茶皂素对酵母菌的抑制性非常强。
全文目录
中文摘要 3-4
Abstract 4-6
目录 6-8
1 文献综述 8-19
1.1 茶树花概述 8
1.2 茶皂素的概述 8-14
1.2.1 茶皂素的结构 8-9
1.2.2 茶皂素的理化性质 9-10
1.2.3 茶皂素提取方法的研究 10-12
1.2.4 茶皂素的纯化方法 12-14
1.3 茶多酚 14-19
1.3.1 茶多酚的概述 14-15
1.3.2 茶多酚的主要生理活性和药效作用 15-16
1.3.3 茶多酚的提取方法研究进展 16-17
1.3.4 茶多酚的纯化方法 17-19
2 引言 19-21
2.1 研究目的及意义 19
2.2 研究的主要内容及技术路线 19-21
2.2.1 茶皂素定量测定中去干扰研究 19
2.2.2 茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取技术 19
2.2.3 茶皂素和茶多酚分离纯化 19
2.2.4 茶皂素和茶多酚相关抑菌的研究 19-20
2.2.5 技术路线 20-21
3 材料与方法 21-28
3.1 材料、试剂及仪器 21-22
3.1.1 实验材料 21
3.1.2 试剂及试材 21
3.1.3 实验仪器与设备 21-22
3.2 实验方法 22-28
3.2.1 茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取 22-24
3.2.2 茶皂素和茶多酚的分离纯化 24-25
3.2.3 茶皂素和茶多酚的鉴定分析 25-27
3.2.4 茶皂素和茶多酚的抑菌试验 27-28
4 结果与分析 28-40
4.1 茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取 28-32
4.1.1 PVPP对茶皂素测定影响 28
4.1.2 单因素浸提效果的分析 28-30
4.1.3 正交试验结果分析 30-32
4.1.4 验证实验结果 32
4.2 大孔树脂分离纯化 32-33
4.2.1 大孔树脂的筛选 32-33
4.2.2 大孔树脂洗脱纯化试验结果 33
4.3 茶皂素和茶多酚的鉴定实验结果 33-36
4.3.1 茶皂素的鉴定实验结果 33-35
4.3.2 茶多酚的鉴定实验结果 35-36
4.3.3 茶皂素和茶多酚的纯度 36
4.4 抑菌试验 36-40
5 讨论 40-43
5.1 茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取 40
5.2 茶皂素和茶多酚的分离纯化 40
5.3 茶皂素和茶多酚样品的鉴定分析 40-41
5.4 茶皂素和茶多酚的抑菌试验 41-43
6 结论 43-44
6.1 茶树花中茶皂素和茶多酚的综合提取 43
6.2 茶皂素和茶多酚的分离纯化 43
6.3 茶皂素和茶多酚的抑菌试验 43-44
参考文献 44-50
附录 50-51
致谢 51-52
作者简介 52
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