利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究
利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究-南京农业大学学报
摇 南京农业大学学报摇 2013,36(5):45-50 http:/ / 摇 Journal of NanjingAgricultural University doi:10.7685/ j.issn.1000-2030.2013.05.008 試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試 刘鹏,陈素梅,房伟民,等.利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究[J].南京农业大学学报,2013,36(5):45-50 利用卡那霉素筛选菊花转基因植株的方法研究 刘鹏,陈素梅,房伟民,蒋甲福,管志勇,陈发棣* (南京农业大学园艺学院,江苏 南京210095) -1 摘要:将菊花品种‘神马爷的叶盘和茎段分别接种含有0、5、7.5、10、15和20 mg·L 卡那霉素(Kan)的再生培养基和生根培 养基上,以建立简单有效的转基因菊花Kan抗性株系的筛选方法。 结果表明:菊花叶盘不定芽分化筛选和生根筛选的Kan -1 临界耐受质量浓度分别为10 和7.5 mg·L 。 通过农杆菌介导法转化2400个叶盘,经Kan筛选后得到358个抗性不定芽, -1 经Kan生根筛选后得到65个生根株系。 为了有效剔除假阳性植株,用500 mg·L 的Kan溶液浸泡菊花转基因再生株系的 叶片,通过性状观察筛选出6个Kan抗性株系,且6个抗性株系都通过PCR手段得到验证。 表明成功建立了简单有效的筛 选转基因菊花的方法。 关键词:转基因菊花;卡那霉素;抗性再生;筛选 中图分类号:S682.1摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2013)05-0045-06 Study on screening method of transgenic chrysanthemum using kanamycin LIU Peng,CHEN Sumei,FANG Weimin,JIANGJiafu,GUAN Zhiyong,CHEN Fadi* (College of Horticulture,Nanjing Agricultural University,Nanjing210095,China) Abstract:In order to establish simple and effective method of screening marker gene in chrysanthemum which was resistant to kanamycin(Kan),the leaf鄄disks and shoots of a chrysanthemum cultivar‘Jinba爷were inoculated into regeneration medium and rooting medium with0,5,7.5,10,15 and2 -1 0 mg·L of Kanrespectively.Theresults showedthat the critical concentrationfor shoot -1 -1 regeneration and rooting for
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